常用缓冲溶液配制方法

1、常用缓冲溶液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液0.05mol/LX毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI,再加水稀释至 200毫升pHXYpHXY2.05044.03.05011.42.45032.43.2508.22.65024.23.4506.42.85016.83.6505.0甘氨酸分子量 =75.07 , 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升.2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液0.05 mol/LX毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl,再加水稀释到 20毫升pH(20 C )XYpH(20 C)XY2.254.0703.251.4

2、702.453.9603.450.9902.653.2953.650.5972.852.6423.850.2633.052.022邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23, 0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH0.2 mol/LNa2HPO4(<#)0.1mol/L柠檬酸(<#)pH0.2mol/LNa2HPO4(<#)0.1 mol/L柠檬酸(<#)2.20.4010.605.210.729.282.41.2418.765.411.158.852.62.1817.825.611.608.402.83.1716.835.812.

3、097.913.04.1115.896.012.637.373.24.9415.066.213.226.783.45.7014.306.413.856.153.66.4413.566.614.555.453.87.1012.906.815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510.657.618.731.274.89.8610.147.819.150.855.010.309.708.019.450.55Na2HPO4分子量 =14.98 , 0.2 mol/L

4、溶液为 28.40 克/升.Na2HPO4 - 2H2O 分子量=178.05, 0.2 mol/L 溶液含 35.01 克/升.C4H2O7 也0 分子量 =210.14, 0.1 mol/L 溶液为 21.01 克/升.4 .柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH钠离子浓度mol/L柠檬酸克C6H8O7 - H2O氢氧化钠克NaOH 97%盐酸量升HCl 浓最终体积升2.20.2021084160103.10.2021083116103.30.2021083106104.30.202108345105.30.3524514468105.80.45285186105106.50.382661561

5、2610?使用时可以每升中参加1克克酚,假设最后 pH值有变化,再用少量 50%?氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存.5 .柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L )pH0.1 ? mol/L柠檬酸(<#)0.1? mol/L柠檬酸钠(<#)pH0.1? mol/L柠檬酸(<#)0.1 ? mol/L柠檬酸钠(<#)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.212.3

6、7.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.64.89.210.8柠檬酸C6H8O7 - H2O：分子量210.14, 0.1 mol/L溶液为21.01克/升.柠檬酸钠Na3 C6H5O7 - 2H2O：分子量294.12, 0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升.6.乙酸-乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L)pH(18 C )0.2? mol/LNaAc心)0.3? mol/LHAc()pH(18 C)0.2? mol/LNaAc日)0.3? mol/LHAc()2.60.759.254.85.904.103.81.208.80

7、5.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.60Na2Ac 3H2O 分子量 =136.09, 0.2 mol/L 溶液为 27.22 克/升.7.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2)pH0.2? mol/LNa2HPO4 ()0.2? mol/LNaH 2PO4 ()pH0.2? mol/LNa2HPO4日)0.2? mol/LNaH2PO4 ()5.88.092.07.061.039.05.910.090.07.167.0

8、33.06.012.387.77.272.028.06.115.085.07.377.023.06.218.581.57.481.019.06.322.577.57.584.016.06.426.573.57.687.013.06.531.568.57.789.510.56.637.562.57.891.58.56.743.556.57.993.07.06.849.551.08.094.75.36.955.045.0Na2HPO4 2H2O 分子量 =178.05, 0.2 mol/L 溶液为 85.61 克/升.Na2HPO4 12H2O 分子量 =358.14, 0.2 mol/L 溶液为

9、 71.628 克/升.NaH 2PO4 2H2O 分子量 =156.01 , 0.2 mol/L 溶液为 31.202 克/升.磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa值,所以用它们配制的缓冲液,pH范围最宽：NaH2PO4 : pKal = 2.12 , pKa2 = 7.21;Na2HPO4： pKa1 = 7.21, pKa2= 12.32配酸性缓冲液：用 NaH2PO4, pH = 14,配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐,pH = 68,配碱性缓冲液：用 Na2HPO4, pH = 1012.用钾盐比钠盐好,由于低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但假设配

10、制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,由于SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾.磷酸盐缓冲液的优点为：容易配制成各种浓度的缓冲液；适用的pH范围宽；pH受温度的影响小；缓冲液稀释后pH变化小,如稀释10倍后pH的变化小于0.1.其缺点为：易与常见的钙Ca2+离子、镁 Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;会抑制某些生物化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.(2)磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15 mol/L)pHmol/L/15Na 2HPO4日)mol/L/15KH 2PO4()pHmol/L/15Na 2HPO4()

11、mol/L/15KH 2PO4()4.920.109.907.177.003.005.290.509.507.388.002.005.911.009.007.739.001.006.242.008.008.049.500.506.473.007.008.349.750.256.644.006.008.679.900.106.815.005.008.1810.0006.986.004.00Na2HPO4 2H2O 分子量 =178.05, 1/15M 溶液为 11.876克/升.KH 2PO4 分子量 =136.09, 1/15M 溶液为 9.078 克/升.8.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.

