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文档简介
1、2020版药典微生物限度计数一沙门菌2020版本药典(1)菌种及菌液制备1)菌液制备将铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌分别 接种在胰酪大豆腺琼脂培养基上,35°C条件下培养24小时,将新鲜 培养物用PH7.0的0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液。(2)控制菌检查方法适用性试验控制菌检査用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制 能力及指示特性的检查,各培养基的检查项目及所用的菌株见表1。控制菌培养基特性试验菌耐胆盐革兰阴肠道菌增菌液体培养基促生长能力大肠埃希菌、铜绿性菌假单胞菌抑制能力金黄色葡萄球菌紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基促生长能力+人肠埃希菌、铜绿指示能性
2、假单胞菌沙门菌RV沙门菌增菌液体培养基促生长能力乙型副伤寒沙门菌抑制能力金黄色葡萄球菌木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂促生长能力+乙型副伤寒沙门菌培养基指示能性三糖铁琼脂培养基指示能性乙型副伤寒沙门菌表1控制菌检査用培养基的促生长能力.抑制能力和指示特性沙门检查方法适用性试验1、RV沙门菌增菌液体培养基促生长能力检查:分别接种不人FlOOcfU的乙型副伤寒沙门菌于被检培养基和对照培养基屮,在35°C 条件下培养18小时。2、RV沙门菌增菌液体培养基抑制能力检查:分别接种不大于 lOOcfh的金黄色葡萄球菌于被检培养基和对照培养基中,在35°C条件 下培养24小时。3、木糖赖氨酸脱氧
3、胆酸盐琼脂培养基促生长能力检查:分別接 种不大于lOOcfii的乙型副伤寒沙门菌于被检培养基和对照培养基中, 在35°C条件下培养18小时。4、木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基指示特性检查:分别接种 不大于lOOcfii的乙型副伤寒沙门菌于被检培养基和对照培养基中,在 35°C条件下培养18小时。5、木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基抑制能力检查:分別接种 不大于lOOcfii的乙型副伤寒沙门菌于被检培养基和对照培养基中,在 35°C条件下培养24小时。6、三糖铁琼脂培养基指示特性检查:分别接种不人于lOOcfii的 乙型副伤寒沙门菌于被检培养基和对照培养基中,在35&
4、#176;C条件下培 养18小时。7、三糖铁琼脂培养基抑制能力检查:分别接种不人±lOOcfii的 乙型副伤寒沙门菌于被检培养基和对照培养基屮,在35°C条件下培 养18小时。(3)沙门菌检査1)供试液制备和增菌培养取10g供试品直接接种至90m啲胰酪大豆腺液体培养基中,混匀,35 °C培养24小时。选择和分离培养取上述培养物0.1ml接种至 lOmlRV沙门增菌液体培养基中,35°C培养24小时。取少量RV沙门 菌增菌液体培养物划线接种于木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平 板上,35°C培养24小时。2)选择和分离培养沙门菌在木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上生长良好, 菌落为淡红色或无色、透明或半
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