格林-巴利综合征患者幽门螺杆菌抗体测定

1、    格林-巴利综合征患者幽门螺杆菌抗体测定        摘要： 目的探讨幽门螺杆菌（Hp）感染与格林-巴利综合征（GBS）发病的相关性。方法用免疫法对GBS及对照组血清、CSF进行Hp特异性IgA、IgG、IgM测定。结果 49例GBS血清IgG含量为（48.62±57.30）U/L，阳性率67.3%，对照组为（12.45±15.07）U/L，阳性率35.9%，经统计学检验，t=4.87,x2=8.55，P均<0.01；IgA分别为（8.62&

2、#177;9.19）U/L、（5.48±4.12）U/L（t=3.64,P<0.01）；IgM分别为（20.58±26.43）U/L、（13.06±17.52）U/L（t=1.83,P>0.05）。21例GBSCSFHp特异性IgG为（4.19±4.21）U/L，20例对照组为（2.21±0.34）U/L（t=5.37,P<0.01）；IgA分别为（2.89±1.21）U/L、（2.54±0.67）U/L（t=1.84,P>0.05）；IgM分别为（4.41±1.83）U/L、（3.98&#

3、177;1.02）U/L（t=1.26,P>0.05）。结论 Hp抗体水平与GBS发病呈正相关，提示Hp感染可能是GBS发病诱因之一。关键词： 格林-巴利综合征 ; 幽门螺杆菌中分类号： R745 文献标识码： A 文章编号： 1006-2963 （2000）02-083-04Detection of Antibody to Helicobacter Pylori in Patients with Guillain-Barre SyndromeZHU Yong-liangLU Xin-liangXIN Qi-junDU QinQIAN Ke-da（Gastroenterology Lab

4、oratory, The 2nd Affiliated Hospital, Medical College of Zhejiang University, Hangzhou 310009, China）ABSTRACT： ObjectiveTo investigate the relationship between infection of helicobacter pylori(Hp) and Guillain-Barre syndrome(GBS). Method An enzyme immunoassay was employed to determine the concentrat

5、ion of antibodies(IgA,IgG,IgM) in serum and CSF in patients with GBS and controls. ResultsThe concentration of serum IgG in 49 patients with GBS was (48.62±57.30) U/L(x±s), positive rate 67.3%, but in 39 controls was only (12.45 ±15.07) U/L, positive rate 35.9%(t=4.87,P<0.01); IgA

6、was(8.62±9.19) U/L, (5.48±4.12) U/L, respectively(t=3.64,P<0.01), but IgM was (20.58±26.43) U/L, (13.06±17.52) U/L, respectively (t=1.83,P>0.05). The IgG in CSF 21 patients was (4.19±4.21) U/L, and (2.21±0.34) U/L in 20 controls(t=5.37,P<0.01), however IgA was

7、(2.89±1.21) U/L, (2.54±0.67) U/L( t=1.84,P>0.05)；IgM was (4.41±1.83) U/L, (3.98±1.02) U/L(t=1.26,P>0.05). ConclusionThe concentration of Hp antibodies has positive relationship with GBS, it suggests that the infection of Hp may be of an inducing factor of GBS.Key words: hel

8、icobacter pylori; Guillain-Barre syndrome幽门螺杆菌（helicobacter pylori，Hp）感染与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的发生发展密切相关，且已被国际抗癌联盟列为I类致癌物1。近来研究表明，Hp感染还与其它疾病相关2,3。格林-巴利综合征（Guillain-Barre syndrome，GBS）是一种周围神经系统急性炎症性脱髓鞘疾病，其病因及发病机制尚未完全阐明。多数学者认为它是一种感染后自身免疫变态反应性疾病，空肠弯曲菌是引起GBS最常见的感染因素之一4,5。Hp的生物学性状与空肠弯曲菌相似，是否也是引起GBS的感染因素迄今国内外尚未见报道

9、。本研究采用酶免疫法（ELISA）测定了GBS患者和对照组血清、CSFHp特异性IgA、IgG、IgM，以探讨Hp感染与GBS之间的关系。1材料和方法1.1材料6。对照组39例（男27例，女12例），皆为献血员，年龄2450岁，平均（33.6±13.1）岁。以上血清均新鲜分离，分装后置-20 保存备用。同时收集21例GBS患者CSF（男13例，女8例），年龄2070 岁，平均（41.2±12.9）岁，对照组20例为非GBS神经科住院患者。1.2方法2SO414C尿素呼气试验和W-S银染色均阳性血清以评价方法敏感性，以上述二法均阴性同时伴快速尿素酶试验和培养均阴性的血清以评价

10、方法特异性1。以同一样本同时测定20孔评价方法批内差异，以同一样本不同时间连续测定20次评价方法批间差异。2结果2.1GBS组和对照组血清Hp特异性IgA、IgG、IgM含量和阳性率比较GBS血清Hp特异性IgA、IgG含量显著高于对照组，经t检验，t=3.64、4.87，P值均<0.01，但IgM两组间差异无统计学意义（t=1.83，P>0.05）（表1）。若以Hp感染阴性（14C尿素呼气试验、W-S银染色、快速尿素酶试验和细菌培养均阴性）血清的平均含量加2个标准差以上者作为Hp感染阳性标准。结果示GBS组Hp感染率显著高于对照组。提示Hp感染与GBS发病有关，但Hp近期感染则与

