国产舒他西林胶囊的相对生物利用度

1、    国产舒他西林胶囊的相对生物利用度        摘要目的：了解国产舒他西林胶囊的相对生物利用度，评价其生物等效性。方法：10名健康志愿者随机交叉po单剂量750mg国产舒他西林胶囊和进口片剂后，采用HPLC测定血浆中的血药浓度。结果：口服国产舒他西林胶囊和进口片剂后，利用HPLC测得血浆中药物浓度舒巴坦分别在(38.66±10.39)min和(36.68±11.37)min达到峰值(3.45±2.63)mg.L-1和(4.21±

2、3.67)mg.L-1；氨苄西林分别在(26.13±5.98)min和(28.00±7.54)min达到峰值(7.11±2.19)mg.L-1和(7.46±2.79)mg.L-1。血药浓度曲线下面积舒巴坦分别为(629.98±177.34)mg.min.L-1和(687.78±225.44)mg.min.L-1；氨苄西林分别为(693.87±192.15)mg.min.L-1和(708.87±202.48)mg.min.L-1。经药动力学程序计算拟合后，发现氨苄西林和舒巴坦在体内的过程符合一级吸收和消除的二室模型。

3、国产舒他西林胶囊的相对生物利用度舒巴坦为95%(81%118%)，氨苄西林为99%(81%115%)两药的主要药代动力学参数无显著性差异(P0.05)。结论：国产舒他西林胶囊和进口片剂具有生物等效性。 关键词舒他西林；舒巴坦；氨苄西林；生物利用度；HPLCRelative bioavailability of domestic sultamicillin capsule Jin Rui (Jin R),Liu Hongmei (Liu HM),Ma Lin (Ma L),et al (Institute of Clinical pharmacy,the Second Affiliated Ho

4、spital,Harbin Medical University,Harbin150086)ABSTRACTOBJECTIVE：To observe the relative bioavailability of domestic sultamicillin and evaluate the bioequivalence between the domestic capsule and the imported tablet.METHODS:The pharmacokinetics of sultamicillin capsule was determined following a sing

5、le oral dose of 750mg give to 10 volunteers in an open randomized crossover study.Drug concentration in plasma was assayed by HPLC method.RESULTS:The sulbactam peak levels in plasma averaged(3.45±2.63) and (4.21±3.67)mg.L-1 at (38.66±10.39)and(36.68±11.37)min,respectively.The amp

6、icillin peak levels in plasma averaged(7.11±2.19)and(7.46±2.79)mg.L-1 at(26.13±5.98)and(28.00±7.54)min,respectively.The AUC were (629.98±177.34) and (687.78±225.44)mg.min.L-1for (693.87±192.15) and (708.87±202.48)mg.min.L-1 for domestic capsule and improrted t

7、ablet respectively.The concentration-time courses after medication conformed to a 2-compartment open model with a first order obsorption.The sulbactam bioavailability of domestic capsule was 95%(81%118%),the ampicillin bioavailability of it was 99%(81%115%) compared with the standard preparation.The

8、 pharmacokinetic parameters between two products had no significant difference (P0.05).CONCLUSION:The two formulations were of bioequivalence.KEYWORDSsultamicillin,sulbactam,ampicillin,bioavailability,HPLC甲苯磺酸舒他西林(简称舒他西林sultamicillin,Stm)为等摩尔氨苄西林(ampicillin,Amc)和舒巴坦(sulbactam，Sbt)共价结合形成的甲苯磺酸酯，氨苄西林为广

9、谱-内酰胺类青霉素，舒巴坦为-内酰胺酶抑制剂，本身无抗菌活性，但可以抑制细菌产生的-内酰胺酶，使抗生素免受酶的水解灭活，从而发挥药物对产酶菌的抗菌作用。该药经口服吸收后在胃肠上壁被体内非特异性酯酶分解为氨苄西林的舒巴坦，并被吸收入血1。本实验采用专属性好的高效液相色谱法测定血浆中氨苄西林和舒巴坦的药物浓度2，观察健康受试者口服国产舒他西林胶囊后血药浓度的经时过程，估算相应的药代动力学参数，并以进口舒他西林片剂为标准对照，为临床用药提供参考依据。1材料与方法1.1药品与试剂氨苄西林对照品，批号410-9402，效价：85.6%；舒巴坦对照品，批号0430-9501，效价：99.8%，均购自中国药

