课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数ppt课件

1、尿素尿素CO(NH2)2CO(NH2)2重要的农业氮肥。重要的农业氮肥。只需被土壤中细菌分解为只需被土壤中细菌分解为NH3NH3才干被植物吸才干被植物吸收利用收利用脲酶脲酶课题背景课题背景CO(NH2)2 + H2O CO2 +2NH3一一 筛筛 选选 菌菌 株株 KH2PO4 1.4g KH2PO4 1.4g NaHPO4 2.1g NaHPO4 2.1g MgSO4 H2O 0.2g MgSO4 H2O 0.2g 葡萄糖葡萄糖 10.0g10.0g 尿素尿素 1.0g1.0g 琼脂琼脂 15.0g15.0g 将上述物质溶解后，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到用蒸馏水定容到1000mL100

2、0mL。 该培育基的配方中，为该培育基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？源的分别是什么物质？ 此配方能否挑选出产生此配方能否挑选出产生脲酶的细菌？为什么？脲酶的细菌？为什么？碳源：葡萄糖、尿素碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素氮源：尿素能。只需产生脲酶的能。只需产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮细菌能利用尿素作为氮源而生存。源而生存。能分解尿素的细菌的挑选能分解尿素的细菌的挑选 根据培育基配方，回答以下问题：根据培育基配方，回答以下问题：方法方法 运用稀释涂布平板法来统计样品中的运用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数。活菌数。二二 统计菌落数目统计菌落数目原

3、理原理 1个菌落个菌落1个活菌个活菌为了保证结果准确，普通选择菌落数在为了保证结果准确，普通选择菌落数在3030030300的平板上进展计数。的平板上进展计数。为使结果接近真实值，需培育计算出三个或三个为使结果接近真实值，需培育计算出三个或三个以上的平板菌落平均数。以上的平板菌落平均数。统计的菌落往往比活菌的实践数目低。统计的菌落往往比活菌的实践数目低。本卷须知本卷须知 阅读教材阅读教材2222页页“二统计菌落数目一段，并二统计菌落数目一段，并讨论教材中提出的问题。讨论教材中提出的问题。 甲：没有反复实验至少涂布甲：没有反复实验至少涂布3 3个平板个平板 乙：乙：A A组结果误差过大，不运用于

4、计算平均值组结果误差过大，不运用于计算平均值计算公式：计算公式：某同窗在稀释倍数为106 的培育基中测得平板上菌落数的平均数为234，那么每克样品中的菌落数是涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml ( )A. 2.34108B. 2.34109C. 234D. 23.4 B每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数 =CVM三三 设设 置置 对对 照照 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试要设置对照的主要目的是排除实验组中非测试要素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。阅读阅读P22P222323页页“三设置对照一段讨论教材中提出的三设置对照一段讨论教材

5、中提出的问题。问题。菌落菌落计数计数制培育制培育基基样品稀释样品稀释涂布平板涂布平板土壤取样土壤取样 预备牛肉膏蛋白胨培育基和选择培育基。预备牛肉膏蛋白胨培育基和选择培育基。 一样的菌液，在牛肉膏蛋白胨培育基上生长的菌落一样的菌液，在牛肉膏蛋白胨培育基上生长的菌落数目应明显多于选择培育基上的数目，因此，牛肉膏蛋数目应明显多于选择培育基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培育基可以作为对照，用来判别选择培育基能否起白胨培育基可以作为对照，用来判别选择培育基能否起到了选择作用。到了选择作用。1 1制培育基制培育基2 2土壤取样土壤取样 从肥沃、潮湿的土壤中取样。先铲去铲曾从肥沃、潮湿的土壤中取样。先铲去铲

6、曾经过消毒处置表层土经过消毒处置表层土3cm3cm左右，再取样，将样品左右，再取样，将样品装入事先灭菌过的信封中。装入事先灭菌过的信封中。稀释倍数为稀释倍数为 101 101 106106。每个稀释度均用。每个稀释度均用3 3个选择培育个选择培育基。基。3 3样品稀释涂布样品稀释涂布 4 4微生物的培育与察看微生物的培育与察看 1. 1.培育物中能否有杂菌污染以及选择培育基培育物中能否有杂菌污染以及选择培育基能否挑选出菌落能否挑选出菌落 对照的培育皿在培育过程中没有菌落生长，对照的培育皿在培育过程中没有菌落生长，阐明培育基没有被杂菌污染。牛肉膏培育基的菌阐明培育基没有被杂菌污染。牛肉膏培育基的

