南京工业大学仪器分析复习重点

1、仪器分析重点GC1、GC仪和HPLC仪在结构原理上有何 异同答：同：气源一 f一色谱柱一检测器一记录仪进样异：1气源用气泵或贮气瓶 供气；2要让被测样品组分充分气化,相关通路中应 具备高温100400 C环境.2、能够在GC上检测的化合物,应具哪些主要的理化特性答：具有易挥发性、高温不分解、不能与载气发生反响.3、GC常用载气有哪些答：N2、H2、Ne4、固定相、吸附齐h担体、固定液有何 异同常见的气-固吸附色 谱有哪些常见的担体、 固定液有哪些答：一、固定相主要分二大 类：1固体固定相2液体固定相气-固吸附色 谱固定相 吸附剂分类：吸附剂J 1非极性吸附齐1J:如活性炭L 2极性吸附齐k如硅

2、胶、氧化铝、分子筛等气-液色谱分配色谱固定相 1固定液 2惰性担体担体：又称为载体,是一种化学惰性的多孔固体 颗粒,作用是提供惰性外表, 支持 固定液,使固定液以薄膜 状态分布在其外表.二、常见的气-固吸附色谱1非极性吸附齐1J:如活性炭2极性吸附齐k如硅胶较强极性、活性氧化铝弱极性、分子筛等三、常见的担体有：1硅藻土型红色硅藻土白色硅藻土2非硅藻土型常见固定液第一类：非极性固定液多数是饱和烷烧,如：异角鲨烷.固定液和组分分子间的作用力是色散力, 主要用于 别离煌类和非极性化合物 第二类：弱极性固定液主要是含甲基的硅 氧烷类.固定液和 组分分子间的作用力为色散力.第三类：中等极性固定液种类多、

3、应用广,如硅氧烷OV17等5、GC检测器可分为哪几种类型英文缩写,其工作原理是什 么哪些属于浓度型检测器, 哪些属于质量型检测器答：1热导池检测器TCD检测原理：基于不同的物 质有不同的导热系数2氢火焰离子化检测器FID 原理：根据 气体的导电率与该气体中所含带电离子的浓度呈正比这一事实而设计的.一般情况下,组分蒸汽不 导电,但在能源作用下,组分蒸汽可被 电离生成带电离子而导电.3电子捕获检测器ECD原理：第一步：形成约10-8A 的基流N2 + 3 - N2+ + e-第二步：电子捕获AB + e- - AB- + EAB + e- - A + B- + E第三步：生成中性化合物AB- +

4、N2+ 一 AB + N2A- 或 B- + N2+ 一中性分子 一由载气带出4火焰光度检测器FPD原理：利用在一定外界 条件下即在富 氢条件下燃烧促使一些物 质产生化学发光, 通过波长选择、光信号接收,经放大把物质及其含量和特征的信 号联系起来.按输出信号与组分含量关系：1浓度型检测器热导池检测器、电子捕获检测器2质量型检测器氢火焰离子化 检测器、火焰光度检测 器6、各种检测器一般用什么载气氢焰检测器、火焰光度 检测器涉及到哪几种气体答：热导池检测器TCD:用N2作载气,灵敏度较低,He、H2 ,灵敏度高氢火焰离子化 检测器FID :选用N2作载气电子捕获检测器ECD :载气一般为N2或Ar

5、火焰光度检测器FPD: N2氢焰检测器涉及：H2、02、N2火焰光度 检测器涉及：H2、02、N27、各种检测器在性能上各有什 么特点各有什 么缺点各有什 么侧重应用答： 1热导池检测器TCD由于结构简单,性能稳定,通用性好,而且线性范围宽,价格廉价,因此是应用最广,最成 熟的一种检测器.其主要缺点是 灵敏度较低.2氢火焰离子化检测器FID 特点：灵敏度很高,比 热导检测器的灵敏度高约103倍；能检测大多数含碳有机化合物； 死体积小,响应速度快,线性范围也宽；结构不复杂,操作简单,是目前应用最广泛的色 谱 检测器之一缺点：不能 检测永久性气体；燃烧会破坏离子原形,无法回收3电子捕获检测器ECD

