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文档简介
1、第一节 发酵液过滤特性的改变发酵液成分复杂:菌体,残存的固体培养基,未被微生物完全利用的糖类、无机盐、蛋白质,以及微生物的各种代谢产物。发酵液特性:1、发酵产物浓度较低,大多为1%10%,悬浮液中大部分是水;2、悬浮物颗粒小,相对密度与液相相差不大;3、固体粒子可压缩性大(细胞在很大程度上属于可压缩的粘稠物料);4、液相粘度大,大多为非牛顿型流体;5、性质不稳定,随时间变化,如易受空气氧化、微生物污染、蛋白质酶水解等作用的影响。以上使固液分离变得相当困难,应进行适当预处理才行,降低滤饼比阻,提高过滤与分离速度U×A=A2P X=APxw(vvF) Uw(vvF)A:过滤面积;P:为通
2、过滤饼和过滤介质后的压力降;U:滤液通量;W:单位滤液体积中沉积固体的干重;u:滤液的粘度;V:单位时间内累积的滤液体积。vF为沉积与过滤介质阻力相当的滤饼厚度所滤过的滤液体积x=(m-n-1ln+1t2n)(P)nP:为通过滤饼和介质后的压力降;m:单位质量干滤饼对应过滤饼的质量;l:床层厚度;n:常数,滤饼的可压缩度,不可压力n=0,高度可压n=1; n=0,x=m-1l=l/m,x下降减少床层厚度;m上升减少滤液的悬浮物; n=1,x=m-2l2t2(P)2,x下降l下降,t下降(过滤时间),P下降悬浮物,粘度下降,m上升,减少悬浮物。 一、降低液体粘度(加水、加热)对于通过一个圆形直管
3、的粘性流可采用哈根泊肃叶(Hagen-poiseuilles)议程: U=Dc2PU=dm2P 32lckbmU:流体的平均速度,为流体的粘度,P为流体流过圆管的压力降,dc和lc分别为圆管的直径与长度。dm、bm为流体流过滤床层的当量直径为长度。K,常数取决于床层结构。可见U与成反比,降低粘度可有效提高过滤速率。1、加水稀释法:(1)加大后继过程的处理任务;(2)实际效果:即若加水一倍,则稀释后液体的粘度下降50%以上才能有效提高过滤速度。2、加热:加热可降低粘度:如120Be麦芽汁40度加热到75度粘下降一半,速可加倍。如链霉素PH3.0时,加热70度,半小时,过滤速度可增大10100倍。
4、(有蛋白质凝聚,m上升)(1)加热温度控制:不影响目标产物的活性;(2)时间控制:不造成细胞溶解,胞内物处溢,使后续分离纯化复杂化。 二、调整PH(1)对于两性物质(氨基酸、蛋白质),调PH至等电点,所带净电荷为零,溶解度最小,发生等电点沉淀。(2)膜过滤中,调整PH改变易吸附分子的电荷性质,减少堵塞和污染;(3)细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个PH值下有可能凝聚成较大颗粒,有利过滤。 三、凝聚与絮凝1、凝聚(1)双电层:发酵液中胶体粒子的表面带电荷(吸附溶液中的离子,自动基因的电离)如菌体或蛋白体(生理PH值下)带负荷静电引力,吸附阳离子在界面形成双电层使胶粒之间不易凝聚,稳定分散。双电
5、层电位越高,电排反越强,胶粒稳定,分散越好,过滤越难。(2)电解质的凝聚:加入电解质异电离子作用下,双电原电位降低胶体稳定下降相互碰撞而凝聚。(3)凝聚值凝聚值:使胶粒发生凝集作用的最小电解质浓度(mmol/L)。反离子的价数越高,凝聚值就越小。A13+Fe3+H+常用的有明矾(硫酸铝)、石灰、硫酸亚铁、三氯化铁等。2、絮凝相对凝颗粒粗大;相对凝聚更为昂贵;(1)絮凝剂的絮凝作用:絮凝剂(能溶于水的高分子聚合物,相对分子质量数万1千万,长链结构)链节上含有许多活性官能团,阴离子(-)或阳电子(-NH3+)、不带电的非离子型基团通过静电引力、范 华力、氢键等吸收在胶粒表面当许多链节分别吸附在不同
6、胶粒表面上产生桥架联授形成较大絮团。(2)絮凝剂化学结构含有相当多的活性官能团,能与胶粒表面结合。长链线性结构,与较多的胶粘液表面结合。相对分子质量不能超过限度,保证其有良好的水溶性。(3)絮凝剂的分类:有机高分子聚合物:如聚丙大 类(絮团粗大、用量少、絮凝快、效好,但有毒)、聚丙烯酸类(无毒,可用于医药、食品)、聚乙烯等。无机高分子聚合物、如聚合铝盐、聚合铁盐等。天然有机高分子絮凝剂,如明胶、骨胶、壳多糖、海藻酸钠、聚糖类胶粘物。(4)影响絮凝效果的因素(确定了某种絮凝剂)添加量:试验确定最适添加量少:胶粒吸附不完全多:形成的絮团小PH值:影响絮凝剂活性官能团的电离度,进一步影响吸附强弱。另
7、外还有:搅拌转速、时间等。3、混凝混凝是包括凝聚和絮凝机理的过程。(1)单独使用絮凝剂如带负电的菌体、蛋白质+阳离子型高分子絮凝剂具有降低胶粒双电层电位,产生吸附桥架的双重作用。(2)电解质+絮凝剂在无机电解质的凝聚作用基础上,高分子絮凝剂架桥絮凝效果更好四、加入助滤剂1、助滤剂:是一种不可压缩的多孔微粒,使滤饼疏松,过滤阻力下降,滤速加快。2、使用方法:在过滤介质表面预涂助滤剂直接加入发酵液也可以以上两种并用3、助滤剂选择(1)不吸附目的产物(2)粒度与悬浮与悬浮液中固体粒子的尺寸相适应(颗粒小、用较细的助滤剂)(3)使用量适合过少:起不到有效的作用过多:浪费、助滤助成为主要的滤饼阻力,速率下降。(4)与过滤介质和过滤情况相配合。粗目滤网:防泄漏:石拦粉、纤维素、淀粉细目滤网:细硅藻土烧结成粘结材料介质:纤维素 五、加入反应剂1、目的:加入某些不影响目标产物的反应剂,可消除发酵液中的一些杂质对过滤的影响,从而提高过滤速度。2、举例:(1)加入反应剂生成不溶性沉淀助滤剂、凝固胶体等物质过滤性能上升,如在新生霉素发酵液中加入cacl2和Na3po4,
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