盐酸曲马多(奇迈特)注射液细菌内毒素检查法的研究

1、盐酸曲马多（奇迈特）注射液细菌内毒素检查法的研究 石家庄欧意药业质量控制部 李红艳摘要：目的：研究盐酸曲马多注射液对细菌内毒素检查试验的干扰情况，并建立其细菌内毒素检查的方法。方法：参照中国药典2005版附录E细菌内毒素检查法进行实验。结果：供试品在1：150稀释液无干扰作用。结论：获得了可靠的实验数据和结果并建立了本品的细菌内毒素检查的方法。关键词： 盐酸曲马多注射液 细菌内毒素检查法 干扰实验盐酸曲马多注射液用于癌症疼痛，骨折或术后疼痛等各种急、慢性疼痛,成瘾性低。鲎试剂用于细菌内毒素的检测，具有操作简单、灵敏度高、重现性好，实用性强等优点，为了提高检测的准确度和灵敏度，我们参照中国药典2

2、005版附录E细菌内毒素检查法，对盐酸曲马多注射液进行了细菌内毒素检查的研究，探讨以细菌内毒素检查法取代热原检查法的可行性。1实验材料（1）：鲎试剂：批号：0706271，=0.25EU/ml，0.1ml/支，湛江安度斯生物有限公司 批号：0707250，=0.25EU/ml，0.1ml/支，湛江博康海洋生物有限公司（2细菌内毒素工作标准品： 批号：2007-4 150EU/支，中国药品生物制品检定所（3）细菌内毒素检查用水：批号：0706070，25ml/瓶，湛江安度斯生物有限公司(4)仪器：自动漩涡混合器，恒温水浴锅。（5）玻璃器材：试管，刻度吸管等均经250干烤1小时除细菌内毒素。（6）

3、供试品：盐酸曲马多注射液，批号072070121、072070321、072070421，规格 2ml:100mg，石家庄欧意药业有限公司提供。2实验方法与结果（1）本品内毒素限值的确立：由公式L=K/M，式中K=5.0EU/（kg·h）,M为每公斤体重每小时可接受的最大剂量,由于本品在临床上成人一次的最大用量为200mg，因此确定M=200mg/(60kg·h),计算得到,L=1.5EU/mg.(2) 鲎试剂灵敏度复核：按照中国药典2005年版二部附录E细菌内毒素检查法对上述两批鲎试剂进行灵敏度复核，结果见表1。表1 鲎试剂灵敏度复核结果鲎试剂批号内毒素浓度（EU/ml）

4、阴性对照灵敏度（C）0.50.250.1250.06250706271+ + + + + + + 0.25（EU/ml）0707250+ + + + + + + 0.25（EU/ml）由表1可知：复核的灵敏度C均在0.52.0之间，两批鲎试剂均可用于试验。（3）供试品干扰试验有效浓度的确立：据有关文献报道，目前市售鲎试剂常用灵敏度（）在0.50.03EU/ml。根据D=C·L/,计算得供试品的有效稀释倍数为1502400，因此首先以供试品1：150稀释液进行干扰试验。（4）供试品干扰预试验：用细菌内毒素检查用水和供试品1：150稀释液将同一支细菌内毒素工作标准品分别制成2.0、1.0

5、、0.5、0.252。表2 盐酸曲马多注射液（1：150）稀释液细菌内毒素干扰预试验结果鲎试剂供试品批号内毒素浓度（EU/ml）阴性对照结果0.50.250.1250.06250706271检查用水072070121+ + + + + ES=0.25（EU/ml）Et=0.25（EU/ml）0707250检查用水072070121+ + + + + ES=0.25（EU/ml）Et=0.25（EU/ml）由表2可知，ES在0.52.0，Et在0.5ES2.0ES范围内，说明供试品072070121批供试品在1：150稀释液浓度下对试验无干扰作用。（5）供试品干扰试验：用细菌内毒素检查用水和1：

6、150稀释液将同一支细菌内毒素工作标准品分别制成2.0，1.0，0.5，0.25表3 盐酸曲马多注射液（1：150）稀释液细菌内毒素干扰试验结果鲎试剂供试品批号内毒素浓度（EU/ml）阴性对照结果0.50.250.1250.06250706271检查用水072070121072070321072070421 ES=0.25（EU/ml）Et=0.25（EU/ml）Et=0.25（EU/ml）Et=0.25（EU/ml）0707250检查用水072070121072070321072070421 ES=0.25（EU/ml）Et=0.25（EU/ml）Et=0.25（EU/ml）Et=0.25（

7、EU/ml）由表3可知，ES在0.52.0，Et均在0.5ES2.0ES范围内，说明供试品072070121、072070321、072070421批供试品在1：150稀释液浓度下对试验均没有干扰作用。（6）供试品检查试验：取3批供试品，按照中国药典2005版附录E细菌内毒素检查法分别用两个厂家的鲎试剂考察其内毒素限值，结果见表4 表4 盐酸曲马多注射液细菌内毒素检查试验结果鲎试剂供试品批号供试品供试品阳性对照阳性阴性0706271072070121072070321072070421 0707250072070121072070321072070421 3结论（1）本试验用两个厂家的鲎试剂对盐酸曲马多注射液三个批号进行了干扰试验，结果表