中国与美国人食管贲门粘膜上皮中谷胱甘肽S转移酶表达的…

1、中国与美国人食管贲门粘膜上皮中谷胱甘肽S转移酶表达的第30卷第2期l995年6月河南医科大学jOURNAIOFHENANMEDICAIUNIVERSITYVoI30,No2Jun.1995P53changesinesophagealepitheliaamongsubjectsfromChinaandtheUnitedStatesWangI,idong,Zhou0.XingYing.ChungS.Yang(LaboratoryforCancerResearchMedicalErperimentatCenter?HenanMedicalUniversityKeyLaboratoryoOncopat

2、hotogyHenanProvince,Zhengzh4500522DepartmentoJPhyMotogy,XinxiangMedicalCollege.Xin_zang453003.LaboratoryCancerResearch,(?olegePharmacy,RutgersUniversity,Piscatac,ay,NJ08854UainingpositivecellsincreasedfrombasalcellhyperplasiatodysplasiainboththeAmericansamplesandtheChinesesamples.However,thenumberof

3、P53proteinimmunostainingpositivecellsandthefrequencyfP53accumulationatdifferentstagesofIesionswasmuchlowerintheAmericansamplesthanintheChinesesamples.ThiscomparativestudymayshedlightontheroleofP53changesinesophagealcarcinogenesis.Keywords:esophagus;tumorsuppressorgene;cellproliferation美国人食管和贲门粘膜上皮中谷

4、胱甘肽S转移酶表达的比照研究王立东周琦王耀红J.SmithsGoldTheresaSmithSusanGoldstein3王立东周琦王耀红.J.0/Z9jrI,仁R7,fChungS.Yang(河南医科大学医学实验中心癌症研究室河南省肿瘤病理学重点实验室郑州450052河南医科大学第一附属医院病案室郑州4500523美国新泽酉罗格斯州立大学癌症研究室,新泽西08855)摘要利用免疫过氧化氢酶法.对中国八和美国人食管上皮和中国人贲门上皮各胱甘肽s转移酶GST三种亚型的表达进行测定.中国人食管上皮Gs,GST.和GsT的阳性表达率分别为j3,8o和20;贵门上皮的表达率分别为92,77和31.与中

5、国人相比,美国人食管上皮三种GSI亚型表达率均低于中国人在贵门上皮,从正常到慢性浅表性胃炎和慢性萎缩性胃毙,GST和GST.的阳性表达率也逐渐升高;在中国人食管,从正常上皮到基内幕胞增生到间变,GsT和GST的阳性表达率逐渐升高这些结果将有助于加深对GST在食管和贲门上皮中的表达及其作用的了解.关键词谷胱甘肽转移醇食管;赏门;上皮中国分类号R7351*国家自然科学基金和美国NCI联合资助课题?l24?雇带时韶.免厦组臻吣第2期乇立东等中国与美国凡食营和贲门粘膜上皮中各胱甘肽S转移酶表达的对塞食管癌是世界上最常见的十大恶性肿瘤之一,在中国,食管癌死亡率仅次于胃癌,占所有恶性肿瘤死亡率的第二位.食

6、管癌的预后极差,对化疗药物产生的耐药性可能是其较重要的原因之一1.生物转化酶活性的升高,例如谷胱甘肽S转移酶(GST),可能是消化遭肿瘤产生对化疗药物耐药性的原因之一】.GST是一组同功酶,主要包括三种类型+即a和.它们不但是一种重要的解毒酶,而且参于抗肿瘤药物的代谢因为GST,特别是GST在许多治疗效果极差的人恶性肿瘤组织中,包括消化道H瘤,出现过度表达.因此,对这一组酶的研究,已受到国内外学者的极大重视作者报告了GSTGSTt和GST在人食管和贲门上皮及癌前病变中的表达状况,并对中国人和美国人食管上皮GST的表达状况作了比拟.1对象与方法1.1对象来自中国食管癌高发区林县和辉县居民和美国低

