食用菌制种工艺流程工艺ppt课件

1、食用菌制种工艺流程尤昌建 随着食用菌产业的蓬勃开展，菌种需求量随之添加，而现有菌种消费单位明显偏少，许多菇农不得不向外引种。长途购运菌种不仅破费大，本钱高而且菌种因破瓶而易引起杂菌污染，从而严重影响栽培食用菌的经济效益。菇农假设能掌握菌种消费程序和制种技术，自行制种，逐渐开展成制种专业户，也是一项很好的致富门路。 菌种消费程序，通常分为母种、原种和栽培种，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。其中母种的分别选育技术性强，要求精化；而原种和栽培种的制造那么比较简单。一、母种的分别选育 母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质交融等手段获得。作为普通制种专业户，可以采用人工选择方式分别培育

2、母种。1、采集种源 从野生或人工栽培群体中，选择有代表性的优良菇体作为种源。种菇的规范是：八成熟，朵形圆正、肉质肥厚，无病虫害。采集1-2朵符合上述规范的种菇编上号码，作为分别母种的资料。从栽培室采集的应标有原菌株代号。2、培育基配制琼脂培育基 PDA培育基 马铃薯200-250克，琼脂15-20克，葡萄糖20-25克，清水1000毫升。也可以加硫酸镁1-15克，维生素B1微量，磷酸二氢钾2-3克。先将马铃薯洗净去皮，挖去芽眼，切成薄片，置于铝锅内加水煮沸30分钟，捞起后用4层纱布过滤，取汁。然后将琼脂参与汁内，边加热边搅拌，让琼脂充分溶化；再将葡萄糖等参与，稍煮几分钟后，同样用4层纱布过滤，

3、取其汁液。将汁液趁热装入玻璃试管内。装至管长的15，管口用棉花塞紧，或将汁液装入玻璃三角瓶内，装量20毫升。然后置于高压锅内，在98-108千帕厘米的压力下灭菌30分钟左右。灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌面上，冷却后即成为固体斜面培育基。3、母种分别方法(1)孢子弹射法。将种菇外表消毒，吸干水分后，将菇体悬挂于装有琼脂培育基的三角瓶内，让菇体内的袍子自然散落在培育基上萌生菌丝。也可以剪取一小块菇体，贴附在试管斜面培育基外表，让孢子散落在培育基上萌生菌丝，即能获得母种。(2)组织分别法。将消毒过的种菇，在接种箱内用手从菇柄处对半掰开，或用刀片切开，使菇体构成对开。在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，

4、用接种刀切取一小块菇体，然后纵切成5毫米x10毫米的小薄片，用接种针挑取一小块，接入斜面培育基的中央，待其萌生菌丝，即可得到母种；(3)基内分别法。选择已长菇的木段，削去树皮及表层木质部，用75的酒精消毒后，锯成1厘米厚的薄片，放入01的升汞水中消毒1-2分钟，再用灭菌水洗去残液。然后再将小薄片劈成05-1厘米宽的小条，接入斜面培育基中央，待长出菌丝后即得母种。也可以在已长菇的菌袋中，经消毒处置后，用接种针钩取袋内色泽纯、长势旺的菌丝体，接种在试管斜面培育基中央，待萌生菌丝后，同样获得菌种。4、适温培育 经过上述不同方式将菌种分别接种于试管后，要及时将试管移入已消毒的培育箱或培育室内培育，温度

5、控制在25左右，使分别获得的孢子或菌丝在适温下发育。普通孢子弹射3-4天后孢子萌生成菌落，10天后菌丝长满管；组织分别接种后2-3天，菌丝即萌生，并在培育基上蔓延生长；菇木分别接种后，7天菌丝即恢复生长。5、选育提纯 经过上述方法得到的菌丝，不一定都是优质的，还需求选育提纯。因此，在菌丝萌生后，要仔细察看，挑选色泽纯、强壮、长势正常、无延续的菌丝，在接种箱内连同培育基钩取菌丝，接入另备的试管培育基上。在23-25的恒温条件下，培育7-10天，待菌丝长满管后，再进展察看，从中择优取用，即为“母代母种。6、转管扩接 母代母种可以转管扩接成“子代母种。采用同样的斜面培育基，每支可扩接30-50支子代

