喹诺酮类药物残留分析技术测定方法（四）

1、喹诺酮类药物残留分析技术测定方法（四） (6)自组装环荧光显微成像技术(self-ordered ring fluorescence microscopic imaging technique)自组装环(selforderedring，sor)荧光显微成像技术是通过分析物在环线上沉积后，运用倒置荧光显微镜，以电荷耦合元件摄像系统作为显微镜图像猎取技术采集图像，将图像信号转换成电信号输入计算机举行数据读取及图像处理，然后应用软件对获得图像读取相关参数举行分析。它具有背景干扰小、耗样量少、容易、迅速及对环境无污染等优点。邓凤玉等采纳自组装环荧光显微成像技术测定生物样品中的(tos)，在ph 10.

2、50的氨-氯化铵缓冲溶液和聚乙烯醇-124(pva-124)介质中，以mn2+和十六烷基三甲基溴化胺(ctmab)为敏化剂，tos在疏水性玻片表面形成自组装环，建立了检测tos的迅速办法。当点样体积为0.20l时，线性范围为4.05×10-144.28×10-13 mol/ring，lod为4.10×10-15 mol/ring；兔子灌喂tos药片后血清中tos浓度的加标回收率为90.0%105.0%，rsd为1.9%3.3%；羊组织样品中tos加标回收率在92.0%101.0%，rsd小于2.7%。dong等在疏水性载玻片上，利用sor荧光显微成像技术，以zn2

3、+和ctmab作为增敏剂，pva-124及氨-氯化铵缓冲溶液(ph10.00)为介质，建立了鸡血清、鸡肉、鸡脂中司帕沙星(spa)残留量测定办法。滴定体积为0.20l，测定范围在1.38×10-132.03×10-12 mol/ring之间(或6.90×10-8mol/l)；以或为提取剂，spa在全部添加水平的回收率均在90.74%106.61%内，rsd小于3.0%。 (7)生物传感器法(biosensor) 1)分子印迹传感器(molecularly imprinted sensor) 当模板分子(印迹分子)与聚合物单体接触时会形成多重作用点，通过聚合过程这种

4、作用就会被记忆下来，当模板分子除去后，聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴，这样的空穴将对模板分子及其类似物具有挑选识别特性。xuan-anh等建立了基于分子印迹聚合物(mip)的非竞争性荧光偏振(fp)办法来检测牛奶中的enr。fp是一种荧光标志检测技术，它把荧光物质标志在特定物质分子，使原本微弱的反应信号转化成较强的荧光信号，同时在光路的合适位置分离加上起偏器和检偏器就可测出待测物的偏振荧光强度，大大提高了办法的敏捷度和特异性。fp法不需分别游离和结合的示踪物，而且全部测定在溶液中举行，可以达到真正的平衡，因而具有所需的样品量少、敏捷度高、重复性好、操作简便等多种

5、优势。qns本身具有较强的荧光可建立非竞争的挺直fp办法，办法对enr的lod为36ng/l远低于其在牛奶中的mrl，而且对dan也有显然的交错反应。有机溶剂是常用且十分有效的样品提取及蛋白沉淀试剂，然而抗体通常难以耐受较高浓度的有机溶剂。mip是一种化学合成的识别分子，对有机溶剂有着很高的耐受力，该办法用两倍于牛奶样品体积的乙腈提取药物，再用缓冲液1倍稀释便可基本消退基质干扰，挺直举行荧光偏振检测，这解释其起码可耐受30%的乙腈。 2)表面等离子共振传感器(surface plasmon resonance sensor) 表面等离子共振(spr)技术具有敏捷度高、操作容易、能够实时监测反应

6、的动态过程，只需对样品举行容易的预处理，无需举行标志，也可以无需纯化各种生物组分，耗样量少，检测时光短，已被广泛应用于各个讨论领域。marchesini等建立了基于spr的双通道检测办法来筛选鸡肉中的qns残留。其中1号通道加入广谱性多抗可同时检测nor、cip、enr、sar和dif五种化合物，其半数抑制浓度(ic50)在210ng/l，平均回收率74%；2号通道挑选特异性多抗检测flu的ic50为2.7ng/l，平均回收率88%。同时将此办法与高解析lc-qtof/ms串联，可在筛选后准时举行质谱确证。huet等建立了鱼肉、鸡肉和鸡蛋中13种qns(nor、sar、dif、cip、pef、ofl、flu、oxo、dan、enr、mar、lom和eno)的spr残留检测办法。以nor为标准参照，在鸡肉、鸡蛋和鱼肉中的cca分离为0.13g/kg、0.29g/kg和0.30g/kg，ic50分离为1g/kg、1.5g/kg和3.1g/kg，在鸡蛋和鸡肉基质中的检测范围为0.110g/kg，在鱼肉基质中的检测范围为0.1100ug/kg。mellgren等研制了检测牛奶中enr及其代谢物cip的spr免疫传感器，其探头表面笼罩着可更换的固定有enr的传感膜，当固定enr与制备的抗体发