安康职业技术学院课时授课计划(二)

1、安康职业技术学院课时授课计划(教案首页)专业 医学检验 科目 微检 学年 第 学期 第 周授课顺序总第 讲班 级 授课教师王纯伦 课 题单元 分枝杆菌属及检验(一)学 时2 课时目标1、叙述分枝杆菌属的一般特性.2、列出结核分枝杆菌的主要生物学特性.3、叙述结核分枝杆菌的微生物学检验. 达标过程教学环节1、示标2、教学内容： 分枝杆菌属及检验(一). 授课方式讲授教具挂图等 教研室主任签字 教务科签字 年 月 日分枝杆菌属及检验分枝杆菌属(Mycobacterium)是一类细长或稍弯的杆菌,因有分枝生长的趋势而得名。此菌属的最显著的特性为其胞壁中含有大量类脂，可达菌体干重的40%左右，故生长形

2、成粗糙的畏水性菌落，而且也难以用一般染料染色。然而若设法使之着色后，又不易以含菌有3%HCI的酒精脱色。这种能抵抗盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸杆菌。本菌属种类多，有致病性非致病性两大类。引起人类疾病的主要有：（1）结核分枝杆菌；（2）非典型分枝杆菌；（3）麻风分枝。这些感染多数为慢性感染过程，长期迁延，并有破坏性的组织病变。共同特点:1、专性需O2.营养要求高,生长缓慢.2、菌体含脂量高,占其干重的60%左右.3、具有抗酸性特点,故又称为抗酸杆菌.一结核分枝杆菌（结核杆菌）结核杆菌（Mycobecterium Tuberculosis）引起结核病。对人类致病的有人型结核杆菌和牛型结核杆菌，非典型

3、分枝杆菌也可引起类似结核样病变，但少见。世界上1/3人感染，70%在亚洲，世界防治结核病日：3月24日。（一）生物学性状1形态染色基本形态:结核杆菌细长略弯曲，端极钝园，大小约1.40.4um ，呈单个或分枝状排列，一般无荚膜、无鞭毛、无芽胞。在陈旧的病灶和培养物中，形态常不典型，可呈颗粒状，串球状，短棒状，长丝形等。染色:结核杆菌一般常用萋-尼氏(Ziehl-Neelsen)抗酸性染色法染色，结核杆菌染成红色，其他非抗酸性细菌及细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。另外也可用荧光染色. 结核杆菌抗酸染色结果2.培养特性2.1结核杆菌为专性需氧

4、菌。最适PH6.56.8 ，最适温度为37.2.2营养要求高，生长缓慢。在含有蛋黄、马钤薯、甘油和天门冬素等的固体培养基上才能生长。生长缓慢，接种后培养34周才出现肉眼可见的菌落。菌落为干燥、坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或黄色，形似菜花样 3.生化反应:不发酵糖类,其它后述.4.抵抗力,强 4.1对干燥强.结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰中存活68个月，若粘附于尘埃上，保持传染性810天。4.2在3%HCI或NaOH溶液中能耐受30分钟.4.3但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中加热626315分钟，直射日光下23小时，75%酒精内数分钟即死亡。5.变异性:形态、菌落、毒力、抗原

5、性、耐药性均可发生变异。（五）菌体成份与作用结核杆菌无内毒素，也不产生外毒素和侵袭性酶类，其致病作用主要靠菌体成份，特别是胞壁中所含的大量脂质。脂质含量与结核杆菌的毒力呈平行关系，含量愈高毒力愈强。（二）致病性结核杆菌的致病作用可能是细菌在组织细胞内顽强增殖引起炎症反应，以及诱导机体产生迟发型变态反应性损伤有关。结核杆菌可通过呼吸道、消化道和破损的皮肤粘膜进入机体，侵犯多种组织器官，引起相应器官，引起相应器官的结核病，其中以肺结核最常见。1致病物质：有11脂质（Lipide）：脂质占菌体干的2040%，占胞壁干重的60%，主要是磷脂、脂肪酸和蜡质，它们大多与蛋白质或多糖质结合成复合物存在。12

6、蛋白质（Protein）：结核杆菌菌体内都含有数种蛋白质，其中重要的蛋白质是结核菌素(tuberculin)。结核茵素与蜡质D结合，能引起较强的迟发型变态反应。其他蛋白质可引起机体产生相应的抗体，但无保护作用。13多糖（Polysuccharides）：多糖质常与脂质结合存在于胞壁中，主要有半乳糖，甘露醇、阿拉拍糖等。多糖质可使中性粒细胞增多，引起局部病灶细胞浸润。2所致疾病21原发感染22原发后感染继发感染也称原发后感染，多见于成年人。大多为内源性感染，极少由外源性感染所致。病变常发生在肺尖部位。3免疫与变态反应31 免疫性人类对结核杆菌的感染率很高，但发病率却较低，这表明人体感染结核杆菌可

7、获得一定的抗结核免疫力。抗结核免疫力的持久性，依赖于结核杆菌在机体内的存活，一旦体内结核杆菌消亡，抗结核免疫力也随之消失，这种免疫称为有菌免疫或传染性免疫（Infection immunify）。抗结核免疫主要是细胞免疫，包括致敏的T淋巴细胞和被激活的巨噬细胞。致敏的T淋巴细胞可直接杀死带有结核杆菌的靶细胞，同时对释放多种作用于世噬细胞的淋巴因子，使巨噬细胞聚集在病灶周围形成以单核细胞为主的增生性炎症。被激活的巨噬细胞极大地增强对结核杆菌的吞噬消化，抑制繁殖，阻止扩散，甚至消毁的能力，充分分挥细胞免疫的作用。32免疫与变态反应的关系结核菌素试验：一般使用PPD（BCG-PPD、PPD-C）。意

8、义：A选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种后的免疫效果。结核菌素试验阴性者应接种或补种卡介苗。B在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查,了解人群自然感染率。C作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的辅助诊断。D测定肿瘤患者的细胞免疫功能。（三）微生物学检验根据结核菌感染的类型，应采取病灶部位的适当标本。如肺结核有采取咯痰（最好取早晨第一次咯痰，挑取带血或脓痰）；肾或膀胱结核以无菌导尿或取中段尿液；肠结核采取粪便标本，结核性脑膜炎进行腰脊穿刺采取脑脊液；脓胸、肋膜炎、腹膜炎或骨髓结核等则穿刺取脓汁。1涂片染色检查1.1直接涂片。分薄涂片和厚涂片，用萋纳法染色，若镜检找到抗酸性杆菌，可能是结核杆菌，但通常应报告：“查到抗酸性杆菌”，因标本中可能混杂有非致病性抗性抗酸杆菌，单凭形态染色不能确定是结核杆菌，需进一步分离培养鉴定。如标本中结核杆菌量少，杂菌和杂质多时，直接涂片不易检出（一般需要每毫升痰液含有结核杆菌103104个以上才能检出）.1.2集菌涂片: 沉淀集菌。无菌直接采取的脑脊液、导尿或中段尿可直接用离心沉淀集菌。咯痰和粪便标本浓缩集菌因含杂功菌多，需用4%NaOH或3%HCL或6%H2SO4处理，然后，用离心沉淀法将结核杆菌浓缩聚集于管底，再取沉淀物涂片作抗酸染色检查、分离培养或动物试验。漂浮集菌:1.3荧