6、特点：电子俘获检测器是选择性很强的、浓度型检测器?具有灵敏度高、选择性好?对电负性物质特别敏感?分析痕量电负性有机物最有效的 检测器?广泛应用于农药残留量、大 气及水质污染分析,以及生物化 学、医学、药物学和 环境监测缺点：是线性范围窄,只有103左右,且响应易受操作条件的影响,重现性较差4火焰光度检测器FPD它是一种对含磷、硫有机化合物具有高选择性和高 灵敏度的质量型检测器,检出限可 达10-12g 对 P或 10-11g对 S用于大气中痕量硫化物以及 农副产品,水中的毫微克 级有机磷和有机硫 农药残留量的测定.8、GC试验条件涉及哪些因素答：一、别离效果指标1、柱效能2、选择性3、总别离效

7、能指 标一一别离度又称为分辨率4、根本别离方程n、a、k、R之间的关系二、色谱别离操作条件的选择1、载气及流速2、固定液的配比又 称为液担比：影响CLu3、柱温的选择4、气化温度的选择5、色谱柱长和内径的选择6、进样时间和进样量的选择7、检测室温度8、样品的预处理：分解法和衍生法9、载气的流速一般 为多少柱 温的选择原那么答：一、流速大小：假设需用流速大的载气可用分子量小,扩散系数大的H2或He,减小气相传质阻力；假设需 载气流速小的载气,那么可用分子量大,扩散系数小的N2或Ar 为载气,减小分子扩散的影响U盘寸手粒,N2的最正确实用线速为1020cm/s ,H2的最正确 实用线速为1520c

8、m/s二、柱温的选择1 .在能保证R的前提下尽量使用接近或略低于 组分的平均沸点的 温度.2 .绝不能高于固定液使用温度.3 .宽沸程样品应采用程序升温10、固定液的选择及用量,组分的流出先后要 会举一反三.答：固定液用量及其配比的 选择：固定液用量太少,易存在活性中央,致使峰形拖尾；且会引起柱容量下降, 进样量减少常采用固定液和 载体总重量之比来表示,简称液载比,在 填充柱色谱中,液担比一般 为 5%25 %.固定液选择及其组分流出先后 关系：不同固定液别离图氢代青香化合锦菜时汨甲墨；如喻+CH-i 别离非 极性物质：一般选用非极性固定液 组分和固定液分子间的作用力主要是色散力 试样中各组分

9、按沸点由低到高的 顺序出峰 常用的有：角 鲨烷异三十烷、十六烷、硅 油等ii 别离中等 极性物质：一般选用中等极性固 定液组分和固定液分子 间作用力主要是色散力和 诱导力.试样中各组分按沸点由低到高的 顺序出峰iii 别离极性物质：选用极性固定液组分和固定液分子 间的作用力主要是定向 力待测试样中各组分按极性由小到大的 顺序出峰例：用极性固定液聚乙二醇PEG-600 ,分析乙醛、丙烯醛气 体混合物的情形就是 这样, 乙醛的极性比丙烯醛小,故先出峰11、如何应用GC法进行化合物的定性 鉴别和定量测定 答：详见Word版资料第四章中定性 鉴别与定量测定12、掌握内标法计算方法.2、答：内标法：选择

10、适宜的物质作为待测组分的参比物,定量加到 样品中去,根据待 测组 分和参比物在检测器上的响应值之比和参比物参加量 进行定量分析的方法.关键：选择适宜的内标物内标物的选择原那么：A、内标物必须是原样品中不存在的物 质,其性质尽量与待测组分相近同系物、异构体B、内标物不能和被 测组分起化学反响,要能完全溶于被 测样品中；C、内标物的峰尽可能接近待 测组分的峰,或位于几 个待测组分的中间,但必须和样品中的 所有峰完全别离；D、内标物的参加量 应和待测组分相近.待测组分i的量mi为：设样品的总量为m,那么待测组分i的质量分数为内标法的特点：m 无一化法的限制门即只要找 测组分能出峰,不和其他峰重 叠,

