细胞融合技术(中图版 好

1、细胞融合技术细胞融合技术 第三节第三节 一一.细胞融合技术细胞融合技术 概念：两个或两个以上的概念：两个或两个以上的同种同种或或异种异种细胞细胞 融合成为一个细胞的过程融合成为一个细胞的过程 阅读课本第阅读课本第30-3130-31页内容，回答问题：页内容，回答问题：1.1.什么叫细胞融合技术？什么叫细胞融合技术？ 2.2.常用的人工诱导细胞融合的方法有哪几种？哪一种重常用的人工诱导细胞融合的方法有哪几种？哪一种重复性强，对原生质体伤害小，方法简单，可控性强？复性强，对原生质体伤害小，方法简单，可控性强？用人工方法诱导细胞融合，并在一定条件下使融合细胞用人工方法诱导细胞融合，并在一定条件下使融

2、合细胞分化再生，形成新物种或新品种的过程。分化再生，形成新物种或新品种的过程。物理法：离心、振动、物理法：离心、振动、电刺激（伤害小，可控性强）电刺激（伤害小，可控性强）化学法：用聚乙二醇（）诱导化学法：用聚乙二醇（）诱导灭活的病毒：仙台病毒、疱疹病毒等灭活的病毒：仙台病毒、疱疹病毒等（适合动物）（适合动物）动物细胞融合（细胞杂交）动物细胞融合（细胞杂交）2个或多个动个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程物细胞结合形成一个细胞的过程细胞细胞A细胞细胞B杂种细胞杂种细胞灭活的病毒灭活的病毒物理法物理法化学法化学法仙台病毒仙台病毒疱疹病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒新城鸡瘟病毒用灭活的病毒诱导动物细胞融合

3、过程用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核细胞核病毒颗粒病毒颗粒细胞核细胞核 细胞电融合仪？读下面一段文字资料，思考以下问题：读下面一段文字资料，思考以下问题：长期以来，为了获得抗体，采用的是把某长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后种抗原反复注射到动物体内，然后从动物从动物血清中分离出所需抗体的方法血清中分离出所需抗体的方法。用这种方。用这种方法获得的抗体，不仅法获得的抗体，不仅产量低产量低，而且抗体的，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们。人们发现，在发现，在动物发生免疫反应的过程中，体动物发生免疫反应的过程中，体内的内的

4、B B细胞可以产生多达百万种以上的特异细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体性抗体，但是，但是每个每个B B细胞只分泌一种化学性细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体质单一、特异性强的抗体。要想获得大量。要想获得大量的单一抗体，必须用单个的单一抗体，必须用单个B B细胞进行无性繁细胞进行无性繁殖，即克隆殖，即克隆。 1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念2、怎样才能获得单克隆抗体？、怎样才能获得单克隆抗体？提示提示1 1：仅用细胞培养技术可行吗？：仅用细胞培养技术可行吗？提示提示2 2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？：我们所学的哪种细胞是可

5、以无限增殖的？提示提示3 3：有什么方法能使：有什么方法能使B B细胞产生抗体的能力细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？用单个用单个B B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。就叫做单克隆抗体。1 1、如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？、如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？问题讨论问题讨论提示：提示：2 2、瘤细胞和癌细胞有何区别？、瘤细胞和癌细胞有何区别？B B淋巴细胞淋巴细胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋

6、白骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合融合（只考虑两两融合）（只考虑两两融合）培养液中细胞有几培养液中细胞有几种类型？融合细胞种类型？融合细胞几种类型？几种类型？骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞- B- B淋巴细胞淋巴细胞B B淋巴细胞淋巴细胞-骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞多种多种杂交细胞杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞检验阳性细胞单克隆抗体单克隆抗体注射到小鼠体内注射到小鼠体内体外培

7、养体外培养 该细胞继承该细胞继承双亲细胞双亲细胞的遗传特性，既能的遗传特性，既能产生专产生专一抗体一抗体又能又能无限增殖无限增殖。杂交瘤细胞有何特点？杂交瘤细胞有何特点？特异性强，灵敏度高特异性强，灵敏度高腹腔注射法腹腔注射法免疫小鼠免疫小鼠培养骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合融合骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白选择培养基上培养选择培养基上培养专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性注射到小鼠体内注射到小鼠体内体外培养体外培养单克隆抗体单克隆抗体克隆杂交细胞克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细