6、母种。消费上供应的多为子代母种。它可以再次转管扩接。普通每支可扩接成20-25支子代母种，但转管次数不得超越5次。7、出菇实验 分别选育的母种，还必需进展出菇实验。方法是：把母种接种于瓶或袋装的木屑培育基上，根据各种菇耳种性对温度的要求，进展适温培育，直至出菇才证明可用于消费。二、原种繁衍培育 将母种接在瓶或袋的木屑培育基上，经过培育，即成原种。1、原种木屑培育基配方 杂木屑775，麦麸20，蔗糖1，石膏粉12，硫酸镁03。pH值(灭菌前)65-7，含水量调至60。将上述原、辅料混合拌匀，装入750毫升的玻璃菌种瓶内，装料要求下松上紧。瓶口塞紧棉花，再用牛皮纸包住瓶颈与棉塞。然后置于高压灭菌锅

7、内，在147千帕平方厘米压力下灭菌2-25小时。也可进展常压灭菌，在100下坚持10-11小时，达标后趁热取出，让其冷却。2、接入菌种 待料温降至25以下时，在无菌条件下，将试管种分割成假设干决，经过酒精灯火焰迅速接入原种培育基上，每支母种可按4-6瓶原种。3、发菌培育 接种后及时将玻璃菌种瓶移入25菌种培育室内进展培育。空间相对湿度控制在70以上，防止强光照射。原种培育时间普通菇类需求40-50天，草菇、银耳只需15-20天即可。4、去杂选优 原种培育过程中，要每天进展察看，如发现有杂菌污染的，应立刻淘汰三、栽培种扩展培育 将原种再次扩接在同样的木屑培育基上，在适温条件下培育30-35天即为

8、栽培种(又叫消费种)，可用于消费栽培。栽培种可用750毫升菌种公用瓶，由于运用量大，所以通常多采用聚丙烯菌种袋。袋的规格有12厘米x24厘米、15厘米x28厘米、17厘米x33厘米等，可根据各种菇耳特性和当地习惯选择运用。培育基灭菌采用常压灭菌灶灭菌，要求灭菌温度达100，坚持8-10小时，达标后趁热卸袋冷却。待料温降至25以下时，在无菌条件下接入选定种类的原种。每瓶原种可扩接成50-60瓶栽培种。菌种培育室要求干净，防强光，室温掌握在23-25，并经常检查，发现杂菌污染应及时淘汰，不断选优去劣。当菌丝长满袋，尖端菌丝反转上爬1-3厘米时，为适龄的栽培种 在自然界里，食用菌都不是单独存在的，而

9、是和许多细菌、放射菌、霉菌等生活在一同的。所谓菌种分别，就是把这些和食用菌一同生活的杂菌分别出来，经过培育，获得纯的优良菌种。(一母种的分别培育 食用菌母种的分别，可分为孢子分别法、组织分别法以及基内菌丝分别等。1.孢子分别法 孢子分别法，是用食用菌的有性孢子或无性孢子萌生成菌丝，培育成菌种的方法。这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有差别，且自然分化景象较严重，变异大，需经出菇实验才干在消费上运用。 1单孢分别法 是每次或每支试管只取一个担孢子， 让它萌生成菌丝体来获得纯菌种的方法。蘑菇和草菇用单孢分别得到的菌丝，有结实才干，可采用此法分别消费纯菌种。单孢分别消费上较少采用，而且技术复杂，普通

10、采用多孢分别法。 2多孢分别法 就是把许多孢子接种在同一培育基上，让它们萌生、自在交配来获得食用菌纯菌种的一种方法。种菇孢子弹射法 选择个体强壮、朵形圆正，无病虫害、出菇均匀、高产稳产，顺应性强的八九分成熟的种菇，切去大部分，菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的纱布或脱脂棉、滤纸吸干外表水分。在接种箱或无菌室内，把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下面，漏斗倒盖在培育皿上面；上端小孔用棉花塞住。培育皿放在一个铺有纱布的搪瓷盘上，静置1220小时，菌褶上的孢子就会散落在培育皿内。构成一层粉末状孢子印平菇极淡紫色，蘑菇、草菇 为褐色，香菇、金针菇孢子印白色。用接种针沾取少量孢子在试管中的琼脂外面或培

