NT-proBNP生物学基础和化验室指标的应用ppt课件

1、1NT-proBNP生物学根底生物学根底和化验室目的的运用和化验室目的的运用潘柏申教授潘柏申教授2内容概要内容概要 NT-proBNPNT-proBNP生物学根底生物学根底 利钠肽家族利钠肽家族 脑钠肽脑钠肽BNPBNP的生理功能的生理功能 脑钠肽脑钠肽BNPBNP的分泌和释放的分泌和释放 BNPBNP和和NT-proBNPNT-proBNP的去除的去除 NT-proBNPNT-proBNP化验室目的的运用化验室目的的运用 影响影响NT-proBNPNT-proBNP的检验前要素的检验前要素 影响影响NT-proBNPNT-proBNP的检验要素的检验要素 影响影响NT-proBNPNT-pr

2、oBNP的分析要素的分析要素3利钠肽家族利钠肽家族6种心血管型肽种心血管型肽 ANP心房利钠肽，28肽 ANP存在于成人的心房，胚胎和新生儿的心室组织和肥大的心室。在慢性心力衰竭等情况下，心房压添加时，心房对其延展作出反响而分泌ANP。BNP B型利钠肽，32肽 主要存在于心脏中；心房、更主要的心室肌细胞是BNP的主要来源。最近发现心脏成纤维细胞等也可以产生BNP。CNP C型利钠肽，22或53肽 CNP主要在中枢神经系统和血管组织合成。不同于ANP和BNP，心脏组织中几乎没有CNP。 UrodilatinU型利钠肽，32肽 由肾脏以旁分泌的方式分泌，具有利钠利尿作用。DNPVNP4利钠肽家族

3、利钠肽家族3种种NP受体受体 NP受体A：作为鸟苷酰环化酶配对受体起生物学效应 NP受体B ：作为鸟苷酰环化酶配对受体起生物学效应 NP受体C ：作为短的细胞质主受体起去除肽分子和能够的调理细胞增生作用 5利钠肽家族在种群中的分布非常保守利钠肽家族在种群中的分布非常保守 硬骨鱼，两栖动物，爬行动物，鸟类 ：内分泌和旁分泌都能在心和脑中被发现 哺乳动物人类，猫，牛，狗，家鼠，大鼠，羊和猪 ：内分泌和旁分泌都能在心和脑中被发现 软骨鱼软骨鱼纲 ：只发现了CNP 一些硬骨鱼 ： ANP，CNP，VNP 鲨鱼和盲鳗：CNP 6NPsNPs功能的进化功能的进化调理浸透压 容量调理 排钠激素 水钠排泄的减

4、容激素 鱼类哺乳动物7人类人类BNPBNP的基因表达的基因表达 BNP基因位于人类1号染色体，与ANP基因居于BNP上游约约8千个碱基呈前后串联关系 5端上游非翻译区序列有3个外显子和2个内含子。 BNP基因的外显子1编码了5端非翻译区和部分pre-proBNP26个-氨基酸信号肽和最初的18个BNP前体氨基酸。 外显子2编码了氨基酸45-129 外显子3编码了5末端氨基酸130-134氨基酸和3侧端富含ATTTA非稳定基序的非翻译区 8利钠肽的加工和分泌利钠肽的加工和分泌5A figure 5A figure 1 1J Am Coll Cardiol 2019;49:119312029B B

5、型利钠肽型利钠肽BNPBNP基因的重要调理因子基因的重要调理因子5A 5A table1table1 刺激物刺激物潜在效应器潜在效应器cis元素元素肾上腺素能激动剂肾上腺素能激动剂cAMP, Src, Rac, GSK3, CaMK, PI3KGATA (-85), MCAT (-97 和和 -124)白介素白介素-1Ras, Rac, p38 MAPK, PKCMCAT (-97)内皮素内皮素-1Rac, SrcGATA; -1818至至-408之间区之间区域域; TRE 在在 -1000应激应激MKK6 and p38 MAPK激动激动剂剂类类AP-1位点在位点在 -111缺血损伤缺血损伤