8、胞专一抗体，检验阳性细胞多种杂交细胞多种杂交细胞杂交瘤细胞有何特点？杂交瘤细胞有何特点？本过程利用的那些技术？本过程利用的那些技术？动物细胞融合技术动物细胞融合技术动物细胞培养技术动物细胞培养技术是否注射抗原是否注射抗原（只考虑两两融合）培（只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？养液中细胞有几种类型？几种融合细胞？几种融合细胞？（二）、单克隆抗体制备过程（二）、单克隆抗体制备过程与传统制备的抗体相与传统制备的抗体相比具有什么特点？比具有什么特点？（三）单克隆抗体的应用（三）单克隆抗体的应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速（导向作用，导向作用，作为载体，作为载体，生物导弹生物导弹=

9、单克隆抗体单克隆抗体+药物，药物，治疗肿瘤）治疗肿瘤）诊断乳腺癌单克隆抗体诊断乳腺癌单克隆抗体两个过程两个过程动物细胞融合过程动物细胞融合过程动物细胞培养过程动物细胞培养过程“一二三一二三”二次筛选二次筛选筛选杂交瘤细胞、能筛选杂交瘤细胞、能产生所需抗体的杂交瘤细胞产生所需抗体的杂交瘤细胞一个新细胞一个新细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞三个优势三个优势产量大、特异性产量大、特异性强、灵敏度高强、灵敏度高(理化性质单一理化性质单一)的优势的优势动植物细胞在结构上有何区别？这与它们动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？杂交或融合过程有什么影响？问题讨论问题讨论动物细胞无细胞壁，动物

10、细胞融合过程中动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去除细胞壁和再生出细胞壁。不须去除细胞壁和再生出细胞壁。问题讨论问题讨论、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？原理是否相同？相同，都是细胞膜的流动性相同，都是细胞膜的流动性问题讨论问题讨论突破了有性杂交方法的局限，突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为可能。使远源杂交成为可能。有何同？不同？有何同？不同？动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较细胞工程细胞工程植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合实质内容实质内容改变遗传物

11、质、产生新的性状，获得细胞产品改变遗传物质、产生新的性状，获得细胞产品(使后代具有双亲使后代具有双亲的特性的特性)理论基础理论基础细胞膜的流动性细胞膜的流动性;植物细胞全能性植物细胞全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性;细胞增殖细胞增殖诱导手段诱导手段物理法：离心、振动、电激物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇化学法：聚乙二醇物理法：离心、振动、电激物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇化学法：聚乙二醇生物法：灭活的病毒生物法：灭活的病毒诱导过程诱导过程去细胞壁去细胞壁(纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶)原生质体融合原生质体融合(获得杂种原生质体获得杂种原生质体)植物细胞培养植物细胞培养(

12、获得植株获得植株)获得分离的单个动物细胞获得分离的单个动物细胞(胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理)诱导融合诱导融合动物细胞培养动物细胞培养(细胞产品细胞产品)应用应用获得白菜获得白菜甘蓝等杂种植物甘蓝等杂种植物主要用于单克隆抗体的制备主要用于单克隆抗体的制备(杂交瘤细胞杂交瘤细胞) 1.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案抗体实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中、图中B为为_过程，常用过程，常用_作为诱导剂，该细胞继作为诱导剂，该细胞继承承_的遗传特性，既能的遗传特

13、性，既能_,又能又能_。1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生该细胞能够产生_5、C过程指细胞培养，该过程包括过程指细胞培养，该过程包括_培养和培养和_培养两个阶段，其培养两个阶段，其中中_代以内的的细胞属于细胞株。代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体制备单克隆抗体B细胞细胞抗体抗体细胞融合细胞融合灭活病毒灭活病毒双亲细胞双亲细胞分泌抗体分泌抗体无限增殖无限增殖原代原代传代传代50B骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群A体外培养体外培养注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔C体外培养体外培养不能

