沙门氏菌检验

1、 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）沙门氏菌检验沙门氏菌检验中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准GB/T 4789.4-2010 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分） 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）前增菌：前增菌：25克（加工食品）克（加工食品）+225毫升缓冲蛋白胨毫升缓冲蛋白胨 37度培度培养养8-18小时。小时。增菌：轻轻摇动培养过的样品混合物，移取增菌：轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL，转种，转种于于10 mL TTB

2、内，于内，于421培养培养18 h24h。同时，。同时，另取另取1mL，转种于，转种于10mLSC 内，于内，于361培养培养18h24h。（一）前增菌和增菌（一）前增菌和增菌（二）分离培养（二）分离培养最适生长温度为最适生长温度为3537，最适最适pH值为值为6.87.8。选择性琼脂平板：选择性琼脂平板：BS 琼脂、琼脂、XLD 琼脂琼脂 、或、或HE 琼脂或沙琼脂或沙门氏菌属显色培养基门氏菌属显色培养基 。 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分） 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）（三）七项生化

3、试验（三）七项生化试验1、三糖铁琼脂试验、三糖铁琼脂试验2、靛基质试验（吲哚试验）、靛基质试验（吲哚试验）3、尿素酶试验、尿素酶试验4、氰化钾试验（、氰化钾试验（KCN）5、赖氨酸脱羧酶试验、赖氨酸脱羧酶试验6、丙二酸盐试验、丙二酸盐试验7、ONPG试验试验 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）1、三糖铁（、三糖铁（TSI）试验）试验 肠道杆菌科为革兰氏阴性菌，可发酵葡萄糖产酸。三糖肠道杆菌科为革兰氏阴性菌，可发酵葡萄糖产酸。三糖铁琼脂试验是利用糖类发酵之不同与硫化氢产生与否，将肠道铁琼脂试验是利用糖类发酵之不同与硫化氢产生与否，将肠道杆菌科各组

4、细菌或各菌属加以区分。杆菌科各组细菌或各菌属加以区分。 三糖铁琼脂斜面培养基含有三糖铁琼脂斜面培养基含有1乳糖及蔗糖与乳糖及蔗糖与0.1葡萄糖葡萄糖作为发酵基质，且以酚红作为酸碱指示剂，如培养基由橘红转作为发酵基质，且以酚红作为酸碱指示剂，如培养基由橘红转为黄色，表示有糖类发酵。测试时使用接种针先穿刺至底部，为黄色，表示有糖类发酵。测试时使用接种针先穿刺至底部，而后于斜面作划线接种，经培养而后于斜面作划线接种，经培养18-24小时后，依情况判断糖小时后，依情况判断糖类之发酵情形。类之发酵情形。 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）（1）斜面碱性（

5、红色）斜面碱性（红色-）底部酸性（黄色）底部酸性（黄色+）产气或不）产气或不产气（产气时会造成琼脂裂开）：表示仅葡萄糖发酵。产气（产气时会造成琼脂裂开）：表示仅葡萄糖发酵。因微生物优先分解葡萄糖产酸，使培养基变黄，但因因微生物优先分解葡萄糖产酸，使培养基变黄，但因葡萄糖含量低，于斜面产生之微量酸立即氧化而呈碱葡萄糖含量低，于斜面产生之微量酸立即氧化而呈碱性反应，同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱，性反应，同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱，培养基底部则因氧张力较小，且微生物生长较慢，故培养基底部则因氧张力较小，且微生物生长较慢，故仍维持酸性反应。仍维持酸性反应。 （2）斜面酸性（黄色）斜面

6、酸性（黄色+）底部酸性（黄色）底部酸性（黄色+）产气或不）产气或不产气：表示除了葡萄糖发酵外，乳糖与（或）蔗糖也产气：表示除了葡萄糖发酵外，乳糖与（或）蔗糖也发酵。由于乳糖与蔗糖浓度高，经继续发酵，可维持发酵。由于乳糖与蔗糖浓度高，经继续发酵，可维持培养基斜面与底部保持酸性反应。培养基斜面与底部保持酸性反应。 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）（3）斜面碱性（红色）斜面碱性（红色-）底部碱性（红色）底部碱性（红色-）或无变化（橘）或无变化（橘红色）：表示无糖类发酵。而蛋白质则于有氧或厌氧条件红色）：表示无糖类发酵。而蛋白质则于有氧或厌氧条件下进

7、行代谢产生氨，而使培养基呈碱性反应，如有氧与厌下进行代谢产生氨，而使培养基呈碱性反应，如有氧与厌氧均发生蛋白质分解，则斜面与底部均呈碱性反应。氧均发生蛋白质分解，则斜面与底部均呈碱性反应。 为使结果准确，应于接种培养为使结果准确，应于接种培养18-24小时内观察结果，以小时内观察结果，以确保糖类尚未用尽，且蛋白质分解之碱性终产物尚未产生。确保糖类尚未用尽，且蛋白质分解之碱性终产物尚未产生。 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）培养基变黑培养基变黑（4）三糖铁琼脂培养基中亦）三糖铁琼脂培养基中亦含有硫代硫酸钠作为产生硫含有硫代硫酸钠作为产生硫化氢之

8、基质，且含硫酸亚铁化氢之基质，且含硫酸亚铁作为检测此无色产物之指示作为检测此无色产物之指示剂，经接种培养后，若微生剂，经接种培养后，若微生物有硫化氢产生，会与亚铁物有硫化氢产生，会与亚铁离子作用生成不溶性硫化亚离子作用生成不溶性硫化亚铁之沉淀，进而使培养基变铁之沉淀，进而使培养基变黑。黑。 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）2、靛基质（吲哚）试验、靛基质（吲哚）试验阴性（液面黄）阳性（液面玫瑰红）阴性（液面黄）阳性（液面玫瑰红） 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）3、尿素酶试验、尿素酶试验阴性（

9、黄）阳性（红）阴性（黄）阳性（红） 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）5、赖氨酸脱羧酶试验、赖氨酸脱羧酶试验 对照对照 阳性（紫）阳性（紫） 阴性（黄）阴性（黄） 4、氰化钾试验、氰化钾试验 “浑浊浑浊”为为“+” 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分） 沙门氏菌属在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）沙门氏菌属生化反应有尽有初步鉴别表 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技

10、术（微生物部分）ONPG试验试验阳性（黄）阳性（黄） 空白空白丙二酸盐试验丙二酸盐试验阳性（兰）阳性（兰） 阴性（不变）阴性（不变） 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）第一天第一天 前增菌培养前增菌培养 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分） 第二天 增菌培养 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分） 第三天 接种BS和沙门氏显色平板进行分离培养 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品安全检验技术（微生物部分）闽北职业技术学院食品与生物工程系 从平板上挑取可疑菌落接种到：三糖铁琼脂和赖氨素从平板上挑取可疑菌落接种到：三糖铁琼脂和赖氨素脱羧酶试验管及对照，并同时在营养琼脂平板上划线分离脱羧酶试验管及对照，并同时在营养琼脂平板上划线分离培养。培养。第四天第四天 观察分离结果、生化试验观察分离结果、生化试验 沙门氏菌检验沙门氏菌检验食品安全检验技术（微生物部分）食品