河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(4086)

1、河南农业大学考研专业课现代分子生物学课程试卷（含答案）学_年第 _学期考试类型：（ 闭卷）考试考试时间 ： 90 分钟年级专业学号姓名1、分析题（ 5 分，每题5 分）1. 写出从组织中抽取RNA勺关键步骤，并解释如何判断 RNA质量。答案：1）从组织中提取 RNA 的步骤如下：将组织在混合气体中磨碎，每 50 100mg组织加入1mlTRIzol 裂解液溶解样品,充分吹打混匀。 每 1ml TRIzol 加入 2.0ml氯仿，剧烈震荡 15s ，室温放置5min 。 4 C, 10000g 离心 15min,此时 RNA 主要集中在水相中。 将水相转移至新的离心管中，加入等重量异丙醇,室温放

2、置10min 。 4C, 10000g 离心 10min,此时可在离心管底部观察到白色沉淀,即为 RNA 。 用 75 冷勺乙醇洗涤沈淀,475C0,0g 以下,离心 5min ,弃上清。 超净台中吹干，加入无 RNase的水溶解。（2）检测 RNA 质量的方法如下： 凝胶成像：取适量RNA溶液选择退出电泳缓冲液后，跑琼脂糖 凝胶电泳，如果 28S 和 18S 条带明亮、清晰，并且 28S 的亮度在 18S 条带的两倍以上，则认为 RNA 的质量是好的。 吸光度检测：使用紫外分光光度计检测 RNA样品在260nm、 280nm 处的吸光度，若两者的比值在 1.82.0时，可认为RNA纯 度良好

3、，蛋白质等其他物质的污染可以接受。解析：2、判断题（ 55 分，每题 5 分）1. 癌细胞生长旺盛，因而内质网特别发达。（ ）答案：正确解析：内质网是细胞内除核酸的一系列重要的生物大分子，如蛋白质、 脂类（如甘油三酯） 和糖类合成的基地。癌细胞生长旺盛，可能需要 大量的蛋白质、脂质、糖类等，因而内质网特别更发达。2. 生物体的部分组织或器官因创伤而丢失时，剩余部分的肌肉、骨骼、皮肤等组织的细胞均能继续生长，从而形成与丢失部分形态和功 能上大致相同的结构，这一过程称为再生。（） 答案：错误 解析：再生是生物体的整体或器官受外力作用发生创伤而部分丢失， 在剩余功能的基础上又生长出与丢失部分在形态与

4、部分上相同的结构， 这一修复过程称为再生。受到创伤之后，剩余更进一步个别的细胞并 不一定均能继续生长。3. SDSPAGE 时，不同大小蛋白质分子的电荷质量比值趋近于相同。 （）答案：正确解析：4. 在原核基因操纵子中都有 CRP位点。（）答案：错误解析：色氨酸操纵子无 CRP 位点。5. 真核生物的5S、18S和28S rRNA通常组成一个单位进行转录。（）答案：错误解析：真核生物 5S rRNA 基因也是成簇排列的，中间被不转录区域隔开，由RNA聚合酶皿转录。1618S、5.8S和2628SrRNA基因组 成一个转录单位，彼此被间隔区分开，由 RNA聚合酶I转录。利福霉素SV和利福平都是转

5、录起始抑制剂而不是 RNA链延长的 抑制剂。答案：正确 解析：在RNA聚合酶中，只有带。因子的全酶才能专一地与 DNA 上的启动子结合，合成均一的产物，c脂质的作用只是启动RNA的转 录，一旦转录开始，就脱离起始复合物，而由核心酶负责 RNA 链的延 伸。利福霉素的作用机制是抑制菌体内 RNA聚合酶的活性，从而影 响核糖核酸的合成和蛋白质代谢，导致细菌束丝藻生长繁殖停止而达 到杀菌作用。利福平的作用是与依赖于 DNA的RNA多聚酶的B亚 单位牢固结合，抑制细菌 RNA 的合成，防止该酶与 DNA 连接，从而 阻断 RNA 转录过程，使 DNA 和酵素的合成停止。因此，利福霉素 SV 和利福平的