11、育皿上划线接种。待孢子萌生，生成菌落时，选孢子萌生早、长势好的菌落进展试管培育。 还可用孢子采集器搜集孢子。方法是选好种菇后，按上述程序，悄然掀开玻璃钟罩，将种菇柄朝下插在孢子采收器的钢丝架上，放在培育皿正中央。随即盖好玻璃罩，用纱布将钟掌周围塞好。并在纱布上倒少许升汞或无菌水。移入 20左右恒温箱培育。褶上涂抹法 按无菌操作分别时；应选择成熟的种菇，用接种针直接插入褶片之间，悄然抹取褶片外表子实体尚未弹射的孢子，再在培育基上划线接种。钩悬法 取成熟菌盖的几片菌褶或一小块耳片黑木耳、毛木耳、白木耳，用无菌不锈钢丝或铁丝、棉线等其他悬挂资料悬挂于三角瓶内的培育基的上方，勿使接触到培育基或周围瓶壁

12、。置适宜温度下培育、转接即可。贴附法 按无菌操作将成熟的菌褶或耳片取一小块， 用溶化的琼脂培育基或阿拉伯胶、浆糊等贴附在配管斜面培育基正上方的试管壁上。经612小时的培育，待孢子落在斜面上，立刻把孢子连同部分琼脂培育基移植到新的试管中培育即可。 孢子分别得到的母种、必需进一步提纯复壮，当母种定植一星期左右，菌丝布满斜面时，选择菌丝强壮、生长旺盛无老化、无感染杂茵的母种试管，进而转管扩展，普通到栽培种，转管不宜超越5次。 孢子分别得到的母种，必需经过出菇实验，鉴定为优质菌种后，才可供消费运用。 普通菌类如蘑菇、平菇、凤尾菇、香菇、冬菇和草菇等，都可用多孢分别法获得母种。 例：银耳孢子分别 按无菌

13、操作获取种耳后，悬挂种耳的三角瓶经12小时培育后，瓶底培育基外表就有“孢子印。取出种耳，置 2025温箱培育23天，培育基外表会出现乳白色透明的糊状小菌落，就是银耳的酵母状分生孢子构成的少量银耳菌丝。此时移接入试管斜面培育基上，待长满斜面后，再移接入营养丰富，且外表比较枯燥的培育基上。经30天左右，菌落长出白色菌丝。 银耳的酵母状分生孢子、菌丝只需与羽毛状菌丝的子囊菌香灰菌丝混合培育时，由后者协助分解木材及其他一些纤维物质，提供营养，才干利于银耳孢子萌生，菌丝的定植和子实体的构成。 在两种菌丝交会时，先选出两种纯菌丝。 羽毛状菌丝要纯化选育，普通要选取生长迅速，爬壁力强的试管斜面或种瓶，取先端

14、菌丝，转管移接，置2528上培育，反复转管几次即可得到优良纯种 银耳菌丝的特点，菌丝生长缓慢，担孢子也不易萌生。在进展两菌混合时，先取经8IO天培育的银耳菌丝斜面，按无菌操作方法在该斜面上距银耳菌丝约0.5厘米处接入一 小块羽毛状菌丝。置25下培育1周即得到混合好的银耳母种。2组织分别培育法 利用子实体内部组织，进展无性繁衍而获得母种的简便方法，即组织分别。该法操作简便，菌丝生长发育快，种类特性易保管下来，特别是杂交育种后，优良菌株用组织分别法能使遗传特性稳定下来。1子实体分别 种菇要选朵大盖厚，柄短，八九分成熟的优良种类。切去菇两基部，在无菌箱内以0.1的升汞水浸几分钟，再用无菌水冲洗并揩干