6、未知未知-408至至+100之间区域之间区域苯肾上腺素苯肾上腺素神经钙蛋白神经钙蛋白NF-AT 在在 -927甲状腺素（甲状腺素（T3）甲状腺受体甲状腺受体TRE 在在 -1000机械拉伸机械拉伸p38 MAPKSSREs (-652至至-633和和-162)AP-1活化蛋白-1；cAMP环磷腺苷；CaMK钙/钙调理蛋白依赖蛋白激酶-；GSK3糖原合成酶激酶-3；MAPK丝裂原激活蛋白激酶；MCAT肌-CAT结合点；MKK6丝裂原激活蛋白激酶激酶6；NF-AT活化T细胞的核因子；PI3K磷脂酰肌醇3-激酶；PKC蛋白激酶C；SSREs剪切压力反响元素；TRETPA-反响元素 Hypertens

7、ion 2019;27:715722.Peptides 2019;26:944 956.10 血浆浸透压血浆浸透压 添加血容量添加血容量ANP / BNPANP / BNP肾素肾素血管紧张素血管紧张素 II II醛固酮醛固酮钠的流失钠的流失水的排泄水的排泄钠的排泄钠的排泄肾小球肾小球滤过率滤过率 外周血管阻力外周血管阻力+ + + +- - - - - -+ + + +- -后叶加压素后叶加压素( (抗利尿激素抗利尿激素) ) 心肌扩张心肌扩张利钠肽的生物功能利钠肽的生物功能111利钠肽的生物作用利钠肽的生物作用2 对心血管的作用对心血管的作用 促进血管内液体转移至血管外，静脉扩张；促进血管内

8、液体转移至血管外，静脉扩张； 添加尿钠排泄和降低心脏前负荷；添加尿钠排泄和降低心脏前负荷； 抑制脑和外周交感神经系统，抑制自主神经释放儿茶酚胺，降低中枢神经系统抑制脑和外周交感神经系统，抑制自主神经释放儿茶酚胺，降低中枢神经系统交感输出信号，防止血压升高；交感输出信号，防止血压升高； 降低迷走神经输入阈值，促进副交感兴奋性，抑制通常伴随前负荷下降而出现降低迷走神经输入阈值，促进副交感兴奋性，抑制通常伴随前负荷下降而出现的心动过速反射和血管收缩的心动过速反射和血管收缩 ；12 正常心脏正常心脏 心衰心衰BNPNT-proBNP脑钠肽的合成与释放脑钠肽的合成与释放ANPNT-proANPANPNT

9、-proANPBNPNT-proBNP心室肥大13Pre-Pro-BNP1-134前脑利钠肽前脑利钠肽26-氨基信号序列NT-proBNP1-76BNP77-108Pro-BNP1-108脑利钠肽原脑利钠肽原t1/2 = 18 分钟 室壁张力添加室壁张力添加t1/2 = 60-120 分钟脑钠肽的演化脑钠肽的演化14B B型利钠肽和型利钠肽和NT-proBNPNT-proBNP的去除的去除 BNP的去除 BNP经过受体介导与NP受体C结合被去除 BNP能经过血流中中性肽链内切酶的活性所去除 BNP能被包括肾脏在内的高血流量器官经过被动排泄或部分区域内由中性内切酶降解所去除 NT-proBNP的

10、去除 缺乏自动去除机制 在高血流量的器官床内被去除肌肉，肝脏，肾脏等 机制研讨显示肾脏对NT-proBNP和BNP的去除才干相等15NPsNPs生物学的小结生物学的小结 NP系统在物种间高度保守并有着复杂的基因调理机制。proBNP1-108和NT-proBNP1-76没有或几乎没有生物学活性，BNP3-32的生物学活性较BNP1-32弱。BNP经过多种机制被去除，包括受体去除，中性内切酶降解和由多种器官被动去除。有多种器官能够以被动方式去除NT-proBNP。机制研讨显示肾脏对NT-proBNP和BNP的去除才干相等 16NT-proBNP化验室目的的运用影响影响NT-proBNPNT-pr