11、不管其他组分是w疝丽汽起看,都以即漆0%行定量分析定量准确,受操作 条件影响较小可局部补偿待测组分在样品前处理时的损失假设参加几种内标物,还可提升定量分析的精度内标物的选择比较困难,同时内标物称量要求准确,操作麻 烦内标标准曲线法amiAi ms从内标公式可知Wi =M100% =f-三M100%mSAS m如果每次 称取同样量m的试悻,每次参加相等量ms的内标物,那么上式中m, ms, fi'切常数,计算公式可写为：m.A 山咐例:取二甲苯生产母液散标比用叙%看丈杀鬲笄二甲苯、邻二甲苯、间二甲苯及 溶剂和少量苯甲酸,其中 苯甲酸不能出峰.以150mg壬烷作内标物,测得有关数据如下：物

12、质壬烷乙苯 对二甲苯间二甲苯邻二甲苯Ai/cm298709512080f'm1.02求:各组分的含量.0.971.000.960.98根据内标法计算公式,对于乙苯有: 同样可以计算出解：母液中苯甲酸不能出峰,所以只能用 内标法计算.由各组分的绝对校正因子计算得壬烷、 乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯的相对校正因子分 别为1.00 , 0.95 , 0.98 , 0.94 , 0.96.&b1包狱缪100%=96%11.5%,7.84%.HPLC98 15001、按功能结构高效液相色 谱仪可分为那几个大局部?答：分为五个局部：梯度淋洗系 统、高压输液泵与流量限制系 统、进样系统

13、、别离住与检测 系统.2、根据别离原理,高效液相色 谱仪的检测器分为哪几大类哪些是通用 检测器,哪些是选 择性检测器哪些是浓度型检测器,哪些是质量型检测器答：紫外检测器、荧光检测器、电导检测 器、示差 检测器选择性检测器、浓度型检测器 示差检测器、蒸发光散射检测器ELSD通用型 检测器.质量型检测器3、各种检测器的检测原理流速 对各种检测器的检测信号强度和峰面积有何影响答：1 紫外检测器选择性检测器原理：基于被分析 组分对特定波长紫外光或可 见光的选择性吸收.吸光度与试样组 分浓度之间的定量关系符合朗伯-比尔定量.(2)荧光检测器(选择性检测器)原理：化合物受到紫外光的照射后,吸收辐射能,发出

14、比吸收波长长的特征辐射,这种特征辐射光线就是荧光,测定发出的荧光能量即可定量(3)电导检测 器(选择性检测器)原理：根据某些物 质在溶液中可分生 电离从而引起溶液电导率的变化的特性进行检测.(4)示差检测器(通用型检测器)原理：示差折光 检测器是通 过连续监测参 比池和测量池中溶液的折光指 数之差来测定样品浓 度浓度型响应信号与流速无关,峰面积与流速有关(流速越快,峰宽越小,峰面积越小)响应信号与流动相中组分的浓度有关的检测器称为浓度型检测器.响应信号与耽误时间内进 入检测器中组分的量的多少有 关的检测器称为质量型检测器.质量型检测器的响应值与 流量成正比、峰面 积与流速无关.输出信号：HPL

15、C图,以时间为横 坐标,以信号强度mv为纵坐标.4、检测器的性能指 标有哪些理解各种指标的含义,比较检出限D、最小检测量Q0异同 答：衡量 检测器性能的主要指 标：灵敏度、检测限和检测器的线性范围(1 )灵敏度：单位浓度或质量的组分通过检测器时所产生的响应信号R的大小叫灵敏度.(2)检测限D &义&R某组分的峰高(mV)恰为噪音的2倍(或3倍)时,单位体积(或 时间)引入检测余同丽量.a.：K 3 Rn(3)最低检出量S=1q =D最小检测量Q0表示检测器能产出和噪音相 鉴别的信号时,进入色谱柱的最小物 质量(或浓度)对于质量型检测器:Q0 =1.065 Y1/2 D对于浓度型

