见习课血液一般检测

1、授课教师：王二华湘雅三医院内科教研室湘雅三医院内科教研室Objectivesu了解目视法血细胞计数的原理了解目视法血细胞计数的原理u掌握血涂片制作、染色和显微镜阅片方法掌握血涂片制作、染色和显微镜阅片方法u掌握外周血五种正常白细胞形态掌握外周血五种正常白细胞形态u掌握血常规正常值及其临床意义掌握血常规正常值及其临床意义u了解临床血常规检验报告单各项意义了解临床血常规检验报告单各项意义重点：重点： 血细胞计数板的应用原理血细胞计数板的应用原理 外周血五种正常白细胞形态外周血五种正常白细胞形态难点：难点： 血细胞计数板的应用原理血细胞计数板的应用原理器材及试剂器材及试剂 器材器材 采血针采血针 取

2、血吸管取血吸管 小试管小试管 刻度吸管刻度吸管 计数板计数板 盖玻片盖玻片 显微镜显微镜 玻片玻片 推玻片推玻片 蜡笔蜡笔 棉球棉球试剂试剂 红细胞稀释液红细胞稀释液 白细胞稀释液白细胞稀释液 瑞氏染液及其缓冲液瑞氏染液及其缓冲液 75% 75%酒精酒精 蒸馏水蒸馏水计数板计数板白白白白红红红红红计数池结构计数池结构 每个大方格面积为1mm2,计数池深0.1mm, 每个大方格体积0.1mm30.1mm3 即0.1ul0.1ul中央大方格分为25个中方格。计算方法计算方法 白细胞白细胞 计数四个大方格计数四个大方格 每升血中的白细胞=四个大方格内白细胞个数（A） /4 10106 稀释倍数（20

3、） =A 5 107 红细胞红细胞 计数五个中方格计数五个中方格 每升血中的红细胞=五个中方格内RBC数（B）5 10106 稀释倍数（200） =B 1010操作步骤与内容操作步骤与内容 （一）红细胞计数(Red Blood Cell Count) 原理原理：稀释血液、破坏其中白细胞； 计数一定容积的红细胞数(五个中方格） 再推算出1L血液中的红细胞数。 （10ul血加入1.99ml红细胞稀释液，稀释200倍） 计数方法计数方法：计数板计数 步骤步骤：取血稀释充池计数计算 计算计算：每升血液中红细胞数目 =五个中方格内红细胞个数1010 记录方式：记录方式： . . 101012 12 /L

4、/L操作步骤与内容操作步骤与内容( (附）白细胞计数附）白细胞计数(White Blood Cell Count)(White Blood Cell Count)原理、计数方法、步骤基本和红细胞计数相同 不同点：1、用白细胞稀释液、破坏红细胞 2、20ul血+稀释液0.38ml，稀释20倍 3、大方格计数、四个 4、计算公式 5、 记录方式：. . 10109 9/L/L采血采血+ +稀释稀释 耳垂、手指腹（无感染、水肿、淤血等） 75%酒精消毒 捏住手指，刺血针采血，深2毫米 擦去第一滴血 轻挤，使血液形成绿豆大小的血滴 右手、平拿，取血吸管尖端浸入血滴中，吸至“10”刻度处(RBC计数)，

5、或“20”(WBC计数) 擦净管外粘附的血、沾吸多余血液。 所采血液立即挤入放有稀释液的试管中 并来回吸取小量稀释液数次 摇动试管，充分混匀。充池充池 盖玻片盖于计数池（干燥、干净）上。 吸取混匀、稀释血液，盖玻片下方边缘滴入 静置2-3分钟，待细胞下沉后、计数 注意：1 1、充池一次完成，不能有气泡；、充池一次完成，不能有气泡； 2 2、每个中方格内红细胞数相差大于、每个中方格内红细胞数相差大于2020个、或每个大方个、或每个大方格白细胞数相差大于格白细胞数相差大于1010个，说明充池不均匀，需重新充池。个，说明充池不均匀，需重新充池。计数计数计数时注意计数时注意： 1 1、必须按一定的方向