7、菌落数目明显大于选择培育基的数目，阐明选择培落数目明显大于选择培育基的数目，阐明选择培育基已挑选出一些菌落。育基已挑选出一些菌落。 2. 2.样品的稀释操作能否胜利样品的稀释操作能否胜利 假设得到了假设得到了2 2个或个或2 2个以上菌落数目在个以上菌落数目在3030300300的平板，那么阐明稀释操作比较胜利，并可以进的平板，那么阐明稀释操作比较胜利，并可以进展菌落的计数。展菌落的计数。 3. 3.反复组的结果能否一致反复组的结果能否一致 假设各位同窗选取的是同一种土样，统计的假设各位同窗选取的是同一种土样，统计的结果应该接近。假设结果相差太远，那么需求从结果应该接近。假设结果相差太远，那么

8、需求从各项操作过程中去分析、寻觅能够的缘由。各项操作过程中去分析、寻觅能够的缘由。能分解尿素的细菌的鉴定能分解尿素的细菌的鉴定鉴定的原理：鉴定的原理： 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，会使培育基的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，会使培育基的pHpH升高。升高。鉴定方法：鉴定方法： 在以尿素为独一氮源的培育基中参与酚红指示剂，利在以尿素为独一氮源的培育基中参与酚红指示剂，利用此培育基进展细菌培育，察看培育基的颜色变化。用此培育基进展细菌培育，察看培育基的颜色变化。1.1.运用选择培育基的目的是运用选择培育基的目的是 A.A.培育细菌培育细菌 B.B.培育真菌培育真菌 C.C.使需求的微生物大量繁衍使

9、需求的微生物大量繁衍 D.D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别2.2.能合成脲酶的微生物所需求的碳源和氮源分别是能合成脲酶的微生物所需求的碳源和氮源分别是( )( ) A.CO2 A.CO2和和N2 B.N2 B.葡萄糖和葡萄糖和NH3NH3 C.CO2C.CO2和尿素和尿素 D.D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素C CD D3.3.以下说法不正确的选项是以下说法不正确的选项是 A.A.科学家从科学家从70708080度热泉中分别到耐高温的度热泉中分别到耐高温的TaqDNATaqDNA聚聚 合酶。合酶。B.B.统计某一稀释度的统计某一稀释度的5 5

10、个平板的菌落数依次为个平板的菌落数依次为M1M1、M2M2、 M3M3、M4M4、M5M5，以，以M3M3作为该样品菌落数的估计值。作为该样品菌落数的估计值。C.C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试要设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试要素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度 D.D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。种类最多。4.4.为培育和分别出酵母菌并淘汰杂菌，常在培育基中为培育和分别出酵母菌并淘汰杂菌，常在培育基中参与参与 A.A.较多的氮源物质较多的氮源物质 B.

11、B.较多的碳源物质较多的碳源物质 C.C.青霉素类药物青霉素类药物 D.D.高浓度食盐高浓度食盐B BC C 5、实验测定链霉素对、实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用种细菌的抗生素效应，用3种细种细菌在事先预备好的琼脂块平板上画菌在事先预备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线条等长的平行线3条线均与以下图中的链霉素带接触，将平板置于条线均与以下图中的链霉素带接触，将平板置于37条件下恒温培育条件下恒温培育3天，结果如下图。从实验结果分析以天，结果如下图。从实验结果分析以下表达，不正确的选项是下表达，不正确的选项是 A链霉素能阻止结核菌的生长链霉素能阻止结核菌的生长 B链霉素对结核菌比对霍乱

12、菌更有效链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D链霉素可以用于治疗伤寒病人链霉素可以用于治疗伤寒病人D D 4 4、培育基、培育皿、接种环、实验操作者、培育基、培育皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是方法依次是 ( ) ( ) 化学消毒化学消毒 灼烧灭菌灼烧灭菌 干热灭菌干热灭菌 紫外线消毒紫外线消毒 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 巴氏巴氏消毒法消毒法A.A. B. B.C.C.D.D.解析：培育基用高压蒸汽灭菌；培育皿解析：培育基用高压蒸汽灭菌；培育皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌到达迅速彻底的灭菌效果；实验操烧灭菌到达迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进展消毒，如用作者的双手可用化学药剂进展消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