16、检测器：Q0 = 1.065 Y1/2 vF D5、什么叫吸附平衡常 数,吸附平衡常 数与组分流出先后的 关系理论上组分从色谱柱中流 出曲线呈什么形状答：吸附平衡常 数： K =组?在,正相 中 的浓度 =幺一定温度下,各组分在两相前有他遍附目丁册雷柱中的移动速度不同,使得原来K仅有微小差异的各组分在经过反复屡次的分配后,产生很大的别离效果K小的组分,较早流出色谱柱K大的组分,较晚流出色谱柱理论上组分从色谱柱中流出曲 线呈正态分布.6、根据别离原理,色 谱可分为那几大类理解其别离原理.答：1、吸附色 谱法(adsorption chromatography )根据吸附剂外表对不同组分物理吸附水

17、平的强弱差 异进行别离的方法.2、分配色谱法(partition chromatography )根据不同组分在固定相中的溶解水平和在两相间分配系数的差异进行别离的方法.3、离子交 换色谱法(ion exchange chromatography)根据不同组别离子对固定相亲和力的差异进行别离的方法.4、排阻色 谱法(size exclusion chromatography ) 又称凝胶色谱法 (gel chromatography )根据不同组分的分子体 积大小的差异进行别离的方法.其中：以水溶液作流 动相的称为凝胶过滤色谱法；以有机溶 剂作流动相的称为凝胶渗透色谱法5、 亲和色谱法 (af

18、finity chromatography)利用不同组分与固定相共价 键合的高专属反响进行别离的方法7、什么叫固定相,什 么叫流动相,什么叫正相色谱,什么叫反相色谱答：试样混合物在色 谱仪中的别离是在色 谱柱中的两相之间进行的,别离过程也就是 随着试 样中各组分在色谱别离柱中的运动,组分在两相间不断重复进行着分配过程,其中的一相固 定不变,称为固定相可以是无机固体吸附 剂或有机化合物液膜,另一相是携 带混合物流 过此固定相的流体可以是 气体、液体、超临界流体,称为流动相.1正相色谱固定液 极性 > 流动相极性极性小的组分先出柱,极性大的组分后出柱,适于别离极性组分2反相色谱固定液极性 &

19、lt; 流动相极性极性大的组分先出柱,极性小的组分后出柱,适于别离非 极性组分8、常见的所谓C18柱是什么意思以C18柱的HPLC属于正相色 谱还是反相色 谱是吸附 色谱还是分配色谱固定液是什么固定液的支持载体是什么固定液与支持载体是怎 么连接的答：C18柱,即十八 烷基键合硅胶柱又称ODS柱,是最常 见的反相柱.以C18柱白HPLC属于反相色谱,是分配色谱.固定液是十八 烷基化合物,支持 载体是硅胶.将十八烷基通过化学反响键合到硅胶外表的硅羟基上.9、离子交换色谱中,固定相上的离子交 换功能基团有哪些 了解交换水平的大小.答：阳离子交换树脂 1强酸性 -S0 3H2弱酸性 COOH-P03H

20、阴离子交换树脂 1强碱性-NCH33X-N-CH32X2弱碱性Nr21NHR -&H240H10、准确理解根本术语,基线、噪音、保存值、保存体积、相对保存时间、相对保存体积、 死时间、死体积、峰高、峰宽、半峰宽、别离度、拖尾因子、理论板数、峰面积.答：详见书本P6811、为什么半峰宽不等于峰宽/2,别离度,理 论板数的计算.答：半高峰宽：峰高一半 处的色谱峰宽度,W1/2 = 2仃匹雨 =2.35g别离度：相临两组分间峰顶间距离是峰底 宽平均值的几倍衡量色 谱别离条件优劣的参数 12、按极性大小顺序,写出45种常见的HPLC流动相用溶齐1J?答：常用溶剂的极性顺序为：水极性最大、甲酰胺

21、、乙睛、甲醇、丙醇、丙 酮、四氢 吠喃、醋酸乙酯、乙醛、二氯甲烷、氯仿、环己烷、己烷、13、当流动相中含有水 时,其比例不得大于多少答：HPLC中,流动相中含水比例不得大于 95%,即有机溶 剂的比例不得低于5%.14、用C18柱的HPLC中,甲醇：水2:8、甲醇：水4:6 、甲醇：水6:4三种流动 相,哪种洗脱水平强,哪种洗脱水平弱在同一 C18色谱柱上,对于同一的组分来说,用哪 种流动相时组分的保存时间短,哪种流动相时组分的保存时间长答：C18柱,反相色 谱柱中,流动相的极性越小,组分流出速度越快,反之越慢.甲醇：水6:4 组分保存时间短的洗脱水平强；甲醇：水2:8 组分保存时间长的 洗脱