6、和顺序、必须按一定的方向和顺序 ，避免重复和遗漏，避免重复和遗漏 2 2、对于压线、对于压线 的细胞，如记上、左侧，则不再记右、下侧的细胞，如记上、左侧，则不再记右、下侧操作步骤与内容操作步骤与内容（二）白细胞分类计数（二）白细胞分类计数(White Blood Cell (White Blood Cell Differential Count)Differential Count) 步骤：采血涂片染色阅片 计算：五种白细胞分类比。 报告方式： 中性粒细胞 杆状核细胞 0.xx 分叶核细胞 0.xx1、推玻片放血滴、推玻片放血滴前方前方，后移，后移，接触血滴，使血滴均匀展开；接触血滴，使血滴均

7、匀展开；2 2、推片与玻片呈、推片与玻片呈3030至至4545角；角；3 3、均速将推片由玻片一端推至、均速将推片由玻片一端推至另一端，形成舌形；另一端，形成舌形；4 4、自然干燥。、自然干燥。涂片（涂片（Film Preparation）染染 色色 （StainingStaining）操作：操作： 1.蜡笔划线。 2.平放，滴35滴染液于玻片上均匀分布整个血膜，加入等量缓冲液，轻晃混匀，放置十分钟左右待染色完全。 3.小流水冲去染液，干燥。原理：原理：瑞氏染液中的伊红与美蓝分别结合细胞中嗜酸与嗜碱性成份，使细胞不同的结构呈现不同颜色。 甲醇：溶剂、固定细胞，低倍镜观全片，选细胞分布均匀，染

8、色较好的体尾交界处油镜下分类计数100个白细胞阅片阅片 5 5种白细胞形态特征和比值种白细胞形态特征和比值 细胞名称（简称）直径（um）细胞核细胞浆比值（百分数，%）中性粒细胞中性粒细胞neutrophile granulocyte（N） 嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞acidophilic granulocyte（E） 嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞basophilla granulocyte（B） 淋巴细胞淋巴细胞lymphocyte（L） 单核细胞单核细胞monocyte（M）10-15 11-16 10-12 6-15 10-20深紫红色，分2-5叶，或呈杆状。 深紫红色，二叶核，呈眼镜样。 核结

9、构不清，分叶不明显。 深紫红色，园或椭园，染色质致密成团块样。 淡紫红色，肾形、马蹄形或不规则形，有扭曲折叠感，染色质呈粗网状。淡红色浆，均匀布满浅紫红色细小颗粒。淡红色浆，布满粗大、园而均匀一致红的桔红色颗粒。 淡红色浆中有大小不等、分布不均的蓝黑色颗粒，并常复盖核上.浆少，透明淡兰色，一般无颗粒，大淋巴细胞浆较多，可含有少量紫红色颗粒。浆多，淡灰兰色，有细小紫红色颗粒，似灰尘样弥散分布于浆中。0.50-0.70(50-70) 0.005-0.05(0.5-5) 0-0.01(0-1) 0.20-0.40(20-40) 0.03-0.08(3-8) 外周血白细胞 Peripheral Blo

10、od Leucocyte中性粒细胞中性粒细胞neutrophilneutrophil 胞核胞核深紫红色，分深紫红色，分2-52-5叶，叶，或呈杆状。淡红色浆，均或呈杆状。淡红色浆，均匀布满浅紫红色细小颗粒匀布满浅紫红色细小颗粒 外周血白细胞 Peripheral Blood Leucocyte嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞Eosinophil胞核为深紫红色，二叶核，呈胞核为深紫红色，二叶核，呈眼镜样。淡红色浆，布满粗大、眼镜样。淡红色浆，布满粗大、圆而均匀一致红的桔红色颗圆而均匀一致红的桔红色颗粒粒 嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞Basophil 核结构不清，分叶不明显。淡核结构不清，分叶不明显。淡红色胞

11、浆中有大小不等、分布红色胞浆中有大小不等、分布不均的蓝黑色颗粒，并常覆盖不均的蓝黑色颗粒，并常覆盖核上。核上。 外周血白细胞 Peripheral Blood Leucocyte淋巴细胞淋巴细胞 lymphocyte核呈深紫红色，圆或椭核呈深紫红色，圆或椭圆，染色质致密成团块圆，染色质致密成团块样。胞浆少，透明淡兰样。胞浆少，透明淡兰色，一般无颗粒，大淋色，一般无颗粒，大淋巴细胞浆较多，可含有巴细胞浆较多，可含有少量紫红色颗粒少量紫红色颗粒 外周血白细胞 Peripheral Blood Leucocyte单核细胞单核细胞 monocyte 胞核为淡紫红色，肾形、胞核为淡紫红色，肾形、马蹄形或

