吉林大学《分析化学实验》邻二氮菲光度法-生科

1、.邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁实验七实验七 分析化学实验分析化学实验. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁 1. 学会学会722型分光光度计的使用方法。型分光光度计的使用方法。 2. 掌握邻二氮菲吸光光度法测定试样中铁掌握邻二氮菲吸光光度法测定试样中铁 含量的原理和方法。含量的原理和方法。 3.学习如何选择吸光光度法的测定铁的条学习如何选择吸光光度法的测定铁的条 件。件。一、实验目的一、实验目的. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁二、实验原理二、实验原理2+2+

2、与邻二氮菲在与邻二氮菲在pH=2-9pH=2-9条件下，生成稳定的条件下，生成稳定的1 13 3桔桔红色红色的络合物，；在的络合物，；在最大吸收波长最大吸收波长处，处， = = 1.11.110104 4 L Lmolmol-1-1cmcm-1-1。2+光吸收基本定律光吸收基本定律: Lambert-Beer: Lambert-Beer定律定律A b cpH=2-9pH=2-9. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁3. 3. 铁一般以铁一般以FeFe3+3+状态存在，故状态存在，故先用盐酸羟胺先用盐酸羟胺 把把FeFe3+3+还原成还原成FeF

3、e2+2+ ，其反应式如下：，其反应式如下：二、实验原理二、实验原理2Fe3+2NH2OHHCl=2Fe2+N2+4H+2H2O+2Cl-. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁722型分光光度计型分光光度计三、试剂与仪器三、试剂与仪器铁标准溶液铁标准溶液 邻二氮菲邻二氮菲盐酸羟胺盐酸羟胺醋酸钠醋酸钠. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁四、实验步骤四、实验步骤1.1.邻二氮菲亚铁吸收曲线的绘制和测量波长的选择邻二氮菲亚铁吸收曲线的绘制和测量波长的选择 在比色管中加入铁标准溶液，盐酸羟胺摇匀。再加

4、入在比色管中加入铁标准溶液，盐酸羟胺摇匀。再加入2.00 mL邻二氮菲和邻二氮菲和5mLNaAc溶液，用水稀至刻度摇匀。放置溶液，用水稀至刻度摇匀。放置10min后用，后用，用用1cm1cm比色皿，以试剂空白作参比溶液，用分比色皿，以试剂空白作参比溶液，用分 光光度计测定光光度计测定标准曲线的最后一个溶液标准曲线的最后一个溶液，在波长，在波长 440440560nm560nm之间，每隔之间，每隔10nm10nm测一次吸光度，在最大吸收波长附近测一次吸光度，在最大吸收波长附近(500(500520nm)520nm)每隔每隔5nm5nm测定一次吸光度测定一次吸光度( (注意：每换一个波长，用空白注

5、意：每换一个波长，用空白重新调一次仪器重新调一次仪器) )。 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，确定以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，确定最大吸收峰的波长。最大吸收峰的波长。. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁 邻二氮菲一铁邻二氮菲一铁()的吸收曲线的吸收曲线 A A bcbc. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁2.显色剂用量的确定显色剂用量的确定 在在7 7个比色管中，各准确加入铁标准溶液，盐酸羟胺摇匀。个比色管中，各准确加入铁标准溶液，盐酸羟胺摇匀。再分别加入、和

6、再分别加入、和2.00 mL2.00 mL邻二氮菲和邻二氮菲和5mLNaAc5mLNaAc溶液，溶液，用水稀至刻度摇匀。放置用水稀至刻度摇匀。放置10min10min后用后用1cm1cm比色皿，以蒸馏水比色皿，以蒸馏水（为什么？）（为什么？）为参比，在为参比，在选择的波长选择的波长下测定各溶液的吸光度。下测定各溶液的吸光度。以邻二氮菲的体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘图，并在以邻二氮菲的体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘图，并在曲线拐点处用切线法找到交点，确定测定铁的显色剂最适宜曲线拐点处用切线法找到交点，确定测定铁的显色剂最适宜用量和络合比。用量和络合比。四、实验步骤四、实验步骤. 分析化学实