22、水平弱15、在同一 C18色谱柱上使用同一流 动相,以下几种化合物,哪个保存时间长、哪个保存时 间短哪个先出峰、哪个后峰苯甲酸、苯甲醇、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醇、甲苯、对羟基甲苯.答：在反相色 谱中,极性大的组分先流出,极性小的组分后流出；极性大小：对羟基苯甲酸 对羟基苯甲醇 >对羟基甲苯>苯甲酸 >苯甲酸 > 苯甲醇 > 甲苯保存时间逐渐增加,对羟基苯甲酸保存时间最短,先出梯度的线梯度曲线峰.16、用硅胶柱白HPLC中,二氯甲烷：甲醇2:8 、二 氯甲烷：甲醇4:6 、二氯甲烷：甲醇6:4 三种流动 相,哪种洗脱水平强、哪种洗脱水平弱在同一硅 胶柱 上,对于同

23、一组分来说,用哪种流动相时组分的保存 时 间短,用哪种流动相时组分的保存时间长答：硅胶色谱柱 正相色谱柱中流动相的极性越大,组 分流出速度越快,反之,越慢.甲醇6:4 氯甲烷：甲醇2:8极性大保存 时间短,洗脱水平强；二 氯甲烷:极性小保存时间长,洗脱水平弱;17在同一硅胶柱色谱上使用同一流 动相,以下几种成分化合物,哪个保存时间长、哪个保存 时间短哪个先出峰,哪个后出峰?苯甲酸、苯甲醇、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醇、甲苯、对羟基甲苯.答：正相色 谱中,极性小的组分先流出、极性大的组分后流出.甲苯先流出、保存 时间短；对羟基苯甲醇后流出,保存 时间长；18、如何应用HPLC法进行药物成分的定性

24、鉴别和定量测定 答：一、定性鉴别HPLC中用保存值定性的方法保存值定性的主要方法： 直接与标准物对照 某一未知峰和 标准物的保存 值完全相 同- 可能是 改变色谱柱或流动相,保存时间仍完全相同 根本是利用文献的数据进行比照和定性分析注意HPLC的柱填充技术的复杂性,定性受到限制最简单的方法：标准添加法前提：要有标准物判断的标准：参加标准样后,使未知样色谱峰增高,改变色谱条件,未知峰仍能增高二、定量分析方法：内标法、外标法、标准参加法详见Word版资料P519、常见HPLC柱的规格尺寸,流 动相的常见流速答：内径26mm,常见的有：4、6mm ; 长1550cm ,常见的有15、20、25cm常

25、见的流速：60ml/minUV可见吸收光谱法1、光谱的分区,紫外、可见、红外光的波长范围可见光区分子吸收答：通常所说的紫外可见吸收光谱是指2.8 0 0 nm 近紫外、 光谱.紫外可见光区P250 : 100200nm 远紫外区；2 0EthylparabenPropylparabenMinutes.4 0 0 n m 近紫外区； 400800nm 可见光区； 0.400.35红外光：0.75-2.5 师 近红外 ；2.550 师 中红外；5010000.,.师远红外；J0.202、分子内部的运动形式有哪些各种运动形式能级及其能级的大05小顺序0.10答：分子的 内部运动可分为：分子内价电子外

26、层电子运动、050.00分子内原子的振 动、分子饶其重心的 转动,分别对应能级：电子能级、分子振动能级、分子转动能级.分子转动能级 三 分子振动能级 三 电子能级3、可见-紫外吸收光 谱带较宽的原因答：|4 X=c/ Y频率太大,波 长越短,能量越强；频率越小,波长越长,能量越弱；电磁波的能量与频率成正比、与波长成反比.分子的“电子光谱是由许多线光谱聚集在一起的 带光谱组成的谱带,称为 带状光谱.紫外光谱曲线上的吸收峰都是 宽峰,这是由于电子跃迁与振转次能级的变化相互叠加所致.4、电子能级跃迁可同时伴有哪些能级的跃迁,基团振动能级的跃迁可同时伴有哪些的跃 迁答：电子能级跃迁可同时伴有振动能级、