12、不规则形，有扭马蹄形或不规则形，有扭曲折叠感，染色质呈粗网曲折叠感，染色质呈粗网状。浆多，淡灰兰色，有状。浆多，淡灰兰色，有细小紫红色颗粒，似灰尘细小紫红色颗粒，似灰尘样弥散分布于浆中样弥散分布于浆中 外周血白细胞 Peripheral Blood Leucocyteneutrophile granulocyteacidophilic granulocytebasophilla granulocytelymphocytelymphocytelymphocytemonocytemonocyte血细胞分析仪血细胞分析仪血细胞分析仪血细胞分析仪 分类原理分类原理 1 1、电阻抗、高频电导及激光散射联

13、合检测法电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法 2 2、光散射和细胞化学染色联合检测法、光散射和细胞化学染色联合检测法 3 3、电阻抗和射频电导联合检测法、电阻抗和射频电导联合检测法 4 4、多角度激光偏振光散射检测法、多角度激光偏振光散射检测法 健康人群红、白细胞计数参考值健康人群红、白细胞计数参考值 人群人群红细胞数红细胞数白细胞数白细胞数 成人男性（4.0-5.5）1012/L410109/L成人女性（3.5-5.0）1012/L 新生儿（6.0-7.0）1012/L1520109/L项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞6.6*109/L3.59.5中性粒细胞百分比70%40

14、-75淋巴细胞百分比25%20-40单核细胞百分比3%3-10嗜酸性粒百分比1.8%0.4-8嗜碱性粒百分比0.2%0-1红细胞1.35*1012/L4.3-5.8血红蛋白58g/L130-175平均红细胞体积120fL82-100红细胞压积18.3%40-50平均血红蛋白含量35.9pg27-34平均血红蛋白浓度347g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板123*109/L100-300case 1神经内科患者项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞4.45*109/L3.59.5中性粒细胞百分比89.7%40-75淋巴细胞百分比9.7%20-40单核细胞百分比

15、0.4%3-10嗜酸性粒百分比0%0.4-8嗜碱性粒百分比0%0-1红细胞2.61*1012/L4.3-5.8血红蛋白72g/L130-175平均红细胞体积84.7fL82-100红细胞压积22.1%40-50平均血红蛋白含量27.6pg27-34平均血红蛋白浓度326g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板20*109/L100-300case 2妇科患者项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞4.44*109/L3.59.5中性粒细胞百分比53.3%40-75淋巴细胞百分比39.3%20-40单核细胞百分比7.2%3-10嗜酸性粒百分比0.1%0.4-8嗜碱性粒

16、百分比0.1%0-1红细胞2.06*1012/L4.3-5.8血红蛋白35g/L130-175平均红细胞体积65.8fL82-100红细胞压积13.5%40-50平均血红蛋白含量17.1pg27-34平均血红蛋白浓度260g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板89*109/L100-300case 3项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞6.8*109/L3.59.5中性粒细胞百分比59.6%40-75淋巴细胞百分比18.1%20-40单核细胞百分比16.9%3-10嗜酸性粒百分比0.2%0.4-8嗜碱性粒百分比5.2%0-1红细胞1.49*1012/L4.3-

17、5.8血红蛋白42g/L130-175平均红细胞体积85.6fL82-100红细胞压积14.7%40-50平均血红蛋白含量27pg27-34平均血红蛋白浓度314g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板83*109/L100-300case 4消化科患者项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞134.67*109/L3.59.5中性粒细胞百分比5%40-75淋巴细胞百分比75%20-40单核细胞百分比异常细胞20%3-10嗜酸性粒百分比0%0.4-8嗜碱性粒百分比0%0-1红细胞1.88*1012/L4.3-5.8血红蛋白65g/L130-175平均红细胞体积106

18、.4fL82-100红细胞压积20%40-50平均血红蛋白含量34.6pg27-34平均血红蛋白浓度325g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板21*109/L100-300case 5项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞1.69*109/L3.59.5中性粒细胞百分比28.9%40-75淋巴细胞百分比59.8%20-40单核细胞百分比1.2%3-10嗜酸性粒百分比0%0.4-8嗜碱性粒百分比0%0-1红细胞1.9*1012/L4.3-5.8血红蛋白59g/L130-175平均红细胞体积93.2fL82-100红细胞压积17.7%40-50平均血红蛋白含量33