7、发区人群食管和贲门粘膜活检组织经80酒精固定,常规组织切片,组织病理学诊断和免疫组化分析.1.2组织病理学诊断组织学诊断标准见参考文献5,根据细胞形态学特征及组织结构的变化,将食管上皮分为正常,基内幕胞增生和间变,将贲门上皮分为正常,慢性浅表性胃炎,慢性萎缩性胃炎和间变.1.3免疫组织化学1.3.1试剂:NCLGST为免多克隆抗人GST抗体NCLGST为兔多克隆抗人GST抗体;NCLGST为兔多克隆抗人GST9抗体,三种抗体均来自美国NovocastraLaboratoriesLid公司.ABC试剂盒和DAB试剂盒来自美国VectorLaboratoriesInc公司.2牛冻干血清蛋白(BSA

8、)来自美国SigmaChemicalIne公司.1.3.2实验步骤:采用卵白素一生物素一辣根过氧化氢酶复合物(ABC)法主要步骤如下:切片脱蜡至水.0.1H0室温孵育20rain;正常羊血清(1:50)室温孵育20rain;2BSA稀释三种抗GST,GST和GST抗体至1t500,4孵育12h;生物素标记的第二抗体(羊抗免)(1=200)室温孵育45rain;ABc室温下孵育60rain(使用前30rain配制);二氨基联苯胺(DAB)和Ho混合液室温避光孵育25rain,显微镜下观察结果.1.3.3阴性对照:采用羊正常血清封闭非特异性免疫球蛋白反响和省略孵育第一抗体作阴性对照.1.4统计学分

9、析采用检验比拟各种组织GST.,GST和GST阳性表达率的差异.2结果2.1组织学观察在l5例中国人食管粘膜活检组织中,共检出3例正常上皮,10例基内幕胞增生,2例间变.在13例中国人贲门粘膜活检组织中,共检出5例正常上皮,3例慢性浅表性胃炎,5例慢性萎缩性胃炎在12例美国人食管组织中,共检出1例正常上皮,7例基内幕胞增生和4倒闭变2.2GST.,GsT和GST免疫组织化学观察2.2.1免疫反响类型:在食管和贲门正常上皮和各种癌变中,均观察到GST,GST和GST在细胞浆和细胞核内的阳性免疫反应甚至在同一组织中,观察到细胞浆和/或细关系:见表2.中国人食管上皮从正常到基内幕胞增生到问变,GST

10、a,GSTt和GST的阳性表达率均逐渐升高.与中国人相比,美国人正常食管来发现GST三种亚型的表达,在相同类型病变中,均明显低于中国人.并且随癌变进展,未出现升高趋势中国人正常贲门上皮GST.有较高的阳性表达率,但随病变进展,未出现明显升高趋势.而GST和GST的表达,随病变进展而升高,特别是GST(尸<O.05,检验)这一点,与中国人食管很相似.表2食管和贲门上皮GST裹选与上皮囊变程度的比拟分析组织捡盔例数旦里型型兰堕!口u3讨论作者报道了GST,GST和GST在食管癌高技区和低发区人群食管和贲门上皮中的表达,并对其表达状况与病变的关系作了初步分析.本研究的重要发现在于,来自

11、食管癌高发区的中国人食管上皮GST三种亚型的阳性表达均明显高于来自食管癌低发区的美国人,特别是GST.中国人食管上皮GsT,GST和GST的表达,特别是GST随病变进展有明显升高趋势.而美国人食管与此相反.来自同一地区的中国人食管和贲fl上皮(;sT的表达十分相似.目前,对人体许多治疗效果极差的恶性?126?肿瘤的研究说明这些肿瘤组织中(;sT,特别是GST的含量升高,酶活性增强n此现象提示这一同功酶可能在肿瘤的药物耐药性形成中起重要的作用在大多数耐药性细胞中.GST酶活性增强,而且GST是最主要的存在类型但是,GST,GST也可能参于抗肿瘤药物耐药性的产生Wilbert等报道10倒荷兰人食管