27、转动能级基团振动能级的跃迁可同时伴有转动能级5、分子轨道的能量上下顺序答：成键轨道与反键轨道：b<Tt<n <兀*< b*低一高6、各类分子轨道上的电子能级跃迁的难易答：一> n一7 ?" * > n 一 77、有机化合物的可 见紫外吸收,主要依 赖于哪些轨道上的电子的跃迁答：有机化合物 结构与紫外信息的关系(1 ) 200-400nm无吸收峰.饱和化合物,单烯.(2) 270-350 nm有吸收峰(£=10-100 )醛酮n一n*跃迁产生的R 带.(3) 250-300 nm有中等强度的吸收峰(£=200-2000 ),芳环的

28、特征 吸收(具有精 细解构的B带).(4) 200-250 nm有强吸收峰( 印04),说明含有一 个共轲体系(K)带.?不饱和醛酮：K 带230 nm , R 带310-330 nm260nm,300 nm,330 nm有强吸收峰,3,4,5个双键 的共轲体系.8、红外、可见-紫外光线照射物质分子各可引起分子 哪些能级跃迁答：AE= E2 -耳=名光子= hv=AEe + AEv + AEj9、什么叫生色团什么叫助色团写出常见多的生色团、小色团及它们的电子跃迁类型.答：(1)生色团(发色团)：具有轨道的不饱和官能团称为发色团有机化合物：具有不 饱和键和未成对电子的基团具n电子和兀电子的基团产

29、生n一兀*跃迁和兀一兀*跃迁跃迁E较低例： C=C; C=O; C=N; N = N 一注：当出现几个发色团共轲,那么几个发色团所产生的吸收带将消失,代之出 现新的共 轲吸收带,其波长将比单个发色团的吸收波长长,强度也增强(2)助色团：本身无紫外吸收,但可以使生色团吸收 峰增强同时使吸收峰 长移的基团有机物：连有杂原子的基团例：OH, OR, NH2 , NR2 , 一X当这些基团单独存在时一般不吸收紫外-可见区的光辐射.但当它们与具有轨道的生 色基团相结合时,将使生色团的吸收波 长长移(红移),且使吸收强度增强(助色 团至少要 有一对与生色团电子作用的孤对电子)10、什么叫红移什么叫紫移答：

30、由于化合物 结构变化共轲、引入助色 团取代基或采用不同溶 剂后 吸收峰位置向 长波方向的移 动,叫红移长移 吸收峰位置向短波方向移 动,叫蓝移紫移,短移11、什么叫K吸收带 K吸收带有什么特点 P256 答：K带：由共轲双键的兀-兀*跃迁产生-CH = CH - nCH = CCO ? 入max >200nm smax>104? 共轲体系增长,入max T-红移,emax T? 溶剂极性T ,对于一一CH = CH-n一入max 不变对于一CH=CCO 入max T-红移12、什么叫R吸收带 R吸收带有什么特点答：R带：由含杂原子的不饱和基团的n f兀*跃迁产生 C = O; C=

31、N; N = N ? E 小,入 max250 400nm , emax<100? 溶剂极性T,入max J -蓝移短移13、什么叫E吸收带 E吸收带有什么特点答：E带：由苯环环形共轲系统的兀-兀*跃迁产生芳香族化合物的特征吸收带? E1180nm£max>104常 观察不到? E2200nm£max=7000 强吸收? 苯环有发色团取代且与苯环共轲时,E2带与K带合并一起红移长移14、什么叫B吸收带 B吸收带由什么引起有哪些特点答：B带：由兀-兀*跃迁和苯环的振动的重叠引起的产生 芳香族化合物的主要特征吸收带? 入max =254nm,宽带,具有精细结构；?