6、作用都是抑制转录起始。6. 在能识别一个细胞的分化以前，有一个预先保证细胞怎样变化的 时期，这一阶段被称为细胞决定。（ ）答案：正确解析：细胞决定是所称细胞在发生可识别的形态变化之前，就已受到 约束特殊而向特定方向分化， 这时细胞内部已发生变化，弄清了未来 的发育命运。7. cDNA文库是包含有细胞中所有 mRNA因此该文库能包含细胞所 有的遗传信息。（ ）答案：错误解析： cDNA 文库不涵盖有细胞中所有 mRNA ，因此该文库也不能包 含细胞所有的遗传信息。 cDNA 文库只是包含有特定细胞类型和发育 时期细胞中的表达包涵信息。8. 由于遗传密码子的简并性，一个氨基酸可以有几种 tRNA但

7、通常只有一种氨酰tRNA合成酶。（）答案：正确解析：许多胺基酸的密码子的第 1 和第 2 个碱基相同，只有第 3 个碱 基不同，即为核苷酸的简并性。由于遗传密码子的简并性，一个氨基 酸可以有几种 tRNA ，但有时只有一种氨酰 tRNA 合成酶。9. 在杂交之前先用凝胶电泳把粗提取物中的 RNA或 DNA分子进行 分离，假定杂交后只有一种或少数几种大小的片段被探针杂交上了， 就能肯定这种杂交是特异性的。（ ）答案：正确解析：在杂交之前先用凝胶电泳把粗提取物中中曾的 RNA 或 DNA 分子进行分离，分离为不同大小的片段。假定杂交后只有举例来说一种 或少数几种大小的片段被探针杂交上了，就能肯定这

8、种杂交是特异性 多态性的。10. DNA 是生物界中唯一的遗传物质。（ ）答案：错误解析： RNA 也可以做遗传物质。3 、名词解释（ 50 分，每题 5 分）1. SD 序列 扬州大学 2019 研答案：SD序列指存在于原核生物起始密码子 AUG上游712个残基 处的一种47个核苷酸的保守片段。它与16SrRNA3 '端反向互补，SD 序列帮助招募核糖体 RNA ，并将核糖体比对并结合到信使 RNA 的起始密码子，从而开始蛋白合成。一旦被招募， tRNA 可以按照密 码子的指令顺序添加氨基酸，从翻译起始位点向下游传输数据进行蛋 白质合成。解析：空2. 基因组 答案：基因组是指生物体内

9、遗传信息的集合，是植物某个特定物种细 胞内全部 DNA 分子的总和。包括核中的染色体 DNA 和线粒体、叶绿 体等亚细胞器中曾的 DNA 。基因组大小与原核生物和低等真核生物的 形态复杂性呈正相关，在软体动物和其他高等真核生物中所，由于重 复 DNA 的存在，基因组大小不再与生物的绝不形态复杂性呈正相关。解析：空3. 核酸原位杂交 答案：核酸原位杂交是指用标记了的已知序列的核苷酸片段作为探针， 通过杂交直接在组织肉片、细胞涂片、培养细胞爬片、或分裂中期染 色体上检测和定位同一个特定的靶核苷酸存在的靶技术。核酸原位杂 交的生物化学基础是核酸的变性、复性和碱基互补配对结合。核酸原 位杂交有 DNA

10、RNA 杂交、 DNADNA 杂交和 RNARNA 杂交等。解析：空整合感染答案：整合感染是指某些 DNA 在感染复制过程个别中可以将自身全 部或部分 DNA 片段整合到宿主蛋白质 DNA 中，并随宿主细胞的复制 遗传给下一代的感染方式。逆转录病毒的 RNA 反向转录产物 cDNA 即前病毒也可以整合到宿主的 DNA 中的感染，这种感染参与病毒致 肿瘤机制。解析：空4. G 蛋白答案：G蛋白又称三聚体GTP结合调节蛋白，是指由a、B、迂个 亚基组成，能与 GDP 或 GTP 结合的外周蛋白。以三聚体存在并与 GDP结合者为即非活化型，位于细胞膜。当 a亚基与GTP结合并导 致By二聚体脱落时则