12、鳞癌和腺癌组织及邻近的正常组织中GST的酶活性,发现癌组织GST活性及含量明显高于正常组织口.作者的结果说明食管癌高发区非癌患者食管和贲门癌前病变中已有明显的GST的表达,且其阳性表达率与病变的进展程度相关而来自低发区的食管上皮那么无这种现象,而且其表达明显低于高发区人群.这一结果提示GST,特别是GST的表达与食管和贲门癌发病的人群流行病学分布特征相一致.如果GST确实是参于肿瘤化疗耐药性形成的主要原因,可以推测,GST酶活性升高的食管或贲门癌患者,其预后将比GST酶活性低的人爱差进一步研究GST在食管和贲门癌患者中的表达和其对化疗和预后的影响,将是十分有意义的工作.(本文附图见插而_)参考

13、文献lYakshePN.FeischerDE.Neoplasmsofesophagus.InCastellx)fed).Theesophagus.LittletBrown,19922272HayesJD,PickettCBtM_dntleTj(eds)GIutarhioneStransferaseanddrugresistance.TalotandFrancis.London.1990.2253DullDtFenselauC,HiltonJ.(haracterazationofmelphalangrutathloneadductswhoseforrntioniscatalyzedbyutath

14、ioneS?transferaseBiochemPharmaeoI.1986.35:34054TsuehidaS.SatoK.Glutathionetransferaseandcancer.Crit.Rev.Biochem.MolBio1.1992,27:3375WangLD,StephanieTS,ZbouQeta1.ChangesinP53andcyelinD1proteinlevelsandcellpro?第2期壬立末等中国与美国人食管和贲门牯膜上皮中答胱甘肽S转穆酶表达的比照研究liferationindifferentStagesofhumanesophagealandgastric

15、cardiacarcinogenesis.IntJCancer,1994,59t51476PetersWHM,Bo0nCw,RoelofsHM,eta1.ExpressionofdrugmetabolizingenzymesandP?170glycoproteinineolorectalcarcinomaandnormalmucosa.Gastroenterology,1992103448PetersWHM.WobhesT,Roe1oIsHM.eta1.GlutathioneS-transferasein#sophagealcancer.Carcinogenesis,1993,14:1377(

16、19950325收稿责任编辑张功员)ExpressionofglutathioneS-transferaseinesophagealandgastriccardiaiepitheliumamongsubjectsfromChinaandtheUnitedStates阢Lidong,zb,WdngYaSusanGoldstein,TheresaSmith3,ChungS.Yang,(LabocatoryforCancerResearchofMedicalExperimentalCenter,HenanMedicalUniversi-ty,KeyLaboratoryofOncopathologyo

17、fHenanProvince,Zhengzhou,450052ArchivesoftheFnAffiliatedHospital,HenanMedicalUniversity,Zhengzhou450052LaboratoryforCancerResearch,CollegeofPharmacy,RutgersUniversity,NewJersey08855U.S.A)Theobiectiveofthepresentstudyistodetermine:theexpressionofGSTq,GSTandGSTpintheesophagealandgastriccardialepitheli

18、umamongthesubjectsfromChinaandtheUnitedStateswithimmunohistoehemistrymethod.Thewasobservedincophsmandnuclei.ThepositiveexpressionratesofGST,GSTandGSTinthees6phagealepitheliumoftheChinesesampleswere53,8Oand2Orespectively,whilethoseinthegastriccardiawere92,77and31respectively.TheexpressionofGSTinesophagealepitheliumoftheAmericansampleswaslowerthanthatintheesophagealepitheliumoftheChinesesamples.Forthegastriccardia,thepositiveimmunostainingratesofGSTrandGST#increasedwiththelesionsprogressingfromnormaltochronicsuperlicmlgastritis(CSG)andchronicatrophicgastriti