10、品生物制品检定所。舒他西林供试胶囊(哈尔滨制药二厂产品，批号：961204，规格125mg.粒-1)。舒他西林对照片剂(美国辉瑞制药有限公司生产，批号：606-39645，规格：375mg.片-1)。乙腈为色谱纯，甲醇、高氯酸、乙醚、KH2PO4皆为分析纯，各种溶液的配制均使用超纯水。1.2仪器Waters 2010高效液相色谱仪(717自动进样器，510泵，996 PDA检测器，Millenium色谱管理系统)，SPE C18预处理小柱，离心机，旋涡混合器XW-80型，纯水制备仪(美国密理博公司)。1.3色谱条件1.3.1舒巴坦色谱条件色谱柱为Spherisorb C18 10不锈钢柱，检测

11、波长210nm。流动相：乙腈-0.068mol.L-1KH2PO4(298)，用前超声脱气。流速为1.2ml.min-1，进样量50l。1.3.2氨苄西林色谱条件色谱柱为YWG C18 10不锈钢柱，检测波长210nm，流动相：乙腈-0.068 mol.L-1KH2PO4(4.595.5)，流速为1.2ml.min-1，进样量100l，柱温为室温。1.4试验对象及方法男性健康受试者10名，年龄(21±2)岁，体重(65±5)kg，经生化检验证实肝、肾功能正常，实验前一周及实验期间未服用其它任何药物，4h后方允许进低脂肪的统一饮食。受试者随机分成两组，每组5人，分别服用胶囊制

12、剂和片剂。第二次试验两组交叉，两次试验间隔1周。于早800空腹单剂量服药750mg，200ml温开水送服，于服药后即0，10，20，30，45，60，90，120，180，240，420min于肘静脉取血4ml，置肝素化试管中，离心，取0.5ml血浆供分析。同时观察可能出现的药物不良反应。1.5血样处理和标准曲线1.5.1舒巴坦血样处理和标准曲线取肝素化血浆0.5mol.L-1加入HCl 0.5ml酸化，然后用乙醚提取3次，每次2ml，4000r.min-1，离心5min后小心取出乙醚层，转移至另一试管中，并于40水浴蒸干，残渣用0.2ml流动相溶解，进样50l，外标法定量分析。取健康人血浆0

13、.5ml共9管分别加入舒巴坦标准品，使其浓度分别为0.125，0.25，0.5，1，2，4，6，8，10mg.L-1。样品处理方法同上，经HPLC测定，以样品峰面积A对浓度c作线性回归，得出回归方程：c=0.354+1.74×10-5A，r=0.998。1.5.2氨苄西林血样处理和标准曲线取肝素化血浆0.5ml，精密加入1倍0.5mol.L-1高氯酸沉淀蛋白，漩涡振荡30s,9000r.min-1离心5min取上清液，100l进样，外标法定量分析。取健康人血浆0.5ml共7管分别加入氨苄西林标准品，使其浓度分别为0.125，0.25，1，4，6，10，20mg.L-1。样品处理方法同

14、上，经HPLC测定，以样品峰面积A对浓度c作线性回归，得出回归方程：c-0.2687+1.99×10-5A，r=0.9989。1.6方法回收率的测定1.6.1舒巴坦方法回收率的测定取肝素化血浆0.5ml，精密加入不同浓度的舒巴坦标准品100l，使其血浆中药物浓度为0.5，2，8mg.L-1，按1.5.1项下操作，测得血浆中舒巴坦提取回收率，3个浓度的提取回收率分别为(78.11±7.37)%，(80.46±7.92)%，(82.36±5.41)%；RSD分别为9.43%，9.84%，6.57%。1.6.2氨苄西林方法回收率的测定取肝素化血浆0.5ml，精