11、oBNP的检验前要素的检验前要素 影响影响NT-proBNPNT-proBNP的检验要素的检验要素 影响影响NT-proBNPNT-proBNP的分析要素的分析要素17影响影响NT-proBNPNT-proBNP的检验前要素的检验前要素18影响影响BNPBNP和和NT-proBNPNT-proBNP的检验前要素的检验前要素 NT-proBNP的检测可以在各种不同的标本中进展 ，包括EDTA化血浆、血清和肝素化血浆 。但EDTA化血浆中测得的NT-proBNP较在血清或肝素化血浆中低根据方法的不同能够低10%-13% BNP检测只能用硅化玻璃管采样，NT-proBNP分析的血样可以抽进玻璃或塑料

12、管中而不会改动其稳定性 检测前的非规律运动对BNP和NT-proBNP的影响尚未有报导 姿态对于NT-proBNP值并没有太大的影响 没有发现NT-proBNP有继续的昼夜节律变化。但在心衰患者中有报道发现BNP的一个较小但重要的昼夜节律变化。 在不同的储存条件下血清或血浆NT-proBNP的浓度都较稳定，如室温下保管7天，4 保管10天 ，-20 或更低温度下保管假设干个月。BNP在室温条件下甚至在冷冻情况下都不稳定 19室温下在室温下在EDTAEDTA化血浆中化血浆中NT-proBNPNT-proBNP的短期和长期稳的短期和长期稳定性优于定性优于BNPBNP11A figure1)11A

13、figure1)Clin Chim Acta 2019;338:107115.202-80C2-80C在在EDTAEDTA化血浆中化血浆中NT-proBNPNT-proBNP的短期和长期稳的短期和长期稳定性优于定性优于BNP BNP 11A figure1)11A figure1)Clin Chim Acta 2019;338:107115.21-200C-200C在在EDTAEDTA化血浆中化血浆中NT-proBNPNT-proBNP的短期和长期稳的短期和长期稳定性优于定性优于BNP BNP 11A figure1)11A figure1)Clin Chim Acta 2019;338:10

14、7115.22影响影响NT-proBNPNT-proBNP的检验要素的检验要素23现有现有NT-proBNPNT-proBNP检测的方法间的最大偏倚只需检测的方法间的最大偏倚只需2020，偏倚主要是由于不同检验者采用的不同方法，偏倚主要是由于不同检验者采用的不同方法 ，较容易校正较容易校正13A figure2A13A figure2AClin Chem Lab Med 2019;43:12631273.24BNPBNP检测方法均基于不同的认证规范，运用针对原始检测方法均基于不同的认证规范，运用针对原始BNPBNP分子分子不同部分的抗体，且定标器也不同，同一样本经过不同的方不同部分的抗体，且定

15、标器也不同，同一样本经过不同的方法检测法检测BNPBNP结果的差别能够结果的差别能够4040。 13A figure2B13A figure2BAm J Clin Pathol 2019;123:43944525影响影响NT-proBNPNT-proBNP的分析后要素的分析后要素26年龄和性别是影响正常人群年龄和性别是影响正常人群NT-proBNPNT-proBNP数值的要素数值的要素14A figure114A figure1Clin Biochem 2019;37:210216Eur Heart J2019;26:2269 2276.27BNPBNP和和NT-proBNPNT-proBNP的生物学变异的生物学变异 对延续检测中的差别能否有显著意义进展解释时，需求思索到整体的生物学变异 一组得到良好控制的HF患者中， NT-proBNP 的1周参考变异值为23 一组得到良好控制的HF患者中， BNP 的1周参考变异值为43 NT-proBNP浓度的最低生物学变异出如今NT-proBNP1300ng/L时。28NT-proBNP化验室目的运用的小结NT-proBNP在临床实验室检测非常方便，在各种温度下都稳定