12、05M)X毫升0.2M K 2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升pH(20 C)X ()Y (<#)pH(20 C)X (计)Y (<#)5.850.3727.052.9636.050.5707.253.5006.250.8607.453.9506.451.2607.654.2806.651.7807.854.5206.852.3658.054.6809.巴比妥钠-盐酸缓冲液18CpH0.04M巴比妥钠溶液0.2V盐酸pH0.04M 巴比妥钠溶液毫升0.2N盐酸毫 升6.810018.48.41005.217.010017.88.61003.827.210016

13、.78.81002.527.410015.39.01001.657.610013.49.21001.137.810011.479.41000.708.01009.399.61000.358.21007.21100巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升10. Tris-盐酸缓冲液0.05M , 25C50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷Tris溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后,加水稀释至100毫升.pHX裕pHX()7.1045.78.1026.27.2044.78.2022.97.3043.48.3019.97.4042.08.4017.27.5040.38.5014.77.

14、6038.58.6012.47.7036.68.7010.37.8034.58.808.57.9032.08.907.08.0029.2三羟甲基氨基甲烷(Tris) HOCH2 CH2OHCHOCH2 NH2分子量=121.14;0.1M溶液为12.114克/升.Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严.11.硼酸-硼砂缓冲液0.2M硼酸根pH0.05M 硼砂(<#)0.2M 硼酸(<#)pH0.05M 硼砂(<#)0.2M 硼酸(<#)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.0

15、7.09.08.02.0硼砂 Na2B4O7 10H2O,分子量=381.37;0.05M 溶液=0.2M 硼酸根含 19.07 克 /升.硼酸H3BO3,分子量=61.83,0.2M溶液为12.37克/升.硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存. 12.甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05M)X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升pHXYpHXY8.6504.09.65022.48.8506.09.85027.29.0508.810.05032.09.25012.010.45038.69.45016.810.65045.5甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.0

16、1克/升.13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M硼酸根)X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升pHXYpHXY9.3506.09.85034.09.45011.010.05043.09.65023.010.15046.0硼砂 Na2B4O7 10H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为 19.07 克/升.14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M)Ca2+、Mg 2+存在时不得使用pH0.1MNa2CO3日*0.1MN 2HCO3日*20C37 C9.168.77199.409.12289.519.40379.789.50469.909.725510.149.9

17、06410.2810.087310.5310.288210.8310.5791Na2CO2 10H2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为 28.62 克/升.N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升.15.“PBS缓冲液pH7.67.47.27.0H2O100010001000100mlNaCl8.58.58.58.5gNa2HPO42.22.22.22.2gNaH2PO40.10.20.30.4gpH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions名称(Name)配制(Compounding way)不同温度时的 pH 值(pH in differe

18、nt temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C草酸盐标准缓冲溶液cKH3(C2Q)2 2H2O 为 0.05mol/L .称取 12.71g四草酸钾 Km©.) 2 2H2O溶 于无二氧化碳的水 中,稀释至 1000ml1.671.671.671.671.681.681.691.691.69不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-1.701.711.721.721.741.771.791.81-酒石酸 盐标准 缓冲溶 液在25C时,

19、用无二 氧化碳的水溶解外 消旋的酒石酸氢钾 (KHC4H4Q),并剧烈 振摇至成饱和溶液不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C-3.563.553.553.55不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-3.553.553.553.563.583.613.653.67-苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液c(C6HCOHCOK)为 0.05mol/L ,称取于 (115.0 士 5.0) C干 燥23

20、h的邻苯二 甲酸氢钾(KHCHLQ) 10.21g,溶于无CO 的蒸彳留水,并稀释至 1000ml(注：可用于酸度计 校准)不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0 C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C4.004.004.004.004.004.014.014.024.04不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-4.054.064.084.094.134.164.214.23-磷酸盐标准缓冲溶液分别称取在(115.0 士

21、5.0) C枯燥2 3h的磷酸氢二钠(N&HPO) (3 . 53 士 0. 01)g和磷酸二 氢钾(KHPO) (3 . 39 士 0. 01)g ,溶于预 先煮沸过15不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0 C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C6.986.956.926.906.886.866.856.846.84不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-30min并迅速冷却的蒸偕水中,并稀释至1000ml (

22、注：可用于酸度计校准)6.836.836.836.846.856.866.886.89-硼酸盐标准缓冲溶液c(Na2BQ I0H2O)称 取硼砂(N&B4. 10H2.) (3 . 80 ± 0 . 01)g(注意：不能烘！), 溶于预先煮沸过1530min并迅速 冷却的蒸偕水中,并 稀释至1000ml.置 聚乙烯塑料瓶中密 闭保存.存放时要防 止空气中的CO2的进 入(注：可用于酸度计校准)不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C9.469.409.339.279.229.

23、189.149.109.06不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-9.049.018.998.968.928.898.858.83-氢氧化 钙标准 缓冲溶 液在25 C,用无二氧 化碳的蒸偕水制备 氢氧化钙的饱和溶 液.氢氧化钙溶液的 浓度 c1/2Ca(OH) 2 应在(0.04000.0412 ) mol/L.氢 氧化钙溶液的浓度 可以酚红为指示剂, 用盐酸标准溶液 c(HCl)=0.1mol/L 滴定测出.存放时要 预防空气中的二氧化碳的进入.出现混 浊应弃去重新配制不同温度时的

24、 pH 值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C13.4213.2113.0012.8112.6312.4512.3012.1411.98不同温度时的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-11.8411.7111.5711.45-注：为保证pH值的准确度,上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制常用pH缓冲溶液的配制和 pH值Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions序号(No.)溶液名称(Solution name)配制方法(Preparation)pH值(pH value)1氯化钾-盐酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl 与 25.0 ml 0.2 mol/L?KCl混合均匀后,加水稀释至100 ml1.72氨基乙酸-盐酸在500 ml水中溶解氨基乙酸150 g,加480 ml浓盐酸