7、验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁3.3.显色剂时间的确定显色剂时间的确定 将将1 1中的溶液每隔中的溶液每隔10min10min测定一次吸光度。以时间测定一次吸光度。以时间t t为横坐为横坐标，吸光度为标，吸光度为A A为纵坐标，绘制为纵坐标，绘制A-tA-t关系曲线，确定铁与邻关系曲线，确定铁与邻二氮菲显色完全所需要的时间。二氮菲显色完全所需要的时间。四、实验步骤四、实验步骤. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁.

8、 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁四、实验步骤四、实验步骤2. 2. 标准曲线的绘制标准曲线的绘制 用吸量管分别吸取铁标准溶液用吸量管分别吸取铁标准溶液（100g/mL100g/mL），于），于6 6只只50mL50mL比色管中，加入比色管中，加入盐酸羟胺，摇匀，再依次分别盐酸羟胺，摇匀，再依次分别0.1%0.1%邻菲啰啉，邻菲啰啉， ，用，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用

9、蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm1cm比色皿，以试剂空比色皿，以试剂空白作参比，用分光光度计在其最大吸收的波长处，分白作参比，用分光光度计在其最大吸收的波长处，分别测定别测定A A。 以铁的量（以铁的量（gg）为横坐标，）为横坐标，A A为纵坐标，绘制标为纵坐标，绘制标准曲线。准曲线。. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁A。 。 。 。 。0工作曲线工作曲线(标准曲线标准曲线) 0 20 40 60 80 100g/50mLA A bcbc. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁四、实验步骤四、

10、实验步骤 3.3.试样中铁含量的测定试样中铁含量的测定 分别准确吸取两个水样各（分别准确吸取两个水样各（3 3份），转份），转 移至移至50mL50mL比色管中，按绘制标准曲线的操作，加比色管中，按绘制标准曲线的操作，加 入各种试剂使之显色，用蒸馏水稀释至刻度，摇入各种试剂使之显色，用蒸馏水稀释至刻度，摇 匀，测定匀，测定A A。在标准曲线上查出。在标准曲线上查出50mL50mL比色管中铁的比色管中铁的 量（量（gg）。）。. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁A。 。 。 。 。*0溶液浓度的测定溶液浓度的测定A A b bc c工作曲线法工

11、作曲线法(标准曲线法标准曲线法) 0 20 40 60 80 100g/50mL计算水样中铁的含计算水样中铁的含量量(Fe) /(g/mL)/(g/mL)和和平均偏差、相对平平均偏差、相对平均偏差。均偏差。. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁1.清点仪器清点仪器2.交钥匙交钥匙3.准备考试准备考试. 分析化学实验分析化学实验邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁. 分析化学实验分析化学实验蛋壳中钙镁含量的测定蛋壳中钙镁含量的测定 预习：蛋壳中钙镁含量的测定预习：蛋壳中钙镁含量的测定 72727474页页 假设蛋壳中假设蛋

12、壳中CaCOCaCO3 3含量含量100%100%1.1.络合滴定法测定蛋壳中络合滴定法测定蛋壳中CaCa、MgMg总量总量 2.2.酸碱滴定法测定蛋壳中酸碱滴定法测定蛋壳中CaCa、MgMg总量总量. 分析化学实验分析化学实验蛋壳中钙镁含量的测定蛋壳中钙镁含量的测定 1.1.络合滴定法测定蛋壳中络合滴定法测定蛋壳中CaCa、MgMg总量总量 配制配制 计算计算m mEDTAEDTA= = ? ? g g 写出写出EDTAEDTA配制方法配制方法 以以CaCOCaCO3 3基准物质标定基准物质标定EDTAEDTA 计算计算m mCaCO3CaCO3= = ? ? g g （按（按EDTAEDT