11、变成活化型，神经递质可作用于膜受体的不同性 激素，通过不同的 G 蛋白负面影响介导影响质膜上某些离子通道或酶 的活性，继而影响细胞内第二信使浓度和后续的生物学效应。解析：空5. 癌基因答案：癌基因是朊病毒指体外能引起细胞转化，在体内继发性肿瘤的 基因，它是细胞内遗传物质动物细胞的组成成分。在正常情况下，这 些基因处于静止或低表达状态，低毒性对高负荷细胞不仅无害而且不 可缺少。癌基因激活的方式包括表型点突变、基因扩增、染色体重排、 病毒感染等。癌基因激活的失活结果是其数目增多或功能增强，使细胞过度增殖及获得其他恶性特征，从而形成恶性肿瘤。癌基因主要分 病毒癌基因和细胞转化基因。解析：空6. 原位

12、杂交技术（ ISH）答案：原位杂交技术是指运用有分子单链之间核酸互补的碱基序列， 把有放射性或非放射性的外源核酸（即探针）和组织、蛋白或染色体 上待测 DNA 或 RNA 互补配对，大分子结合成专一的核酸杂交分子， 经一定的检测手段把待测核酸在组织、细胞或染色体上等位基因的位 置显示出来的一种生物技术。原位杂交技术通常可分为 RNA 原位杂交 和染色体原位杂交两大类。解析：空7. 外显子 扬州大学 2019研答案：外显子也表示表达序列，是指一个基因表达为多肽链的部分， 是指在 RNA 剪接后仍会被保存下来，并可在蛋白质生物合成过程中同 被表达为蛋白质蛋白质的基因序列。外显子最初是既存在于最初的

13、转 录中间体中，也存在于成熟的 RNA 分子中的核苷酸序列。所有子代的 外显子一同组成了遗传信息，该信息会体现在酶上。解析：空8. 滚环复制（ rolling circle replication ） 答案：滚环复制是单向复制的一种特殊方式，是指 DNA 的合成由对 正链原点的专一性切割开始，所形成的自由 5 '端被从双链环中置换出 来并为多肽DNA结合蛋白所覆盖，使其3 ' 0端在DNA聚合酶的作 用下不断延伸。在这个过程中，单链尾巴的延伸与双链 DNA 的绕轴 旋转同步。滚环复制是噬菌体中所常见的 DNA 复制方式。解析：空9. Probe 宁波大学 2019 研答案： P

14、robe 的中文名称是超声波，即核酸探针，是指一段带有检测 标记、且顺序已知的、与目的基因互补的核酸序列。当将探针与样品 杂交时，探针和与其互补的核酸（ DNA 或 RNA ）序列通过氢键紧密 相连，随后未被杂交的多余探针被无用洗去。最后，根据质谱仪的标 记物种类，可成功进行放射自显影、荧光发光、酶联化学发光等方法 来氨基酸判断样品中是否或者何右边含有被测序列。解析：空4、填空题（ 40 分，每题 5 分）1. RNA 是由核糖核苷酸通过键连接而成的一种多聚体。答案：磷酸二酯解析：RNA是由核糖核苷酸通过3 '羟基和5的磷酸基团形成3 ' 5 '磷酸 二酯键。2. 原核

15、生物细胞中DNA甲基化位点主要是在序列上，而真核生物细 胞核DNA的甲基化位点则主要是在序列上。答案： GATC|CG 解析： DNA 甲基化为 DNA 化学修饰的一种形式，能够在不改变 DNA 序列的前提下，改变遗传表现。通常指在 DNA 甲基化转移酶的作用下， 在基因组 CpG 二核苷酸的胞嘧啶 5 碳位共价键结合一个甲基基团。原 核生物细胞中 DNA 甲基化位点主要是在 GATC 序列上，而真核生物 细胞核 DNA 的甲基化位点则主要是在 CG 序列上。3. DNA复制时的RNA引物是由的活性切除的。答案：DNA聚合酶I |53 '外切核酸酶解析：DNA聚合酶I具有5 7 3 &

