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文档简介
1、细胞培养室入室培训细胞培养室是相对无菌实验室,对环境要求高,为了使大家实验 能够顺利进行,因此进入该实验室做实验的人员必须经过培训,并经 考试合格后方可入室。现按细胞培养流程所用的仪器及设备进行培 训。实验准备-细胞培养及试剂存放。1.1.硫酸缸:1 1)只能浸泡玻璃器皿,在浸泡前必须用洗衣粉将玻璃器皿洗净并 烤干,严禁放入塑料,橡胶等物品;捞出后自来水冲洗 1818 遍以 上,再用 R RO O水浸泡烤干待消毒备用。2 2)注意事项:注意安全,用前检查手套是否完好,发现坏手套立 即扔掉,捞出时尽量沥干以免硫酸损失严重,如不慎撒到身上 或底板上应立即处理。2.2.消毒锅消毒锅在 504504,
2、容量大,原则上上班时间每天消毒一次(节假日不消毒),消毒时间上午 9 9: 0000,消毒前在群里相互通知,尽量能一起消,消毒前向锅内加 RORO 水至肉眼能看到水,将需要消毒 的物品放进篮子放入锅内,首先检查消毒物品有无液体,如有液体, 装液体的容器必须松盖,若是橡胶盖就需插针头然后用透气纸包 裹,消毒模式必须选带液体的模式,以免降温时液体喷洒,如果没 有液体可以直接选固体模式可以缩短消毒时间。 具体操作步骤详见 消毒锅旁操作步骤,使用时必须按操作步骤操作。3.3.干燥烤箱1 1)干燥箱是用来干燥的仪器,不是存放物品的地方,物品烤干应及时取出,烘烤温度一般是 6060 度,可以往下调,如需高
3、温烘烤 必须告知老师,并不离人监控烘烤。2 2)注意事项:开启时必须开启风机(使受热均匀,最好关机时不关风机),右边大烤箱 8080 度以下只能用孵箱模式,放置物品时不能放置太密太整齐, 要留有间隙使透气, 防止局部温度过高导 致燃烧。最后一个离开实验室一定关好烤箱电源。4.4. 超净工作台1 1)超净工作台是细胞培养的必须设备,操作前用干净湿润抹布擦 干净,将实验所需耗材放到台面紫外灯照射 30-5030-50 分钟(严禁长 时间开紫外灯照射),操作时打开风机。2 2)注意事项:每个工作台配好了必须物品(试管架、酒精灯,镊 子、皮头),不要随意拿出;做完实验将所产生的垃圾和废液拿 出,并清洁
4、台面;废液缸清洗干净并放回原处,关好电源。5.5. 二氧化碳孵箱1 1)已设置好无需调试,使用过程中注意底板水盘是否有水(保 持湿度),没水了加入 UPUP 水,随时注意二氧化碳气体是否用完, 随时报告,关好门(锁紧内门防止漏气)。2 2)保持清洁,戴消毒手套才能拿取细胞,开玻璃门前先看好自己 细胞位置,拿取迅速,避免长时间开孵箱翻找,其间尽量屏住呼 吸,更不能对着敞开的孵箱说话,防止污染。3 3)注意事项:不小心将培养基洒漏,务必将其清洁并消毒;不要随意挪动别人的细胞。6.6. 冰箱冰箱是公用存放试剂的地方,空间有限,不能用体积较大的容 器存放试剂,每位实验者需做好自己物品标记,集中放置;严
5、禁 未经允许挪用别人物品,自己物品随时清理,没用的随时取出, 特别是离开实验室前必须将自己物品处理后方可退取押金。7.7. 显微镜已调试好,使用过程中不要随意调试,不观察时将光线调到最暗, 短时间无需关电源,每天最后离开时关电源。8.8. 废物丢弃干燥废物直接放垃圾桶,培养容器先将培养液倒掉,用自来水冲洗后扔垃圾桶,严禁将培养液倒进垃圾桶,垃圾桶满后随时将口袋提出放到楼梯间垃圾桶内,并放好备用垃圾袋,固体小废物(棉球、枪头、EPEP 管等)不要倒在水槽内。9.9. 注意事项:1 1)实验室常规开放,周末节假日老师轮流值班。除上班时间外, 中午、晚上、周末和节假日,进实验室做实验必须在实验室门 口预约登记本上登记。2 2)入室做实验必须佩戴好工作牌,维护实验室清洁卫生,服从老 师安排,最后离开实验室时关好空调、灯、烤箱、水浴锅、门 窗等。3 3)如果需要用到有
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