14、，未对小鼠免疫处理不能，未对小鼠免疫处理2.人人CD20单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产。我国科学家已哺乳动物细胞的方式生产。我国科学家已 培育出世界上第一头转入了培育出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛，可以从它产抗体基因的转基因牛，可以从它产 的牛奶中直接提取的牛奶中直接提取CD20抗体。这项技术抗体。这项技术成熟后，有望使这一特效药成熟后，有望使这一特效药 的生产成本降至现在的的生产成本降至现在的1/10。请回答：。请回答： (1)单克隆抗体的制备过程需先将单克隆抗体的制备

15、过程需先将_和和 _融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的是交不同的是_。 (2)动物细胞培养需要在含动物细胞培养需要在含_混合气体的培混合气体的培养箱中进行，培养液中通常需加入养箱中进行，培养液中通常需加入_等一些天等一些天然成分。然成分。 (3)转基因技术的核心是转基因技术的核心是_。该过程。该过程用到的工具酶有用到的工具酶有 _和和_。经过免疫的经过免疫的B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞用灭活的病毒诱导用灭活的病毒诱导95%O2加加5%CO2血清、血浆血清、血浆基因表达载体的构建基因表达载体的构建限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(限制酶

16、限制酶)DNA连接酶连接酶3. 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究， 用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题：的杂交系马铃薯。据图分析回答问题：(1)过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解酶解”所用的酶应该包括所用的酶应该包括_。(2)过程可用聚乙二醇过程可用聚

17、乙二醇(PEG)，其目的是，其目的是_。纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶诱导原生质体融合诱导原生质体融合(3)请用文字和箭头表示出技术过程的实验流程：请用文字和箭头表示出技术过程的实验流程：_。由此过程可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性，这是由此过程可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性，这是_的表现。的表现。(4)在培养基上培养一段时间后，原生质体会再生出细胞壁。可在培养基上培养一段时间后，原生质体会再生出细胞壁。可以取样，通过以取样，通过_实验来鉴别细胞实验来鉴别细胞壁是否已经再生。壁是否已经再生。(5)请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处：请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处：_。融

18、合细胞融合细胞 愈伤组织愈伤组织 幼苗幼苗植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性植物细胞的质壁分离与复原植物细胞的质壁分离与复原可以克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍可以克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍4下图为细胞融合的简略过程，请据图回答：下图为细胞融合的简略过程，请据图回答：(1)若若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用是植物细胞，在细胞融合之前已用_处理，除去处理，除去_；A、B到细胞到细胞C的过程中，常用的物理方法是的过程中，常用的物理方法是_。融。融合完成的标志是合完成的标志是_.(2)若若A、B是植物细胞，则形成的是植物细胞，则形成的D细胞还要应用细胞还要应用_技术把技术把D培养培养成

19、植株。成植株。(3)若若A、B是动物细胞，一般取自是动物细胞，一般取自_,然后然后用用_使其分散开来，使其分散开来，A、B到到C的过程中，常用的不同于植物细胞的的过程中，常用的不同于植物细胞的手段是手段是_，所形成的，所形成的D称为称为_(4)若该过程是制备单克隆抗体，若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠为小鼠B淋巴细胞，那么，在获得此细胞之前，淋巴细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了小鼠已被注射了_，注射后小鼠身体产生了相应的，注射后小鼠身体产生了相应的_，生成了，生成了_。图中。图中B为为_。(5)若该过程仍是制备单克隆抗体，在若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到到C的过程中，所形

20、成的的过程中，所形成的C有有_种，用来培养的种，用来培养的D的细胞应该是的细胞应该是_。从中选择出它的方法是。从中选择出它的方法是_培养，获得培养，获得D后，常用的培养方法是后，常用的培养方法是_和和_。纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶细胞壁细胞壁电刺激、振动、离心电刺激、振动、离心 产生细胞壁产生细胞壁植物组织培养植物组织培养动物胚胎或幼龄动物的器官或组织动物胚胎或幼龄动物的器官或组织胰蛋白酶胰蛋白酶灭活的病毒诱导灭活的病毒诱导杂种细胞杂种细胞效应效应B细胞细胞 抗原抗原抗体和记忆细胞抗体和记忆细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞3杂交瘤细胞杂交瘤细胞用特定的选择培养基用特定的选择培养基培养基中培养培养