16、#39;外切核酸酶活性，可以切除NA引 物。4. 大肠杆菌乳糖操纵子包括三个结构基因：、 lacY 和 lacA ，以及、 操纵基因和。答案： lacZ| 启动子|阻遏子解析：大肠杆菌乳糖操纵子三个结构基因：Z （编码B半乳糖苷酶）、Y （编码B半乳糖苷酶透过酶）、A （编码B半乳糖苷乙酰转移酶），以及启动子（P）、操纵基因（0）、阻遏子（I）。5. 大肠杆菌在含有乳糖和葡萄糖的培养基中，只利用为碳源，这是 因为位点的正调控开关被关闭。答案：葡萄糖 |乳糖操纵子启动子区 CRPcAMP 结合位点解析：在大肠杆菌中，在有葡萄糖存在的市场条件下，其他碳源相关 基因表达的操纵子如乳糖操纵子的基因表达

17、受葡萄糖中间代谢产物的 抑制，是代谢物阻抑。葡萄糖的代谢中间产物会间接降低细胞内腺苷 酸环化酶的活性，导致胞内 cAMP 的含量降低，与它相结合的正宏观 调控蛋白（CRP）因找不到配体而不能形成复合物（CRPcAMP ），该 酵素是激活乳糖操纵子的重要组成部分，细菌对此复合物的资金需求 是独立的，与阻遏体系无关，转录必须有此复合物结合在 DNA 的启动 子区域上。6. 一个两股链都带放射性的 DNA分子，在无放射性标记物的体系中， 经两次复制，其产生的子代 DNA分子中，有个DNA分子不带放射性。答案：2解析：DNA复制为半不保留复制。一次复制后，子代产物中几条链中 两条中间体带有放射性，两条

18、不带。经过两次复制，产生的八条几条 链中只有两条带有放射性元素。因此，由 2 个 DNA 分子不带放射性。7. 在切口移位标记探针时，DNasel处理DNA的温度应控制在，温度 过高会使，不利于标记。答案：1416 C |DNase I的活性增强、导致切口过多、使DNA探 针的长度变短解析：薄片平移法是合成探针标记的方法之一，即利用微量的 DNasel 使待标记的双链 DNA 氢原子产生若干切口，然后利用 DNasel 的 53 '外切酶活性从切口的端除去核苷酸；同时DNasel还有53 '的聚合酶活性可将反应体系中多中所的核苷酸底物连接到切口的3 '羟基末端。由于在切

19、去核苷酸的同时又在切口的 3 '端补上核苷酸，从而 使切口沿着 DNA 链移动，此时若反应体系中含有标记的核苷酸，它们 就会掺入到新合成的链中，获得带有标记的 DNA 探针。在此投资过程 中需要注意DNasel处理DNA的温度应控制在1416 C,温度过高 会使DNase I的活性增强、导致切口过多、使 DNA探针的长度变短, 不利于标记。8. DNA 通过分子折叠形成的三股螺旋叫，它存在于区，因而具有重 要的生物学意义。答案： HDNA| 基因的调控区解析：5、简答题（ 35 分，每题 5 分）1. 简述翻译的主要过程及特点。 武汉科技大学 2019 研答案：（1 ）翻译的主要处理过

20、程如下： 起始：起始核糖体与mRNA结合并与氨酰tRNA形成翻译起 始复合物。 延长：每加一个氨基酸经过位次、成肽和转位，使肽链从N端向 C 端延长。 终止：当mRNA经常出现分子中的终止密码子出现后，多肽链 合成停止，肽链从肽酰 tRNA 中释出， mRNA 、核蛋白体等分离。（2 ）翻译的特点如下： 每生成一个肽键，要消耗2个高能磷酸键。 氨基酸活化要消耗 2 个高能磷酸键。 整个过程可能多于 4 个高能磷酸键。解析：空2. 简述RNA的种类和各自的生理功能 答案： RNA 的种类及各自的性腺如下表所示。表 RNA 的种类及新陈代谢解析：空3. 什么是比较基因组学？简述它们在遗传学中的运用