15、或用75酒精棉球擦拭菌盖与菌柄2次，进展外表消毒。接种时，只需将种菇扯开，在萌盖和菌柄交界处或菌褶处，挑取一小块组织；移接 到PDA培育基上。置25左右温度下培育3-5天，就可以看到组织上产生白色绒毛状菌丝，转管扩展即得到菌种。如香菇、平菇等可以用此方法。2菌核分别 茯苓、猪苓、雷丸等菌的子实体不易采集。而常见的是它贮藏营养的菌核。用菌核分别，同样可以获得菌种。方法是将菌核外表洗净，用酒精或升汞消毒后，切开菌核，取中间组织一小块，约黄豆大小，接种在PDA 培育基斜面上，保温培育。应留意的是，菌核是贮藏器官，大部分是多糖类物质，只含有少量的菌丝，因此挑取的组织块要大一些，假设组织块过小，那么不易

16、分出菌种。3菌素分别 有一部分子实体不易找到，也没有菌核，可以用菌素进展分别。如蜜环菌、假蜜环菌。其操作方法是先用酒精或升汞将菌素外表黑色皮层悄然擦拭23次， 然后去掉黑色外皮层菌鞘，抽出白色菌髓部分；用无菌剪刀将菌髓剪一小段，接种在培育基上，保温培育，即得该菌菌种。 菌素分别要留意：因菌素比较细小，分别素也比较细小，分别时极易污染杂菌，所以要严厉操作。3基内菌丝分别培育法 利用食用菌生育的基质作为分别资料，来得到纯菌种的一种方法，叫基内菌丝分别法。 此种分别方法是适宜只需在特定的季节才出现，而且是朝生暮死，不易采得的子实体。基内分别法与组织分别法不同之点是，枯燥的菇木或耳木中的菌丝常呈休眠形

17、状。接种后有时并不立刻恢复生长。因此，有必要保管较长的时间约1个月，以断定菌丝能否能成活。基内菌丝分别法又可分为，材中菌丝分别即菇木或耳木分别法及土中菌丝分别法等。1材中菌丝分别法 就是菇木或耳木分别法，为了减少杂菌的感染，菇耳木在分别之前，必需进展无菌处置。可以把菇耳水外表用酒精灯火焰悄然烧过，以烧死霉菌的孢子，或再用0.1的升汞水浸孢几分钟，然后用无菌水冲洗后用无菌滤纸吸干。接种块切取时应留意。接种块必需在该菌菌丝分布的范围内切取。所以，菌丝生长缓慢的种类应浅取；菌种生长快的种类可以深取。同时。还应根据菇菌的种类、木材质地、菇耳木粗细、发育时间的长短来确定菌丝分布的范围。然后用一把利刀进展

18、切取。接种块应尽量小些，以减少杂菌感染时机，提离菌种的纯度。接种块移到培育基上，就应该放到适宜菌丝生长的2226 的温室或温箱中培育，使菌丝恢复生长。 2土中菌丝分别 食用菌种类很多，许多土生的食用菌；孢子不易萌生。组织分别也不易胜利，用土中菌丝分别获得纯种的方法，叫土中菌丝分别。 土中菌丝分别时要留意，由于土中菌丝体的周围生活着多种多样的土壤微生物，因此分别时必需尽能够避开这些微生物的干扰，尽能够批取清洁菌丝素的尖端、不带杂物的菌丝接种，反复用无菌水冲洗，在培育基中参与一些抑制细菌 生长的药物，如 40微克升的链霉素或金霉素。如发现感染细菌，可以把菌落边缘的菌丝挑出来，接种到木屑培育基中。因

19、细菌没有分解木质素的才干，因此在木屑培育基中不易扩展；只局限于接种处。待菌丝长出感染区后，就可以再进展扩展提纯了。 3子实体基部分离 从瓶栽、袋栽或大床栽培的子实体基部分离出新菌丝的方法，叫子实体基部分离，例：袋栽银耳 从出耳早、出耳率离、无病虫害的栽培室中；选择生活力最强的幼耳5袋，移到气候温暖，有散射光的野外场所进展后期培育，以加强菌丝体的生活力。经培育710天后，待子实体直径达45厘米时便可取回，作为分别的母体。再从中挑选最理想的一朵，用利刀割掉银耳子实体，放置于 0的冰箱或有敌敌畏的容器中过夜，以便杀死瓶中的害虫。然后用75酒精或升汞擦洗耳基和袋子外边的杂质，连同接种工具、接种培育基等

