土壤有效磷测定

1、wordA 碳酸氢钠提取钼锑抗比色法方法提要 由于浸提液(0.5MNaHCO3)提高了CO32-离子的活性，使其与Ca2+形成CaCO3沉淀，从而降低了Ca2+的活性, 使一定量活性较大的Ca-P被浸出，同时也可使比较活性的FeP 和AI-P通过水解作用而浸出(由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。此外，NaHCO3碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子均能置换吸附态的磷酸盐H2PO4-。) ，从而增加了碳酸氢钠提取中性和石灰性土壤速效磷的能力。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀；浸出液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。主要

2、仪器设备1 千分之一电子天平；2 恒温水浴振荡器；3 150ml塑料瓶和50ml塑料小烧杯；4 锥形瓶(或比色管)：50mL或25mL比色管；5 紫外 分光光度计；试剂1 氢氧化钠：10%(m/V)溶液；(调节浸提剂pH至8.5)2 碳酸氢钠浸提剂c(NaHCO3)=0.50mol·L-1，pH=8.5称取42.0gNaHCO3溶于950mL水中，用10%氢氧化钠溶液调节pH至8.5(用酸度计测定)，用水稀释至1L。贮存于塑料瓶中备用。如贮存期超过20d，使用时须重新校正pH。3 酒石酸锑钾K(SbO)C4H4O6·1/2H2O：0.30%(m/V)溶液；(提供三价锑离子,

3、作用是生成的三元杂多酸比磷钼酸铵具有更强的吸光作用;同时,加快抗坏血酸的复原反响.)4 抗坏血酸(C6H8O6左旋，比旋光度+21-22°,分析纯)(复原剂, 抗坏血酸主要优点是生成的颜色稳定，干扰离子的影响较小，适用范围较广，但显色慢，需要加温。如果溶液中有一定的三价锑存在时，那么大大加快了抗坏血酸的复原反响，在室温下也能显色。5 钼锑贮备液：称取10.0g钼酸铵(NH4)6Mo7O24·4H2O溶于300mL约60水中，冷却。另取181mL浓硫酸，缓缓注入800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再参加100mL0.3%酒石酸涕钾溶液，最后用

4、水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用。(提供一定酸度和三价锑离子)6 显色剂：称取0.5g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，建议现用现配。7 磷标准贮备溶液c(P)=100g ·mL-1：称取105烘干 2h的磷酸二氢钾(优级纯)0.4390g，用水溶解后，参加5mL浓硫酸 (防长霉菌,可使溶液长期保存)，转入1L容量瓶中，用水定容。此贮备溶液在冰箱中可长期保存。8 磷标准工作溶液c(P)=5g ·mL-1：吸取5.00mL磷标准贮备液于100mL容量瓶中，加水定容。此工作溶液不宜久存。分析步骤1. 有效磷的浸提: 称取过2mm筛的风干土2.50g 置于150

5、ml塑料瓶中参加50.0ml 浸提剂恒温(25±1)振荡(180 ±20转/分)30±1min 取出干过滤于50ml塑料烧杯(弃去最初滤液)；2 .显色： 吸取滤液 10.00mL于枯燥的50mL锥形瓶或25mL比色管中参加5.00mL显色剂轻摇以除去CO2 加水定容至刻度(假设为50mL锥形瓶应加水10.00mL) 再摇匀最后显色液酸的浓度为0.45mol/L,(1/2H2SO4) 显色30min(室温高于20 )以上3.标准曲线： 分别准确吸取5g ·mL-1 P标准溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于25mL比色管(或容量瓶

6、)中参加10.0mL浸提剂参加5.0mL显色剂轻摇以除去CO2 加水定容至刻度 再摇匀 显色30min以后 于880nm波长处比色.4、比色 用1cm光径比色皿在波长880nm处，以标准系列溶液的零浓度调节仪器零点进行比色，测量吸光度。从校准曲线上查出含磷量。 数据处理 有效磷(P)，mg·kg-1=C·V·D/m式中： C从校准曲线上求得待测样品溶液中磷的含量，g ·mL-1； m风干试样质量，g； V显色液体积，25mL； D分取倍数，即试样提取液体积/显色时分取的体积，本试验为50/10；平行测定结果以算术平均值表示，保存小数点后一位。精密度 平行

7、测定结果的允许误差 测定值(P， mg·kg-1 ) 允许差P，mg·kg-1 >20 相对相差<5%由光源室，单色器、试样室、光电管暗盒，电子系数及数字显示器等组成其原理:利用分光器(将光源发出的复合光分解为单色光) 出射的单色光，通过一定厚度的比色皿，透射光由光电管接受，经电子线路放大器，由表头指示或具微机处理装置的仪器打印机得到吸光值或透光率，推算出被测成分的浓度。本卷须知1如果土壤有效磷含量较高，应吸取少量的滤液，并加浸提剂补足至10.0mL后显色，计算时按所吸取滤液的分取倍数计算。2用NaHCO3溶液浸提有效磷时，温度影响较大。应严格控制浸提温度。3土