21、。答案：（1）比较基因组学是指基于基因组图谱和测序基础上，对已知的基因和基因组结构进行比较，来了解抗原的功能、表达机理和 物种进化的学科。（2）比较基因组学在遗传学中的应用：利用模拟生物基因组与人 类基因组之间编码顺序上和结构上的同源性，克隆人类细胞学说，无 腺揭示基因功能和疾病分子机制，阐明物种变异关系，及线粒体的内 在结构。解析：空4. 简述蛋白质的生物合成过程。 暨南大学 2018研答案： 蛋白质生物合成是蛋白质最为复杂的活动之一。参与细胞 内蛋白质生物合成的物质除氨基酸外，还需要 mRNA 作为模板、 tRNA 作为特异的氨基酸“搬运工具”、核糖体作为蛋白质合成的装 配场所、有关的酶与

22、蛋白质因子参与反应、 ATP 或 GTP 提供能量。翻 译过程包括起始、延长和终止三个发展阶段。生物合成整个过程如下：1）起始：该过程是指 mRNA 、起始氨基酰 tRNA 分别与核糖体结合而形成翻译起始复合物(2) 延长：翻译起始复合物已经形成后，核糖体从 mRNA的5 ' 端向3 '端移动，依据密码子顺序，从N端开始向C端合成多肽链。这 是一个在核糖体上重复进行的进位、成肽和转位的循环过程，每完成 1 次，肽链上即可增加 1 个氨基酸残基。该过程也被称为核糖体循环。 这一过程除了需要 mRNA 、tRNA 和核糖体外，还需要有数种延长因 子以及 GTP 等参与。( 3 )终

23、止：终止密码子没有被任何氨基酰 tRNA 识别，释放因子 RF 能识别终止密码子而进入 A 位，这一识别过程需要水解 GTP。 RF 的结合可触发核糖体构象分子结构改变，将肽基转移酶活性转变为酯 酶活性，水解组氨酸与结合在 P 位的 tRNA 之间的酯键，释出合成的 肽，促使 mRNA 、tRNA 及 RF 从核糖体脱离。 mRNA 模板和各种蛋 白质因子、其他组分都可被再次利用。解析：空5. 简述染色质免疫沉淀技术( chromatin immunoprecipitation ) 的原理和应用。答案： 染色质利用计算机免疫沉淀技术是指研究体内蛋白质和 DNA 相互作用的一种技术。它运用抗原抗

24、体反应的特异性，可以真实 地体内蛋白因子和基因组 DNA 结合的状况。( 1)染色质免疫沉淀技术的基本原理在节律状态下把细胞内的 DNA 与蛋白质合成物在一起，通过超 声或酶处理将染色质切为小片段后，利用抗原抗体的特异性识别反应， 将与目的蛋白相结合的 DNA 片段沉淀下来，固相通过对目的片段的 色谱法与检测，从而取得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。染色质免 疫沉淀技术一般包括细胞固定，染色质断裂，染色质免疫沉淀，交联 反应的逆转， DNA 的纯化，和 DNA 的鉴定。（2）染色质免疫沉淀技术的应用 检测体内酯因子和 DNA 的动态作用。 CHIP 和体内足迹重寄生结合，用于寻找反式因子的体

25、细胞结合 位点。 组蛋白的各种共价修饰和基因表达的关系。 染色质免疫沉淀技术和其他方法的结合，扩大了其应用范围，如 CHIP 和基因芯片相结合建立的 CHIPONCHIP 方法已广泛用于特 定反式因子靶基因的高通量筛选。 RNACHIP 用于研究 RNA 在基因表达调控中会的作用。解析：空6. 在一定条件下，运用基因敲除技术敲除掉某个基因并不一定就能 获知该基因的功能，试分析其原因。答案： 基因敲除技术又称基因打靶，是指通过一定的途径使机体 特定的基因失活或缺失的技术。敲除掉某个基因并不一定就能获知该 基因的功能，可能的原因如下：（1）许多基因在功能上是高速缓存冗余的，敲除掉一个在功能上 缓存