20、移进无菌室。经灭菌后，用接种刀把袋口上部约15毫米厚的老菌根挖除，并进展培育。待袋口显露白色菌丝时，用接种针挑取一块半粒米大的白色菌结体，迅速移入母种试管培育基的中央，悄然地脱去接种针， 塞上棉塞。 为了可以获得较多的母种，一次接种量要有100200支试管，以便从中选择。分别后应及时移入2224恒温箱或温室中培育。由于培育基内水分较多，菌丝恢复要比耳木分别得快。经2-3天后，分别物的边缘就可看 到白色菌丝。每天要至少察看两次，以便提纯。察看、提纯方法与耳木分别法担同。经适温培育10-15天后，当接种块扭结团出现红、黄色水珠时，即可扩展原种。 二原种和栽培种的接种培育母种获得以后，为了满足菌种消

21、费的需求。应选出优良、纯度高的母种进一步扩展为原种。 原种培育基普通采用棉籽壳、木屑、草类等培育基。 瓶装或袋装的原种培育基灭菌后，可送入灭过菌的接种箱内，待瓶中的培育基冷至30以下，可按照无菌操作程序进展接种。 菌种瓶袋放入培育室时，要经常进展检查，一经发现杂菌污染，立刻取出。培育成的原种，菌丝体必需强壮有力，紧贴瓶壁而不干缩，颜色纯粹，具有一定清香味，生活力强，扩制成栽培种时吃料快。 栽培种就是将原种进一步扩展培育成三级种，它和原种的接种及培育一样。普通香菇、平菇、冬菇、猴头、木耳、银耳的栽培种多用锯木、棉皮作培育基。蘑菇多用粪草做培育料。 栽培种要求料块不脱水干缩。菌丝体强壮有力、颜色纯

22、粹，有清香味，无老化景象，无杂菌污染，有的种答应有少量原基，接入栽培料后，发菌快，长势好，生活力强。 原种在接栽培种时，原种瓶口的一层菌丝体应挖去不用。 三液体种的简单培育目前，用液体深层发酵法消费菌种，具有消费量大、周期短、菌龄整齐、本钱低廉、接种方便等特点，是实现食用菌工厂化消费的目的。现将液体种培育过程简述于后，供参考。 简言之就是将纯粹优良的菌种，接入液体培育基固体培育基不加凝固剂，使菌丝繁衍构成大量小菌球，然后将这种培育基拌入木屑或棉籽皮料内，制成菌块、培育其构成子实体。还可用于制原种、栽培种。 培育液体菌种，可将培育液装入三角瓶中，约占空瓶的五分之一分量。用摇瓶机也称摇床来培育。摇

23、瓶机有旋转式和往复式两种，普通多用往复式。液体培育基可用马铃薯汁加糖，麦芽汁配制，也可用玉米粉、豆饼粉、糖、无机盐等配制。可以混合培育基，因适用于多种食用菌和药用菌的培育，均有好效果。组分：豆饼粉2，玉米粉1， 葡萄糖3，酵母粉0.5，磷酸二氢钾0.1，碳酸钙 0.2， pH自然， 12灭菌半小时。然后接种培育。 假设消费量较大，在三角瓶的根底上，再逐级扩展种子缸，发酵罐中进展液体深层通气发酵，产生大量菌种。但由于消费中要求设备繁多，技术性强，我们还应发明条件；实现食用菌栽培的现代化。 四菌种质量的鉴定 菌种质量鉴定最好的方法是，做出菇实验。但是时间比较长。在购置菌种时，或在菌种消费中，如何能知菌丝生长情况，快速判别菌种质量？我们引见几种方法1.肉眼察看 优良菌种菌丝浓白，绒状，粗壮密集，生长整齐，速度快，香味浓重。2.优良菌种规范 可归纳为：纯、香、正、壮、润五个字。检查时，翻开瓶塞，从菌种瓶中部取出小块菌丝体，察看色泽，闻其气味，手捏料块检查