dna测序仪（课堂PPT）

1、.1.2 元素周期表的发现奠定了二十世纪物理、化学研究和发展的基础元素周期表“基因组序列图”将奠定二十一世纪生命科学研究和生物产业发展的基础！ “基因组”-生命科学的“元素周期表”人体解剖图奠定了现代医学发展的基础.3生命的奥秘蕴藏于 “四字天书”之中GCTTCTTCCTCATTTTCTCTTGCCGCCACCATGCCGCCACCA TCATTTTCTCTTGCCGCCACCATGCTTCTTCCTCATTTTCTCT CCACCATGCCGCCACCACGCCACCATGCTTCTTCCTCATCTC GCTTTCTTGCCGCCACCATGCCGCCACCGCTTCTTCCtTCTCT.

2、4.5.6.7.8Maxam-Gilber化学降解法 .9.10.11.12.13.14.15.16dNTP结构示意图结构示意图.17ddNTP结构示意图结构示意图.18反应所需物质：反应所需物质：DNA模板、引物、模板、引物、DNA聚合聚合 酶、酶、dNTP、缓冲液、缓冲液每个循环包括：每个循环包括：变性（变性（90）、退火（）、退火（54 ）、延伸（）、延伸（72 ）.19.20.21ATemplatePrimerdNTPsPolymeraseTerminatorGCT双脱氧链末端终止法测序反应原理（1）.22TCGACGTCGACGTCGACGTTAAA C T G G C C T A

3、A T C G A G T C A G TT G A C C G G A TTT双脱氧链末端终止法测序反应原理（2）.23T双脱氧链末端终止法测序反应原理（3）.24ACG双脱氧链末端终止法测序反应原理（4）.25.26双脱氧链末端终止法测序反应原理（5）.27.28单色单色荧光标记法荧光标记法多色多色荧光标记法荧光标记法 荧光标记荧光标记引物法引物法荧光标记荧光标记终止底物法终止底物法 荧光标记荧光标记引物法引物法荧光标记荧光标记终止底物法终止底物法 .295.30图图18-8 荧光标记引物法原理荧光标记引物法原理.31.32AGCTGGTTAAC新生链的荧光标记原理.33荧光标记引物法和荧

4、光标记终止底物法的异同点：.34.35单色荧光标记法与多色荧光标记法的异同点：.36.37.38.39n克隆亚克隆的方法(clone-by-clone)n全基因组散弹法(鸟枪法)(whole-genome shotgun method).40 .41.42人类基因组计划研究的主人类基因组计划研究的主要成果和进展表现在这要成果和进展表现在这“四张图四张图”遗传图谱遗传图谱 又称为连锁图谱（又称为连锁图谱（linkage maplinkage map），），指基因或指基因或DNADNA标志在染色体上的相对标志在染色体上的相对位置与遗传距离位置与遗传距离物理图谱物理图谱 以定位的以定位的DNADNA

5、标记序列如标记序列如STSSTS作为路作为路标，以标，以DNADNA实际长度即实际长度即bp、kb、Mb为图距的基因组图谱。为图距的基因组图谱。转录图谱转录图谱 利用利用EST（expressed sequence tags 表达序列标签）作为标记所构建的表达序列标签）作为标记所构建的分子遗传图谱分子遗传图谱序列图谱序列图谱 通过基因组测序得到的，以通过基因组测序得到的，以A A、T T、G G、C C为标记单位的基因组为标记单位的基因组DNADNA序列序列.43.44.45.46平板型电泳毛细管电泳 .47310型全自动遗传分析仪型全自动遗传分析仪ABI Prism 3100遗传分析仪遗传分

6、析仪 3700型全自动遗传分析仪型全自动遗传分析仪安玛西亚DNA序列分析系统型号：MegaBACE 500/1000/4000 .48.49PE310 基因分析仪的结构基因分析仪的结构.50检测区 PE310 基因分析仪的主机分区基因分析仪的主机分区.51热板热板毛细管毛细管雷射检测器雷射检测器注射器驱动杆注射器驱动杆毛细管和电极毛细管和电极注射器注射器正极缓冲液正极缓冲液泵块泵块自动进样器自动进样器负极缓冲液负极缓冲液PE310 基因分析仪的基本结构基因分析仪的基本结构.52.53.54.55.56.57 C G T A C G C A T G A激光检测器检测特征性的荧光光谱激光检测器检测

7、特征性的荧光光谱.58.59.60.61电泳时仪器显示无电流 电极弯曲 电泳时产生电弧 其它 电泳时仪器显示无电流 传热板粘住胶板 其它 .62.63.64.65.66.67.68v 芯片实验室（芯片实验室（lab-on-a-chip）v 缩微生物处理器（缩微生物处理器（microfabricated bioprocessor），），成功完成纳升级标本的成功完成纳升级标本的Sanger DNA测序测序 .69缩微生物处理器结构示意图 2006年，美国科学院院报（PANS）上公布了Blazej等建立的缩微生物处理器测序技术。缩微生物处理器基本结构为3层玻璃薄片和一层聚二甲基硅氧烷薄片，各层间紧密粘合形成圆盘状，直径仅10厘米。聚二甲基硅氧烷是一种新型材料，具有能调控水合作用、通透性好等特点，保证了缩微生物处理器能够准确进行反应。该材料最近在蛋白结晶结构分析中也发挥了重要作用。.70.71.72多肽链多肽链N末端末端NH2 PITC弱碱弱碱苯异硫甲氨酰肽苯异硫甲氨酰肽 TFA 噻唑啉酮苯胺（噻唑啉酮苯胺（ATZ）衍生物）衍生物 剩余多肽剩余多肽 弱弱碱碱苯异硫甲氨酰肽苯异硫甲氨酰肽 TFA 噻唑啉酮苯胺（噻唑啉酮苯