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文档简介

1、威格拉斯生物技术(北京有限公司 BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit产品说明:BCA(bicinchoninic acid试剂检测蛋白浓度,是目前很常用的蛋白测定方法。BCA测定方法原理与Lowry法相似,但操作更为简便。该方法还具有反应产物稳定、灵敏度高(0.5 g BSA微量测定、浓度测定的线性范围广(25 g2500 g/ml BSA微量测定、蛋白间测定变异小、对去污剂有较高的耐受性等特点,特别适合于微量测定。产品内容与储存方法:名称数量保存条件BCA Reagent A 100 ml RTBCA Reagent B 3 ml RTBSA ( 2mg/ml

2、 1ml -20°C可进行100次常规测定,500次微量测定。常温运输,室温保存。有效期12个月。操作方法:1蛋白标准品作系列浓度稀释,浓度范围可设定在25g2500 g/ml,或涵盖样品估计浓度的一定范围。稀释液可用生理盐水、PBS或0.1% SDS。测定样品也可作23个稀释浓度。用稀释液作空白对照。2根据测定数量的不同,按50/1比例混合A液和B液,配制成工作液。混合时,液体可能出现浑浊,混匀后则形成清亮浅绿色溶液。3微量测定法:z96孔板各孔中加入20 l不同浓度的蛋白标准品和待测样品,以及空白对照。每孔加入200 l工作液。置37放置30 min。z在酶标仪上测定562 nm

3、波长(或540595 nm波长下的吸光度。z根据蛋白标准品浓度和吸光度,制作蛋白浓度标准曲线。从标准曲线和样品稀释倍数计算样品的蛋白浓度。4常规测定法:z标记一系列试管,每管中加入100 l不同浓度的蛋白标准品和待测样品,以及空白对照。每管加入1 ml工作液。置37放置30 min。z在分光光度计上测定562 nm波长(或540595 nm波长下的吸光度。z根据蛋白标准品浓度和吸光度,制作蛋白浓度标准曲线。从标准曲线和样品稀释倍数计算样品的蛋白浓度。BCA蛋白浓度测定的干扰因素:BCA蛋白浓度测定的显色反应依赖于Cu离子的还原。还原剂如DTT、巯基乙醇,以及离子络合剂如EDTA、EGTA,均可干扰成色反应。电话:(0105894

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