13、A浓度为计算）浓度为计算） 写出写出CaCOCaCO3 3标准溶液的配制方法标准溶液的配制方法 写出标定写出标定EDTAEDTA的方法的方法 蛋壳中蛋壳中CaCa、MgMg含量的测定含量的测定 计算计算m m蛋壳蛋壳= = ? ? g g （按（按EDTAEDTA浓度为计算）浓度为计算） 7373页页3. Ca3. Ca、MgMg总量的测定（以总量的测定（以CaOCaO计）计）. 分析化学实验分析化学实验蛋壳中钙镁含量的测定蛋壳中钙镁含量的测定 通过计算说明，为什么用通过计算说明，为什么用CaCO3CaCO3作基准物质标作基准物质标定定EDTAEDTA时时pH=12pH=12，而测定钙镁含量时

14、，而测定钙镁含量时pH=10pH=10？. 分析化学实验分析化学实验蛋壳中钙镁含量的测定蛋壳中钙镁含量的测定 2.2.酸碱滴定法测定蛋壳中酸碱滴定法测定蛋壳中CaCa、MgMg总量总量 配制的配制的NaOHNaOH和和HClHCl溶液各溶液各500mL500mL 写出配制方法（已知写出配制方法（已知20%20%的的NaOHNaOH和和6mol/L6mol/L的的HClHCl） 标定标定HClHCl溶液的基准物质和标定方法溶液的基准物质和标定方法 计算计算m m基准物质基准物质= = ? ? g g （按（按NaOHNaOH或或HClHCl浓度为浓度为0. 2mol/L0. 2mol/L计算）计

15、算） 写出标定写出标定HClHCl的方法的方法 蛋壳中蛋壳中CaOCaO含量的测定含量的测定 计算计算m m蛋壳蛋壳= = ? ? g g （按（按NaOHNaOH和和HClHCl浓度为浓度为0. 2mol/L0. 2mol/L计算）计算） 7474页页4. CaO4. CaO含量的测定含量的测定. 分析化学实验分析化学实验蛋壳中钙镁含量的测定蛋壳中钙镁含量的测定 酸碱滴定法中，用酸碱滴定法中，用NaOHNaOH溶液滴定溶解蛋壳后剩溶液滴定溶解蛋壳后剩余的余的ClCl时，为什么用甲基橙做指示剂？可否时，为什么用甲基橙做指示剂？可否用酚酞做指示剂？为什么？用酚酞做指示剂？为什么？ . 分析化学实

16、验分析化学实验四、实验步骤四、实验步骤4.4.蛋壳样品的制备蛋壳样品的制备 将蛋壳放在烘箱中烘干，取出冷却，放入研钵中研将蛋壳放在烘箱中烘干，取出冷却，放入研钵中研磨至全部通过筛子。保存好样品，备用。磨至全部通过筛子。保存好样品，备用。五、数据处理五、数据处理注意：三线格注意：三线格 平均偏差和相对平均偏差平均偏差和相对平均偏差 有效数字有效数字蛋壳中钙镁含量的测定蛋壳中钙镁含量的测定 . 分析化学实验分析化学实验蛋壳中钙镁含量的测定蛋壳中钙镁含量的测定 已知实验室备有：已知实验室备有：6 molL6 molL-1-1HClHCl溶液；溶液；20%NaOH20%NaOH溶溶液；液；EDTAEDTA固体；固体；CaCOCaCO3 3固体；固体；NaCONaCO3 3固体；固体；pH=10pH=10的的缓冲溶液；钙指示剂；铬黑缓冲溶液；钙指示剂；铬黑T T指示剂；甲基橙指示指示剂；甲基橙指示剂；酚酞指示剂；剂；酚酞指示剂；. 分析化学实验分析化学实验蛋