21、基中培养 小鼠腹腔内增殖小鼠腹腔内增殖(1)AB(2)CD5.（09山东）人类在预防与诊疗传染性疾病中，经常使用疫苗和山东）人类在预防与诊疗传染性疾病中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病病原体为抗体。已知某传染性疾病病原体为RNA病毒，该病毒表面病毒，该病毒表面A蛋蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：请回答：请回答：（1）过程代表的是）过程代表的是_。（2）过程构建）过程构建A基因表过载体时，必须使用基因表过载体时，必须使用_和和 _两种工具酶。两种工具酶。（3）过程采用的实验技术是）过程采用的实验技术是_，获得的，获得

22、的X是是_。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的生产的 _ 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，从所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行_比较；比较；或用图中的或用图中的_进行特异性结合检测。进行特异性结合检测。逆转录逆转录限制酶(限制性内切酶） DNA连接酶细胞融合杂交瘤细胞 A蛋白 核酸（基因）序列抗A蛋白的单克隆抗体6.(09年宁夏年宁夏)回答下列有关动物细胞培养的问题：回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）动物细胞培养过程中。当贴

23、壁细胞分裂生长到细胞表面）动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞_。此时，瓶壁上形成的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是可用的酶是_。（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成质发生改变而变成_

24、细胞，该种细胞的黏着性细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量白质（糖蛋白）的量_。（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是细胞不染色，原因是_（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。期的细胞用显微镜进行观察。（5）在细胞培养过程中，通常在）在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中在这种条件下，细胞中

25、_的活性降低，细胞的活性降低，细胞_的速率降低。的速率降低。（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。进行攻击。相互接触相互接触单层（一层）单层（一层）接触抑制接触抑制胰蛋白酶胰蛋白酶衰老甚至死亡衰老甚至死亡不死性不死性降低降低减少减少 由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色进入活细胞内，故活细胞不能着色中中冷冻（超低温、液氮）冷冻（超低温、液氮）新陈代谢新陈代谢酶酶

26、抗原抗原7.（10福建卷）红细胞生成素福建卷）红细胞生成素(EPO)是体内促进是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)，其简要，其简要生产流程如右图。请回答：生产流程如右图。请回答：(1)图中图中所指的是所指的是_技术。技术。(2)图中图中所指的物质是所指的物质是_，所指的物质是所指的物质是_。(3)培养重组培养

27、重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换更换_。(4)检测检测rhEPO的体外活性需用抗的体外活性需用抗rhEPO的单克的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的隆抗体。分泌该单克隆抗体的_细胞，可细胞，可由由rhEPO免疫过的小鼠免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。细胞融合而成。PCR PCR mRNAmRNArhEPOrhEPO培养液培养液杂交瘤杂交瘤第一节动物细胞培养第一节动物细胞培养 知识能力化知识能力化1为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一

28、定浓度为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理的细胞悬浮液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理A.胃蛋白酶胃蛋白酶 B.胰蛋白酶胰蛋白酶 C.盐酸盐酸 D.胰脂肪酶胰脂肪酶2下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 （ ）A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等清等B原代培养的细胞一般传至原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞代左右便会出现生长停滞C动物细胞培养一般能够传到动物细胞培养一般能够传到4050

29、代，但其遗传物质发生代，但其遗传物质发生了改变了改变D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞3动物细胞培养的细胞来自于动物细胞培养的细胞来自于（ ）A任何个体的细胞任何个体的细胞 B只能取自幼龄动物的组织细胞只能取自幼龄动物的组织细胞C只能只能取自动物胚胎细胞取自动物胚胎细胞 D胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞BCD4动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 （ ） A.动物细胞培养动物细胞培养 B.动物细胞融合动物细胞融合 C.单克隆杭体单克隆杭体 D.胚胎、

30、核移植胚胎、核移植5在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为限制地传代下去，这种传代细胞称之为: A原代培养原代培养 B传代培养传代培养 C细胞株细胞株 D细胞系细胞系6卫生部卫生部2005年年4月月6日发布了苏丹红危险性报告评日发布了苏丹红危险性报告评估，报道中提到苏丹红一号是一种人工色素估，报道中提到苏丹红一号是一种人工色素(工业染工业染料料)，它在人体内代谢生成相应的胺类。科研人员欲采用，它在人体内代谢生成相应的胺类。科研人员欲采用一定的技术手段探究苏丹红是否对人体有危害，你认为一定的技术手段探究苏丹红是否

