赤霉素对α- 淀粉酶的诱导作用(by wjl)

1、赤霉素对赤霉素对- - 淀粉酶的诱导作用淀粉酶的诱导作用实验前对下列物品灭菌实验前对下列物品灭菌 干净培养皿20个(按10组计，每组同学2个培养皿，一个实验组，一个对照组)用报纸包好； 蒸馏水2瓶(250ml大三角瓶，每瓶盛有150mL蒸馏水)，用锡箔纸或报纸封口； 大三角瓶2个，分别装有100mL蒸馏水和100mL 200ppm的赤霉素溶液（20mg赤霉素溶于少量酒精中，再溶于100ml蒸馏水），且瓶内浸有d1cm的滤纸小圆片。I 赤霉素对赤霉素对- 淀粉酶的诱导作用淀粉酶的诱导作用 实验原理实验原理 禾谷类种子的糊粉层是一种分泌组织，它围绕着种子的胚乳。禾谷类种子的糊粉层是一种分泌组织，它

2、围绕着种子的胚乳。当种子吸水后，糊粉层细胞受来自胚的赤霉素的诱导，合成当种子吸水后，糊粉层细胞受来自胚的赤霉素的诱导，合成或激活许多水解酶类，促使胚乳或基质中的淀粉水解。如果或激活许多水解酶类，促使胚乳或基质中的淀粉水解。如果把胚去掉，则去胚种子不能或很少产生淀粉酶，所以淀粉的把胚去掉，则去胚种子不能或很少产生淀粉酶，所以淀粉的水解不能发生；如果把外源的赤霉素施加到去胚的种子上，水解不能发生；如果把外源的赤霉素施加到去胚的种子上，则能诱导淀粉酶的产生，促进淀粉的水解。则能诱导淀粉酶的产生，促进淀粉的水解。 - - 淀粉酶淀粉酶（水解酶类）糊粉层细胞（分泌组织）产生赤霉素产生赤霉素胚乳或基质中的

3、淀粉水解萌发种子的胚萌发种子的胚外源赤霉素外源赤霉素去胚的种子去胚的种子A: 玉米颖果外型玉米颖果外型 B: 玉米颖果纵切面玉米颖果纵切面种皮种皮胚胚胚乳胚乳子叶子叶胚芽胚芽胚轴胚轴胚根胚根糊粉层糊粉层 实验材料实验材料 小麦种子小麦种子 实验设备实验设备 培养血培养血; 刀片刀片; 镊子镊子; 滤纸滤纸; 酒精灯。酒精灯。 实验试剂实验试剂 赤霉素赤霉素; 安替福民（安替福民（20ml安替福民安替福民+80ml水）水）; 可溶可溶性淀粉性淀粉; 琼脂琼脂; I-KI溶液（溶液（2g 碘化钾碘化钾 + 1g 碘碘 +300ml水）。水）。 实验步骤实验步骤 培养基的制备培养基的制备 取预先剪碎

4、的琼脂取预先剪碎的琼脂0.4g, ,放入盛有放入盛有30mL蒸馏水的蒸馏水的烧杯烧杯，加热搅拌，待琼脂完全溶解加热搅拌，待琼脂完全溶解, ,加入加入0.3g淀粉，继续加热煮沸，直到溶液透淀粉，继续加热煮沸，直到溶液透明为止。在燃烧的酒精灯旁，趁热将溶液倒入预先灭菌的培养皿中，并明为止。在燃烧的酒精灯旁，趁热将溶液倒入预先灭菌的培养皿中，并立即盖好立即盖好( (2 2个培养皿：个培养皿：1 1个作对照，个作对照，1 1个用于个用于GAGA诱导诱导- - 淀粉酶淀粉酶),),待凝固待凝固后备用。如果后备用。如果1010组同学一块配培养基，则需要组同学一块配培养基，则需要8g8g琼脂琼脂+6g+6g

5、淀粉淀粉+600ml+600ml水。水。 放置滤纸圆片放置滤纸圆片 将沾有将沾有200ppm的无菌赤霉素溶液的滤纸圆片，放在的无菌赤霉素溶液的滤纸圆片，放在培养基表面上，每个培养基上可放培养基表面上，每个培养基上可放4片（片（d1cm），另将沾有无菌水的），另将沾有无菌水的滤纸圆片同样贴于培养基上作对照用。以上操作保证滤纸圆片同样贴于培养基上作对照用。以上操作保证无菌操作无菌操作。 种子的去胚，消毒和培养种子的去胚，消毒和培养 选取选取10-20粒大小均一的小麦种子，用刀粒大小均一的小麦种子，用刀片横切两半，留无胚部分用片横切两半，留无胚部分用20%安替福民消毒安替福民消毒15-30分钟，用无

6、菌水冲分钟，用无菌水冲洗洗6次，放置在培养基的滤纸圆片上（次，放置在培养基的滤纸圆片上（1/1），盖上盖，于室温培养），盖上盖，于室温培养48 72小时。小时。 现象观察现象观察 培养完毕后，用镊子小心除去小麦种子和滤纸圆片，用碘培养完毕后，用镊子小心除去小麦种子和滤纸圆片，用碘液染色。观察淀粉的水解情况，并分析实验现象。液染色。观察淀粉的水解情况，并分析实验现象。 注意事项注意事项 赤霉素对赤霉素对- - 淀粉酶的诱导作用实验应该注意：淀粉酶的诱导作用实验应该注意： 1. 1. 无菌操作无菌操作 2. 2. 将小麦的胚去彻底将小麦的胚去彻底 3. 3. 淀粉最好逐步加入，不要一次性倒入，防止液体溢出。淀粉最