32、emax=200? 极性溶剂中,或苯环连有取代基,其精 细结构消失15、溶剂对紫外吸收光 谱有哪些影响甲醇、乙晴、乙酸、二 氯甲烷、苯的最低使用波 长极 限答：溶剂效应：对入max影响：N -兀*跃迁：溶剂极性T ,入max J蓝移兀-兀*跃迁：溶剂极性T ,入max T红移溶剂极性T,溶剂的选择一一极性；纯度高；截止波 长 < 入max苯环精细结构消失甲醇205nm、乙晴190nm、乙酸、二氯甲烷235nm、苯280nm16、Beer-Lambert定律及其 应用答：1 Lambert 定律当一束单色光通过浓度一定的溶液 时,液层厚度愈大,光 线强度减弱愈显着.2 Beer 定律 T

33、= L = KL当一束单色光通过液层厚度厂定的溶液 时,溶液的浓度愈大,光 线强度减弱愈显着.令：A = - log T , ATW；罪审 A=-logT=ELC 10应用；进行光度分析 时,试剂或溶剂有吸收,那么可由所测的总吸光度A中扣除,即 以 试剂或溶剂为空白的依据；测定多组分混合物；校正干扰.17、如何使用UV吸收光谱进行化合物的定性 鉴别在定性 鉴别试验中应注意哪些问题 答：定性鉴别的依据-吸收光谱的特征：吸收光谱的形状；吸收峰的数目；吸收峰的位置波 长；吸收峰的强度；相 应的吸光系 数； 一比较吸收光谱法根据化合物吸收光谱的形状、吸收峰的数目、强度、位置进行定性分析待测样品相同条件

34、样品谱标准物质标准谱二计算iMax的经验规律18、给你两个UV吸收光谱,让你判断这两个UV吸收光 谱是否可能来源于同一个物质要 注意仪器读数的正常误差答：不能判断,由于不同物质具有相似的谱图,所以谱图“完全一致并不是确认结构的充分 条件.当未知化合物 与化合物的紫外光 谱一致时,可以认为两者具有同样的发色基团,即 具有同样的骨架结构.19、如何利用UV吸收光 谱进行化合物的 纯度检查答：待测样品中主成分在某波 长处无吸收,而杂质有吸收,直接观察样品在该波长处的吸 收光谱即可.样品中的主成分在某波 长处与杂质 在该波长处的吸收差异较大待测主成分在某波 长处有 吸收,杂质无吸收；主成分有弱吸收,杂

35、质有强吸收可通过测定其 喊判断,假设emax 与标准小于1%可认为一致.试样主成分与杂质在某波长处均无吸收,那么不能用该法进行纯度检查检查杂质最大吸收 峰波长处的吸收强度.20、为了减少仪器读数的误差,我们在应用UV光谱法进行试样的含量测定时,应限制试样 溶液的浓度在多少为宜21、百分吸收系数与摩尔吸收系数之间如何换算答：1 摩尔吸光系数£ ：含义：指浓度为1mol/L 的溶液,在液 层厚度为1cm时的吸光度.£ > 104 ,为强吸收ivir£ 102104 ,为中强吸收&=.E：cm10£102 ,为弱吸收2比吸收系 数或称为百分吸收系

36、 数,含义：指浓度为1% w/v 的溶液,用厚度 为1cm吸收池时的吸光度例：氯霉素Mr = 323,15 的水溶液在278nm 有最大吸收.假 设用纯品配制100ml含 2.00mg 的溶液,以1.00cm 厚的吸收池在 278nm 处测得透光率 为24.3 %.求吸光度 A 和吸通cm数£、.解：A=-logT=-log0.243=0.614I R光谱分析1、红外光谱分析中常用的 红外线波长范围nm、cm . P277 答：红外光区的波长范围为0.751000 m0.752.5 m 近红外 ；2.5-50 m 中红外；50100 m 远红外;1042、波数与波长的换算关系?答:3、答:_ /一cm =红外光谱产生条件:红冰吸收走谱用麻族条件是什么?分子吸收 红外辐射的频率恰等于分子振 动频率整数倍.即vL ="中分子在振、转过程中的净偶极矩的变化不为0,即分子产生红外活性振动,且辐射与分子振动发生能量耦合.即叱04、什么叫红外活动性振动、什么叫非红外活性振动答：红外活性振动：分子振 动产生偶极矩的变化,从而产生红外吸收的性 质 红外非活性振 动：分子振 动不产生偶极矩的变化,不产生红外吸收的性 质 5、亚甲基有