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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流病毒灭活苗制作过程.精品文档.病毒灭活苗制作过程随着生物工程技术和生物化学、分子生物学的发展,兽用生物制品的动物疫苗种类,类型上均有重要的进展,各种新疫苗不断研制成功。大体分为:灭活疫苗、弱毒疫苗、单价疫苗、多价疫苗、混合疫苗、同源疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗。灭活疫苗:又称死疫苗。将细菌或病毒利用物理的或化学的方法处理,使其丧失感染性或毒性,而保持免疫原性,接种动物后能产生主动免疫的一类生物制品。灭活疫苗分为组织灭活疫苗、培养物灭活疫苗。其特点是:易于保存运输,疫苗稳定,便于制备多价或多联苗。其缺点是:注射剂量大,多次注射,不产生局部免疫
2、力。弱毒疫苗:又称活疫苗。微生物的自然强毒株通过物理的、化学的和生物的方法,使其对原宿主动物丧失致病力,或引起亚临床感染,但以保持良好的免疫原性、遗传特性的毒株用以制备的疫苗,此外,也有从自然界筛选的自然毒株,同样有人工育成弱毒株的遗传特性,同样可以制备弱毒疫苗,如:鸡新城疫LaSota疫苗。灭活疫苗和弱毒疫苗的利和害,发展重与轻,学者历来都有争论,现将两者的优缺点简介见灭活疫苗与弱毒活疫苗比较灭活疫苗优 点:比较安全,不发生全身性副作用,不出现返祖现象,有利于制备多价多联的混合疫苗;制品稳定,受外界条件影响小,有利于运输保存。缺 点接种次数多,剂量多而大,免疫途径必须注射,不产生局部免疫,需
3、要高浓度抗原物质,生产成本高。弱毒活疫苗优 点:一次免疫接种即可成功,可采取自然感染途径接种(如注射、滴鼻、饮水、喷雾、划痕等),可引起整个免疫应答,产生广普性免疫及局部和全身性抗体,免疫持久,有利于消除局部野毒,产量高,生产成本低。缺 点:残毒在自然界动物群体中持续传递后毒力有增强返祖危险,疫苗中存在的污染毒有可能扩散;存在不同抗原的干扰现象,从而影响免疫效果;要求在低温条件下运输储存。单(价)疫苗:利用同一种微生物菌(毒)株或同一种微生物中的单一血清型的菌(毒)株增殖培养物制备的疫苗称为单(价)疫苗。单苗对单一血清型微生物所致的病有免疫保护效能,但单价苗仅能对多血清型微生物所致病中的对应型
4、有保护作用,而不能使免疫动物获得完全的免疫保护。多价疫苗:指同一种微生物中若干血清型菌(毒)株的增殖培养物制备的疫苗。多价疫苗能使免疫动物获得完全的保护力,且可适于不同地区使用。混合疫苗:又称多联疫苗。指利用不同种类的微生物的增殖培养物按免疫学原理、方法组合而成。接种动物后能产生相应疾病的免疫保护,具有减少接种次数,使用方便等优点,是一针防多病的生物制剂。制作过程1.匀浆取患病个体的肝、脾、肾(有时取症状明显部位)在研钵中研磨成匀浆,研磨需灭菌,尽量保证无菌操作。研磨中添加适量的已灭菌的生理盐水。2.反复冻融将匀浆放入-40冷冻,待冷冻完全后拿到室温融化,如此反复冻融3次以上。3.离心冻融后的匀浆在50ml离心管,8000r离心机中离心15min。取上清放于已灭菌的空瓶中并稀释后添加抗生素。4.灭活根据稀释后的体积添加47福尔马林灭活。37放置36h-48h。5.离心50ml离心管,8000r离心机中离心15min将加入福尔马林产生的沉淀去除,收集上清。再次将上清静置过夜,离心收集上清。如此反复23次。6.抽滤将上清液经0.22um滤膜过
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