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文档简介

1、课后加强训练(时间:20分钟 满分:100分).提北绮 提考能,操技法 了。分心得1 .有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油 污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种到以 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于 培养基。纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 和0为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈越大说明该菌株 的降解能力越。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实马操作应在酒精灯 附近进行,以避免周围环境中微生物的污

2、染。解析(1)本实验的目的是筛选出可以分解原油的高效菌株,从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株,使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基。(2)菌种纯化培养时,常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养 基上长出单菌落后,可通过比较菌落周围分解圈的大小,来判断菌株降解原油能力 的大小。一般来说,分解圈越大说明该菌株的降解能力越强,反之则越弱。(4)灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。答案原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰2 .(2016湖南衡阳模拟)回答有关微生物的培养与应用问题:微生物的培养需要使用培养基,不同培养基的配

3、方不同,但一般都有 碳源、氮源;在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时,需加入 作为唯一的碳源,该培养基属于 培养基;若将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是 ,当形成菌落以后可以根 据菌落周围是否产生 来筛选纤维素分解菌。(2)若要统计土壤样品中纤维素分解菌的数目, 宜采用法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的 就能大约推测出样品中的活菌数。(3)一同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4,则每毫开样品中的活菌数是(所用稀释液的体积为0.2 mL)o 答案(1)水、无机盐 纤维素 选择 刚果红 透明圈稀释涂

4、布平板菌落数目(3)1.17X 1063 .实现生态农业,让秸秆回归农田的关键是获得能够高效分解秸秆的微生物。请回 答下列相关问题:秸秆的主要成分易被 酶分解;从功能上看,筛选能产生该酶的微生物所用的培养基属于培养基。(2)甲、乙两组同学设计了两种培养基(成分见下表):硝酸俊无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水A十十一十十十十B十十十十十一十注:“ 十 ”表示有;“”表示无;CR为刚果红。A培养基(K "能”或“不能”)用于分离要筛选的分解菌,原因是;加入刚果红(CR)的目的是: (3)甲、乙两组同学分别采用稀释涂布平板法和平板划线法接种。甲组同学将1 mL水样稀释100倍后,在3个平板

5、上分别接入0.1 mL稀释液,经适当培养后,3个平 板上的菌落数分别是39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为 个;示意图a和b中,是甲组同学接种培养后得到的结果;乙组同学划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是国il(4)甲、乙两组同学在微生物接种培养过程中,目的是©困h均留下一个未接种的平板同时培养,解析(1)秸秆的主要成分是纤维素,易被纤维素酶分解;筛选能产生纤维素酶的微 生物的培养基属于选择培养基。(2)从表中培养基的成分来看,A培养基能用于分离 和鉴别纤维素分解菌,原因是该培养基是固体培养基,且以纤维素粉为唯一碳源, 利用刚果红来鉴定纤维素的分解情况。

6、刚果红可与纤维素形成红色复合物,当纤维 素被分解后.无法形成红色复合物,培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明 圈,可据此来筛选纤维素分解菌。(3)从示意图看,图b是采用稀释涂布平板法接种 培养后得到的结果。根据题意得知每升水样中的活菌数为384.1 x 100X 103 =3.8X 107(个)。图a是采用平板划线法接种培养后得到的结果,划线时总是从上一次划线的末端开始,这样做的目的是通过划线次数的增加,使每次划线时菌体的数目 逐渐减少,以便得到单个菌落。(4)为了确定培养基的灭菌是否彻底,应设置空白对 照:随机取若干灭菌后的空平板培养一段时间,观察培养基上是否有菌落生成。答案(1)纤维素

7、选择(2)能纤维素粉是唯一碳源CR可与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈(合理即可)(3)3.8X107图b将聚集的菌体逐步稀释,以便获得单个菌落作为对照4 .(2016 山东济宁检测)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从 热泉嗜热菌样品中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示:挑出菌落 6寸寸寸口中需即良I号培养基II号培养基进行过程的目的是 ,过程所使用的接种方法是 法。从用途上来说,I号培养基属于 培养基,配制时仅以作为唯一碳源;从物理状态上来说,R号培养基属于固体培养基,配制时应加入 作 为凝固剂。