26、的基因，并不能辨认造成容易识别的表型，因为基因家族的其他 成员可以提供同样的功能。（2）现有的技术实验技术和工具无法检测其功能。（3）许多基因组在细胞分裂、生长和发育过程中均发挥重要作用， 如稀莶拟南芥有10002000个必需基因，敲除这些基因会配子体或 早期胚的致死性，因而无法获得必需基因的纯合突变体，也就没有对 必需蛋白基因的纯合突变体的表型进行评价。（4）该基因在功能上“无用”或作用很小，以至于难于获知其具 体功能。解析：空7. 重组DNA（基因工程）的主要步骤。答案： 重组 DNA 又称基因工程，是指在恶意软件体外将核酸核 酸插入病毒、质粒或其他载体分子中所，行成遗传物质的重新组合，

27、使之进入原先不能这类分子的寄主细胞内并核酸进行持续稳定的繁殖 和表达的过程。重组 DNA 的主要包括步骤主要包括包括以下 4 个基本步骤： （1 ）提取目的基因：通过一定的方法得到需要进行的目的 DNA ， 常用的方法有人工合成法、基因组文库法和 cDNA 文库法。（2）目的基因与运载体融为一体：通过限制性内切酶对含目标片 段的 DNA 和载体进行切割后，通过 DNA 连接酶进行连接，完成基因 的重组计划过程。（ 3 ）将目的基因导入应受体细胞：将人工重组的 DNA 分子导入 能成功进行正常复制的寄主细胞，从而随着寄主细胞的分裂而瓦解需 要进行复制。（4）目的基因的检测和表达：目的基因导入受体

28、细胞后，检测与 鉴定其是否可以稳定维持和表达其遗传特性。受体细胞必须表现出特 定的性状，才能说明目的基因完成了传达过程。解析：空6、论述题（ 20 分，每题 5 分）1. 如果想让人的胰岛素基因在细菌中表达生产人胰岛素，你认为至 少应当满足哪些条件？答案： 欲在细菌中唤起生产人的胰岛素，需要将人的胰岛素基因 克隆到一个细菌表达载体上，然后诱导表达，分离纯化获得蛋白质。 在克隆整个过程中上列需要满足以下条件：（1）将胰岛素基因的编码序列置于含有核糖体结合位点和起始密 码子 ATG 的细菌强启动子的下游，因为细菌的 RNA 聚合酶不能识别 真核生物的启动子；（2 ）使用胰岛素基因的 cDNA 编码

29、序列，因为大多数真核抗原 大多数有内含子，转录后被切除形成成熟 mRNA ，而细菌细胞动手术 不能切除真核基因的内含子；（3）选用合适的突变型宿主，如蛋白酶缺失的菌株，防范产生真 核的真核蛋白质产物被细菌的蛋白酶所识别和降解；（ 4 ）人的胰岛素由 A 、B 两个肽链组成，是由胰岛素原（无活性） 切除连接 A 链和 B 链的 C 肽后形成有活性的胰岛素。可以分别克隆 A 、 B 两链的编码序列，在体外加工已经形成二硫键；或者克隆胰岛素原 的编码序列，在体外切除 C 肽，加工而成。解析：空2. 试述DNA的主要理化性质。答案： DNA 的主要理化性质如下：（1）核酸的人带电荷性质 无论是 DNA

30、 还是 RNA ，核苷酸链内既有酸性的基又有碱性的 含氮杂环碱基，因此核酸是两性酸碱。 由于磷酸舒尔酸性较强，核酸通常学业成绩为酸性。 在中性或碱性溶液中其，核酸带负电荷，在外加电场作用下向 电极移动。 核酸的人带电荷性质可用于分离分子质量大小不同的核酸。带 负电荷的电荷核酸与带正电荷的金属离子成盐，在有乙醇或异丙醇存 在时核酸即可从溶液中沉淀析出。 常用氯化钠、乙酸钠、乙酸钾或乙酸铵等盐溶液来制备核酸。（2）核酸的高分子性质 核酸是阴离子质量很大的高分子化合物，因此核酸溶液具有较 大的接触面。 核酸溶液的黏性与分子的不对称性有关，分子不对称性愈大， 其黏度也就愈大，不规则原子比球形分子溶液的