8、样经风干和贮存后，测定的有效磷含量可能稍有改变，但一般无大影响。4由于锑磷钼杂多酸在常温2025下易被抗坏血酸复原为磷钼蓝。所以显色温度以20为宜。5操作所用的玻璃器皿，可用1+5的盐酸浸泡2h，或用不含磷酸盐的洗涤剂刷洗 6)如果用容量瓶或比色管显色，摇匀时应小心，不要溅出溶液。7)振荡后立即摇匀过滤，否那么放置时间过长,磷被再固定8比色前，为消除误差，需测得比色皿的校正值，具体方法是：将比色皿洗净后加蒸馏水，放入比色槽推入光路，读取吸光值，再以吸光度最小的比色皿作参比即调节吸光度为零，测其他的比色皿的吸光值。编上号，做好记录，作为比色皿校正值，在测定样品显色液时，哪个样品用的是哪只比色皿要

9、记录好，在计算时，要扣除校正值后再查工作曲线。每一次往比色皿中倒入显色液时，要用显色液洗二三遍。一般先测颜色浅的，倒显色液于皿中容积2/3处，外面用擦镜纸吸干并擦拭干净，比色结束后将比色皿洗净再浸入盛有纯水的烧杯中。长期不用时，洗净、淋干放回比色盒，用前再用稀酸溶液和纯水浸洗干净。比色皿用后可用温热的40-50 的2%的碳酸钠浸泡后洗净，以除去吸附的磷钼蓝显色物，必要时可用稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻后洗净。9干扰离子的消除： 主要有砷、硅、Fe3+ 硅的干扰可控制酸度抑制之。磷钼杂多酸在较高酸度下形成0.4-0.8mol·L-1,H+,而硅钼酸那么在较低酸度下生成0.1-0.4mol&

10、#183;L-1,H+。土壤中的砷含量很低，而且砷钼酸复原速度较慢，灵敏度比磷低，不致影响磷的测定结果。而Fe3+影响溶液的氧化复原势，抑制蓝色的生成。而抗坏血酸能与Fe3+络合，保持溶液的氧化复原势。10)颜色在8小时内可保持稳定B 盐酸-氟化铵钼锑抗比色法 方法提要 用酸性氟化铵提取，形成氟铝化铵和氟铁化铵络合物，少量的钙离子那么生成氟化钙沉淀，磷酸根离子那么被释放提取到溶液中。反响式为： 3NH4F+3HF+AlPO4H3PO4+NH43AlF6 3NH4F+3HF+FePO4H3PO4+NH43FeF6显色原理同碳酸氢钠浸提方法试剂1. 氟化铵-盐酸浸提剂c(NH4F)=0.03mol

11、·L-1- c(HCl)=0.025mol·L-1 称取1.11g氟化铵溶于400mL水中，参加2.1mL盐酸，用水稀释至1L。贮存于塑料瓶中备用。2. 酒石酸锑钾K(SbO)C4H4O6·1/2H2O：0.50%(m/V)溶液；3.钼锑贮备液：称取10.0g钼酸铵(NH4)6Mo7O24·4H2O溶于300mL约60水中，冷却。另取126mL浓硫酸，缓缓注入400mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再参加100mL0.5%酒石酸涕钾溶液，最后用水稀释至1L，盛于棕色瓶中备用。4. 5%硫酸溶液:吸5mL浓硫酸缓慢参加90mL

12、水中,冷却后稀释至100mL.5. 1:3氨水溶液.6.显色剂：称取1.5g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，建议现用现配。7.磷标准贮备液和标准工作溶液：同Olsen法8.二硝基酚指示剂：称0.2g2,4或2,6二硝基酚溶于100mL水中.9.硼酸溶液:3%。称取30g硼酸溶于900mL热水中,冷却后稀释至1L。(主要为了和氟离子形成络合物,防止氟对磷的测定干扰)和腐蚀玻璃仪器.络合反响为: 4F-+H3BO3+3H+ (BF4)-+3H2O分析步骤1.有效磷的提取： 称取过2mm筛的风干土5.00g 置于150ml塑料瓶中参加50.0ml 浸提剂恒温(25±1)振荡(180 ±20转/分)30±1min 干过滤于50ml塑料烧杯(弃去最初滤液)；同时做空白。2 .显色： 吸取滤液 5.0010.00mL于50mL容量瓶中参加10.0mL硼酸溶液摇匀 加水至30ml左右加 2滴二硝基酚指示剂稀酸和稀碱调节溶液刚显微黄色 加 5.00mL显色剂加水定容至刻度 再摇匀最后显色液酸的浓度为0.45mol/L,(1/2H2SO4) 显色约30min(室温高于20 )3.标曲的绘制:分别准确吸取5g ·mL-1 P标准溶液0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL于50mL容量瓶