19、.1pg27-34平均血红蛋白浓度333g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板91*109/L100-300case 6项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞25.4*109/L3.59.5中性粒细胞百分比89.4%40-75淋巴细胞百分比7.4%20-40单核细胞百分比3%3-10嗜酸性粒百分比0%0.4-8嗜碱性粒百分比0.2%0-1红细胞4.2*1012/L4.3-5.8血红蛋白121g/L130-175平均红细胞体积91.9fL82-100红细胞压积39.7%40-50平均血红蛋白含量30.1pg27-34平均血红蛋白浓度328g/L316-354网织红

20、细胞百分比%0.5-1.5血小板268*109/L100-300case 7项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞32.14*109/L3.59.5中性粒细胞百分比92.6%40-75淋巴细胞百分比3.3%20-40单核细胞百分比2.6%3-10嗜酸性粒百分比0.7%0.4-8嗜碱性粒百分比0.2%0-1红细胞8.42*1012/L4.3-5.8血红蛋白236g/L130-175平均红细胞体积85.7fL82-100红细胞压积72.2%40-50平均血红蛋白含量28pg27-34平均血红蛋白浓度327g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板317*109/L100

21、-300case 8项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞9.3*109/L3.59.5中性粒细胞百分比73%40-75淋巴细胞百分比18.8%20-40单核细胞百分比5.9%3-10嗜酸性粒百分比1.8%0.4-8嗜碱性粒百分比0.5%0-1红细胞4.25*1012/L4.3-5.8血红蛋白138g/L130-175平均红细胞体积94.3fL82-100红细胞压积40.1%40-50平均血红蛋白含量32.4pg27-34平均血红蛋白浓度342g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板1172*109/L100-300case 9项目名称项目名称结果结果单位单位参考

22、值参考值白细胞8.3*109/L3.59.5中性粒细胞百分比69%40-75淋巴细胞百分比28%20-40单核细胞百分比2%3-10嗜酸性粒百分比1%0.4-8嗜碱性粒百分比0%0-1红细胞4.8*1012/L4.3-5.8血红蛋白147g/L130-175平均红细胞体积90.3fL82-100红细胞压积43.6%40-50平均血红蛋白含量29pg27-34平均血红蛋白浓度325g/L316-354网织红细胞百分比%0.5-1.5血小板14*109/L100-300case 10项目名称项目名称结果结果单位单位参考值参考值白细胞0.11*109/L3.59.5中性粒细胞百分比18.3%40-7

23、5淋巴细胞百分比81.7%20-40单核细胞百分比0%3-10嗜酸性粒百分比0%0.4-8嗜碱性粒百分比0%0-1红细胞2.21*1012/L4.3-5.8血红蛋白56g/L130-175平均红细胞体积81.4fL82-100红细胞压积18%40-50平均血红蛋白含量25.3pg27-34平均血红蛋白浓度311g/L316-354网织红细胞百分比0.07%0.5-1.5血小板5*109/L100-300case 11讨论讨论1.血细胞计数出现异常的原因有哪些？血细胞计数出现异常的原因有哪些？2.2.指端釆血及血涂片制作的要点是什么？指端釆血及血涂片制作的要点是什么？3.3.血细胞检查的血细胞检

24、查的临床意义临床意义是什么？是什么？病理、生理原因、误差病例分析 患者女，42岁， 主诉主诉：头晕、乏力、心悸3月余，加重10天。 现病史现病史：3个月前起，无明显诱因出现头昏，乏力，伴耳鸣，渐感活动后心悸气促。无上腹不适，无嗳气返酸，无黑便。月经量较平时增多，家人告知其面色渐苍白。自服“驴胶补血冲剂”约1个月，无明显好转。近10天头晕、乏力、心悸进一步加重，遂往就诊。自起病来，精神、食欲欠佳，二便可，入睡困难，多梦。体重无明显减轻。 既往史既往史：有痔疮十余年，间有大便后纸上带血。 月经史月经史：月经初潮14岁，以往行经天数35天，经间期28天，近半年来行经天数约15天、半年来月经量较前增多2倍，末次月经2009年2月1日。无痛经。白带正常。 体查体查：T 36.5 P 90次/分 R 20次/分 BP126/74mmHg。贫血貌，浅表淋巴结未扪及肿大。抬举性心尖搏动，心率90次/分，律齐，S1增强，心尖区可闻及/收缩期吹风样杂音，