31、黏度大，线性分子溶 液的粘度更大。 DNA 分子的长度与其直径半径之比可达 107 ，因此极稀的 DNA 溶液也有较大的表面张力。 RNA 溶液的黏度较 DNA 小。当核酸溶液在受热或酸碱等因素 作用下发生变性时，分子不对称性变小，溶液黏度下降。因此可用黏 度测定作为 DNA 变性的指标。（3）核酸的紫外吸收 核酸分子的碱基中含有的共轭双键具有吸收紫外线的性质。 蛋白质的最大去除波长为 280nm ，而核酸的最大紫外吸收波长 为 260nm 。 利用核酸的紫外吸收特性可借助鉴别核酸样品中的蛋白质杂质， 对核酸进行定性、定量分析。也可以利用核酸的分子紫外吸收受最大 中间结构影响极大的特性研究核酸

32、的变性。（4）核酸的变性和复性 核酸的变性是指在极端的 pH 和受热条件下核酸分子中的氢键 断裂、双螺旋结构解开的不良现象。因为变性时碱基对之间的氢键断 开，积存力也受到破坏，但不伴有共价键的断裂，所以变性后的核酸 在 260nm 的光吸收增强，称为增色效应。 变性核酸经退火恢复原状的过程称为变性 DNA 的复性。一定 条件下才核酸的变性是可逆的。热变性的 DNA 溶液慢慢冷却，可使 解开的两条互补单链重新直线型缔合而形成双螺旋结构，即退火。如 果将热变性的 DNA 溶液骤然冷却至低温，则变性的 DNA 很难复性。 伴随复性会出现核酸溶液紫外光吸收减弱的现象，称为核酸的减色效 应。解析：空试述

33、真核生物转录水平的调控机制。 武汉科技大学 2019研答案： 真核生物在转录水平的调控主要核酸是通过反式作用因子、 顺式作用元件和 RNA 聚合酶的相互作用来完成的，主要是反式作用因 子结合顺式作用元件后影响核糖体起始复合物的形成过程。（1）核糖体起始复合物的形成真核生物 RNA 聚合酶识别的是由通用转录因子与 DNA 形成的蛋 白质 DNA 复合物，只有当一个或多个转录因子结合紧密结合到 DNA 上，形成有功能的启动子，才能被 RNA 引物所识别并结合。核糖体起始复合物的形成过程为：结合FTATA区；RNA聚合酶识别并结合TF II DDNA复合物；促进或抑制核糖体 起始复合物的形成。（2）

34、反式作用因子 一般兼具三个功能域（DNA识别结合域、转录活性域和结合其 他蛋白结合域）。 能识别并结合上游调控区中的作用元件。 对基因的表达有正性或负性调控作用。（3）转录起始的调控反式积极作用因子的活性调节a .表达式调节：反式作用因子合成出来就具有活性。b 共价修饰：磷酸化和去磷酸化，糖基化。c.配体结合：许多激素受体是反式作用因子。d .蛋白质与蛋白质相互作用：蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。反式作用因子与顺式作用元件的结合反式作用因子被激活后才，需先识别并结合上游启动元件和增强 子实施中的保守性序列，对基因转录起调节作用。 反式作用因子的作用手法：成环、扭曲、滑动。 反式作用独立式因

35、子的组合式调控作用 每一种反式作用结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用，但反式作用因子对基因调控不是由单一因子敲定的而是尘埃落定 几种因子组合发挥特定的作用。解析：空3. DNA 分子标记有哪些种类？答案： DNA 分子标记有以下种类：（1）RFLP 标记： DNA 某一位点上的变异有可能引起该位点特 异性的限制性内切酶识别位点的改变，包括原有位点的消失或出现和 新的酶切位点，致使酶切片段长度随之加之发生变化。这种变化引起 的多态现象即为限制性片段长度多态性（RFLP）。对RFLP的检测主 要是用 Southern 杂交的方法进行，即利用限制善用酶酶解及凝胶电 泳分离不同生物体的 DN