31、对人体有危害，你认为采取下列哪种技术手段最合适：采取下列哪种技术手段最合适： A动物细胞融合动物细胞融合 B动物细胞培养动物细胞培养 C胚胎移植胚胎移植 D核移植核移植ADB7下列有关动物细胞培养的叙述，不正确的是下列有关动物细胞培养的叙述，不正确的是A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织组织B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液制成悬浮液D.动物细胞培养只能传动

32、物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞就会代左右，所培养的细胞就会衰老死亡衰老死亡8用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞的组织细胞 （ ）A.容易产生各种变异容易产生各种变异 B具有更强的全能性具有更强的全能性C.取材十分方便取材十分方便 D分裂增殖的能力强分裂增殖的能力强DD第二节植物组织培养第二节植物组织培养 知识能力化知识能力化1 1用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形

33、成愈伤组织，下列叙述错误的是（愈伤组织，下列叙述错误的是（ ）A.A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B.B.该愈伤组织的细胞没有全能性该愈伤组织的细胞没有全能性C.C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成D.D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构2.2.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要（要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要（ ）A A具有完整细胞核的细胞具有完整细胞核的细胞 B B离体状态离体状态C C导入外源基因导入外源基因 D D一定的营养

34、物质和激素一定的营养物质和激素3.3.甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的（程不涉及细胞的（ ）A A有丝分裂有丝分裂 B B分化分化 C C减数分裂减数分裂 D D全能性全能性BCC4.4.下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（ ）A A培养基中

35、添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B B培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C C离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D D同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同因相同5.5.将基因型为将基因型为AaBbAaBb的水稻的水稻( (具有具有2424条染色体条染色体) )的叶肉细胞通过无菌的叶肉细胞通过无菌操作接入含有全部营养成分的培养基的试管

36、中，在一定条件下形操作接入含有全部营养成分的培养基的试管中，在一定条件下形成试管幼苗，其过程如下图所示：成试管幼苗，其过程如下图所示： (1)(1)图中的图中的11叫叫_，图中的，图中的2_2_。(2)(2)在在33过程最重要的两种植物激素是过程最重要的两种植物激素是_、_。(3)(3)如果如果44是无病毒植株，则水稻的细胞应选用是无病毒植株，则水稻的细胞应选用_或或 _细胞。其培养成的植株的基因型为细胞。其培养成的植株的基因型为_。D脱分化脱分化再分化再分化生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素根尖根尖茎尖茎尖AaBbAaBb (4)(4)如果某种细胞选用的是水稻花粉细胞，则如果某种细胞选用的是水

37、稻花粉细胞，则44称为称为_。基因型可能是。基因型可能是_。植株。植株特点为特点为_，需用，需用_处理，处理，使其恢复正常体细胞染色体数才可育，其基因型为使其恢复正常体细胞染色体数才可育，其基因型为_。(5)(5)如果此过程是为了生产水稻的人工种子，则人工种如果此过程是为了生产水稻的人工种子，则人工种皮包裹的是皮包裹的是 _ _。单倍体植物单倍体植物ABAB、AbAb、aBaB、abab（矮小瘦弱）（矮小瘦弱）高度不育高度不育秋水仙素秋水仙素AABBAABB、AAbbAAbb、aaBBaaBB、aabbaabb3 3 胚状体胚状体 单：一个杂交瘤细胞 克隆：该细胞增殖分化为相同的细胞群 抗体：该细胞群产生的抗体。 特点：特异性强 灵敏度高单克隆抗体制备单克隆抗体制备应用了哪些技术手段杂交瘤技术的基本原理杂交瘤技术的基本原理主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体获得杂种植株获得杂种植株物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活的病毒灭活的病毒物理（离心、振物理（离心、振荡、电激）荡、电激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱导原生质体融合导原生质体融合细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性用途用途诱导方法诱导方法步骤步骤融合的原理融合的原理动物细胞融合动物细胞融合