11、GBS无关。2.2GBS组和对照组脑脊液Hp特异性IgA、IgG、IgM测定 GBS组脑脊液Hp特异性IgG显著高于对照组（t=5.37，P<0.01），而IgA、IgM则两组间差异无统计学意义（t=1.84、1.26，P均>0.05）（表2）。表1GBS组和对照组血清Hp特异性IgA、IgG、IgM测定比较Table 1Comparison between IgA,IgG,IgM to Hp in serum from patients with GBS and controls (U/L, ±s)nIgAIgGIgMConcentrationPositiverate(

12、%)ConcentrationPositiverate(%)ConcentrationPositiverate(%)GBS498.62±9.19*36.78*48.62±57.30#67.3#20.58±26.436.1Control395.48±4.1212.812.45±15.0735.913.06±17.522.6* P<0.01,#P<0.01 ，P>0.05 compared with control, respectively 表 2 GBS组和对照组脑脊液Hp特异性IgA、IgG、IgM测定Table

13、2 Detection of IgA,IgG,IgM against Hp in CSF from patients with GBS and controls(U/L, ±s)nIgAIgGIgMGBS212.89±1.21*4.19±4.21#4.41±1.83Control202.54±0.672.21±0.343.98±1.02* P>0.05,P<0.01，P>0.05 compared with control, respectively2.3测定方法评价 本方法测定的敏感性为90.2%，特异性

14、93.6%，重复性100%，方法学批内差异7.6%，批间差异9.4%。采用蛋白质免疫印迹法鉴定结果表明Hp纯化抗原与空肠弯曲菌抗体无反应，提示与空肠弯曲菌无交叉抗原成分。 3讨论Hp于1983年由Marshall和Warren首次分离以来，引起了消化系学者的广泛关注7。数年的研究证实，Hp感染不仅是慢性活动性胃炎、消化性溃疡的主要病因之一，也与胃癌、胃粘膜相关淋巴组织样淋巴瘤的发病相当密切8。Hp是一种专性微需氧的革兰阴性弯曲样细菌，由于其特有的高效脲酶得以在胃粘膜粘液层中定植，分泌多种毒性成分对胃粘膜细胞造成损伤。Hp感染具有以下特点：长期性，不经抗Hp治疗感染可持续数年、数十年乃至终生。易

15、传染性，可通过口-口和粪-口传播。不易根治，用单联或二联抗生素治疗Hp的根除率约60%。研究证实，Hp可诱发机体强烈的免疫应答。局部引起粘膜大量炎症细胞浸润及免疫反应，刺激机体产生多种细胞因子如TNF、IL-1、IL-6、IL-8和热休克蛋白等，并激活补体系统，引起组织炎症反应；Hp感染患者外周血的IFN-和LAK细胞增殖与杀伤力均显著低于Hp阴性患者。近年来文献报道Hp与慢性肾功能不全、肝硬化和冠心病等亦有关9。格林-巴利综合征是临床急性迟缓性瘫痪的常见原因之一。其发病机制尚未完全明了，由于此病大多起病急骤，约半数以上患者在发病前有急性感染病史，病程呈自限性，预后良好，所以认为GBS主要与空

16、肠弯曲菌、巨细胞病毒、EB病毒、呼吸合胞病毒等感染有关。其中对空肠弯曲菌的研究较多。空肠弯曲菌可与神经组织间发生交叉免疫反应；对神经有毒素性损伤及诱导细胞免疫损伤4，5。郑锦志等发现GBS患者存在细胞免疫功能的激活10。由于Hp与空肠弯曲菌有少量交叉抗原，因此在制备Hp纯化抗原时需先用空肠弯曲菌标准株超声粉碎抗原免疫家兔获得的抗体吸收交叉抗原，然后用蛋白质印迹法检测。结果表明Hp纯化抗原与空肠弯曲菌抗体无反应性，纯化的人抗Hp抗体与空肠弯曲菌粉碎抗原亦无反应性，确保了本研究结果的准确性。通过对血清、脑脊液Hp特异性抗体的测定表明，GBS患者Hp特异性IgG、IgA的阳性率和含量均显著高于对照组

17、，提示Hp感染与GBS的发病有关。正常人群Hp感染率为50%以上1，但临床GBS发病率并不高，可能因只有某些Hp菌株与GBS发病有关，或某些Hp菌株产生的毒素可突破机体的防御机制而对神经产生毒素性损伤。Hp诱导的免疫损伤有明显的个体易感性，与致病性空肠弯曲菌可能有交叉抗原。但均需进一步研究证实。作者简介：朱永良（1969-），男，浙江海盐县人，主管检验师，在读硕士。通讯地址：浙江大学医学院附属二院消化实验室，杭州 310009。联系电话：(0571)7783566。朱永良（浙江大学医学院附属二院消化实验室，杭州310009）陆新良（浙江大学医学院附属二院消化实验室，杭州310009）忻琪君（浙

18、江大学医学院附属二院消化实验室，杭州310009）杜勤（浙江大学医学院附属二院消化实验室，杭州310009）钱可大（浙江大学医学院附属二院消化实验室，杭州310009）参考文献：1 胡伏莲，周殿元，贾博琦. 幽门螺杆菌感染的基础与临床M. 北京：中国科学技术出版社， 1997，210.2Bode G, Mauch F, Malfertheiner P, et al. The coccoid forms of Helicobacter pylori. Criteria for their viabilityJ. Epidemiol Infect, 1993,111:483-490.3Mendal

19、l MA, Goggin PM, Molineaux N, et al. Relation of Helicobacter pylori infection and coronary heart diseaseJ. Br Heart J, 1994,71:437-439.4Speed BR, Kaldor F, Cavanagh P, et al. Guillain-Barre syndrome associated with campylobacter jejuni enteritisJ. J Infect, 1984,8:85-87.5Olivia C, Constant C, Bentley AM, et al. The Guillain-Barre S