36、A 分子，然后用经标记的特异 DNA 探针与之 杂交，通过发射自显影或非同位素显色技术来阐述 DNA 的多态性。（ 2） RAPD 标记：随机扩增多态性 DNA ，用随机短引物（人工 合成的六核苷酸）进行 DNA 的 PCR 扩增。所扩增的 DNA 区段是事 先未知的，具有举例来说和任意性，因此随机引物 PCR 标记技术可用 于对任何未知基因组的研究。3） ISSR 标记：简单序列重复区间扩增多态性。利用基因组中常出现的 SSR 本身设计引物，无需预先克隆和测序（4 ）SSR 标记：简单重复序列端粒酶。又称微卫星 DNA 多态性， 即由二核苷酸，三核苷酸或四核苷酸串联重复的左右拷贝数目不等而

37、出现的多态现象。（5）STS 标记：序列标定位置。染色体上所位置已定的、核苷酸 序列已知的、且在基因组中只有一份拷贝的 DNA 短片段，一般长 200500bp 。STS标记是根据单拷贝的DNA片段两端的序列，设 计一对特异引物，经 PCR 扩增基因组 DNA 而产生的一段长度为几百 bp 的特异序列。（6）AFLP 标记：扩增片段长度特异性。通过对基因组 DNA 酵 素切片段的段选择性扩增来检测 DNA 酶切片段长度的多态性。 AFLP 揭示的 DNA 多态性是酶切位点和其后的选择性的变异。（7 ）CAPS 标记：是特异引物 PCR 与限制性酶切相结合而产生 的一种DNA标记，当SCAR或S

38、TS的特异扩增产物的电泳谱带不表 现多态性时，一种补救办法就是第二种用限制性内切酶对扩增产物进 行酶切，然后通过琼脂糖或聚丙烯胺凝胶电泳检测其多态性，这种多 态性称为 CAPS 标记。它揭示的是特异 PCR 产物 DNA 序列鼻花内则 限制性酶切位点变异的信息，也表现为限制性片段长度的多态性。（8）SNP 标记：单核苷酸多态性。不同个体基因组 DNA 序列 同一位置上的单个多肽的差别。其比较的不是 DNA 的片段长度，而 是相同碱基长度里的单个碱基的差别。解析：空7、选择题（ 12 分，每题 1 分）1. 下列哪一种蛋白质或酶最不可能是癌基因的编码产物？（ ）A 蛋白质磷酸酶B 蛋白质磷酸激酶

39、C 转录因子D. GTP 酶答案：A解析：蛋白磷酸酶是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子，与蛋白激酶相对应存在，共同构成了磷酸化和磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。癌基因编码的产物大多无需 去磷酸化，因此答案选。2. 细胞分化时不发生（ ）。A. DNA去甲基化B. 组蛋白乙酰化C. 重编程（ reprogramming ）D. 基因沉默答案： C解析：3. DNA 变性是指（ ）。 浙江海洋大学 2019研A 多核苷酸链解聚B 互补碱基之间氢键断裂C 分子中磷酸二酯键断裂D. DNA分子由超螺旋-双螺旋答案：B解析：4. 根据构建方法的不同，基因文库可分为基因组文库、cDNA文库等。下列文库中，哪项属于cDNA文库？（）A. MAC文库B. BAC文库C. 扣除文库D. YAC文库答案： C解析： cN 文库是指某生物某一发育时期所转录的 mRN 全部经反转录 已经形成的 cN 片段与某种载体连接而形成的催生州列的集合。扣除文 库又称为德圣茹文库，是反映不同组织和细胞或同一细胞在不同功用 状态下，基因表达差异的 cN 文库。因此答案选。5. cAMP与CRP吉合形成复合物cAMPCR介导的正性调节发生在（ ）。A. 没有葡