8、(3) I、R号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节 pH的先后顺序是 一般对 配制的培养基采用 法灭菌。培养一段时间后,应从I号培养基上挑出 的菌落,接种到R号培养基上。解析(1)分析题图可知,过程是梯度稀释,目的是对样品进行稀释;过程是用稀释涂布平板法进行接种。(2)本题实验的目的是筛选高效产生耐高温淀粉酶的嗜热 菌,从用途上来说,I号培养基属于选择培养基,本培养基以淀粉为唯一碳源;从物理状态上来说,R号培养基属于固体培养基,配制时应加入琼脂作为凝固剂。 (3) 培养基配制和灭菌时应先调节 pH,然后再进行灭菌,如果先灭菌再凋节 pH,在调 节pH时会污染培养基;一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭

9、菌法灭菌。(4)能分解 淀粉的嗜热菌在I号培养基上生长时可释放淀粉酶,分解培养基中的淀粉,在菌落 周围形成透明圈,透明圈越大淀粉酶的活性越强,所以要从 I号培养基上挑出透明 圈大的菌落,接种到R号培养基上0答案(1)稀释稀释涂布平板选择淀粉琼脂(3)先调节pH ,后灭菌高压蒸汽灭菌透明圈大5 .如表所示甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方,图内所示为相关分离过程,回答下列问题:KH2PO41.4 g纤维素粉5.0 gNa2HPO42.1 gNaNO31.0 gMgSO4 7H2O0.2 gNa2HPO41.2 g葡稳糖10.0 gKH 2PO40.9 g尿素1.0 gMgSO4 7H

10、2O0.5 g琼脂15.0 gKCl0.5 gWO0.5 g水解酪素0.5 g将上述物质溶解后,用蒸储水定谷至 1000 mL甲乙注:水解酪素,即水解酪蛋白,由酪蛋白水解得到:1 m L W mL id mL 丙(1)从功能上看,甲培养基属于 。从物理性质上看,甲培养基属于 C 其中提供氮源的物质是。(2)如果将乙培养基配制成固体培养基,则在该培养基上长出的菌落是否都能分解纤 维素? 。如果培养基中加入:可以筛选出具有分解纤维素能力的菌 株,同时透明圈越(W "大”或“小”),表示该菌分解纤维素的能力越强。(3)为了计数微生物的数量,图内采用 法进行接种培养计数,除此之外,还可以采用

11、 法进行计数。其中前一种计数方法所得结果要比后一种计数方法所得结果 (填“大”或“小”)。(4)一位同学利用图内的方法步骤在 4个平板培养基上分别接种0.1 mL 土壤稀释液 ,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则1 mL原土壤样液中微生物 数量约为。解析(4)4个平板中菌落的平均数量为160个,浓度为1 600个/mL,由内图可知, 土壤样液被稀释了 125倍,故原始样液中微生物的密度为 1 600(个/mL) X 125= 2.0X105(j/mL)。答案(1)选择培养基固体培养基尿素(2)否刚果红大(3)稀释涂布平板血球计数板计数小(4)2.0X105 个6 .牛奶是微

12、生物培养的良好培养基,牛奶在饮前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微 生物,为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如图所示操作。用无菌吸管从 锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再 重复2次。请回答下列有关问题:四mL无菌水+10 mL生牛奶QmL 9 mL 无菌水无菌水9 mL无菌水(1)巴氏消毒的方法是,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是图中 的。ABCD图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成 菌落。若用该方法培养设置了 3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则 可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为个,运用这种方法统计的结果往往较实际值(填“偏大”或“偏小”),原因是(4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌 的数量,则在操作步骤上应做什么改动? o(5)从生牛奶取样培养得到的菌落中, 混有各种杂菌, 从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入 ,菌落具有 特征的可以认定为大肠杆菌。答案(1)7075 C煮30分钟(80 C煮15分钟)牛奶的营养成分不被破坏(2)B(3)3.4X106偏小个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的(4)稀释次数减少(5)伊红美蓝(金

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