15、密加入不同浓度的氨苄西林标准品100l，使其血浆中药物浓度为0.5，2，8mg.L-1，按“1.5.2”项下操作，测得血浆中氨苄西林提取回收率，3个浓度的平均回收率分别为(88.07±7.11)%，(90.17±7.49)%，(94.09±3.18)%；RSD分别为8.07%，8.31%，3.38%。1.7方法精密度试验3个浓度在以上相同条件下测定日内变异和五日内的日间变异、舒巴坦和氨苄西林方法的精密度试验结果见表1。表1舒巴坦和氨苄西林方法的日内和日间变异.n=5浓度/mg.L-1日内变异日间变异±sRSD%±sRSD%舒0.50.49

16、77;0.05411.020.48±0.0459.36巴21.99±0.0713.552.01±0.0673.32坦87.85±0.445.648.05±0.242.95氨苄西林0.50.50±0.0316.200.50±0.0255.0022.06±0.0984.752.08±0.167.6987.99±0.0991.248.09±0.111.361.8数据处理数据采用MCPKP处理，拟合，得到受试者的各项药代动力学参数。对两种制剂中氨苄西林和舒巴坦的药代动力学参数进行配对t检验和(

17、1-2)置信区间法进行生物等效性评价3。 2结果2.1口服750mg舒他西林的血药浓度和药-时曲线两种制剂交叉给予10名受试者后，其药-时曲线符合口服二室模型，血药浓度-时间数据以Slidewrite Plus程序拟合，拟合曲线舒巴坦见1，氨苄西林见2。其药代动力学参数舒巴坦见表2，氨苄西林见表3。1舒巴坦平均药-时曲线国产片剂；-进口片剂，2同2.2统计分析上述试验中以进口片剂为对照制剂，国产胶囊为待测品，对两种制剂中舒巴坦和氨苄西林的药代动力学参数进行配对t检验发现：两药的吸收半衰期、达峰时间、达峰浓度、峰面积无显著性差异(P0.05)。两药AUC的1-2置信区间(90%)氨苄西林为2氨苄

18、西林平均药-时曲线表2口服两种舒他西林制剂后舒巴坦的药代动力学参数.±s，n=10参数国产胶囊进口片剂A/mg.L-137.39±49.5717.95±17.94B/mg.L-10.89±0.621.14±0.78/min-10.0402±0.02470.0306±0.0123/min-10.0019±0.00090.0027±0.0017K/min-10.0762±0.03830.0746±0.0311K12/min-10.0237±0.02030.0142±0.

19、0082K21/min-10.0059±0.00260.0075±0.0040K10/min-10.0124±0.00540.0117±0.0071t1/2k/min11.42± 5.6411.21±6.01t1/2/min24.49±16.3727.18±14.10t1/2/min433.29±191.57371.36±242.39tmax/min38.66±10.3936.68±11.37cmax/mg.L-13.45±2.634.21±3.67AUC

20、/mg.min.L-1639.98±177.19687.78±225.44681.05736.68mg.min.L-1，舒巴坦591.40784.15mg.min.L-1。国产制剂AUC平均值在以上置信区间内，因此，可判断两药的生物利用度等效。 3讨论据文献报道舒他西林不同种属及不同个体间差异较大4。本次实验采用3次乙醚提取可以使舒巴坦的回收率由两次提取的60%提高到80%，所得到的药代动力学参数和国外文献报道的结果基本一致。表3口服两种舒他西林制剂后氨苄西林的药代动力学参数.±s,n=10参数国产胶囊进口片剂A/mg.L-183.64±73.5539.

21、10±23.99B/mg.L-12.85±1.382.68±1.34/min-10.0495±0.02010.0509±0.0172/min-10.0067±0.00280.0063±0.0025K/min-10.0818±0.03040.0929±0.0295K12/min-10.0188±0.01280.0194±0.0104K21/min-10.0143±0.00730.0136±0.0063k10/min-10.0231±0.00570.0241±0.0076t1/2k/min9.73±4.048.17±2.63t1/2/min16.21±6.6815.31±5.84t1/2/min129.45±73.63125.92±48.06tmax/min26.13±5.9828.00±7.54cmax/mg.L-17.11±2.197.46±2.79AUC/mg.min.L-1693.87±192.15708