粗糙脉胞菌顺序四分子分析ppt课件

1、实验六实验六粗糙脉胞菌顺序四分子分析粗糙脉胞菌顺序四分子分析实验目的实验目的l1.了解粗糙脉胞菌的生活周期及特性；了解粗糙脉胞菌的生活周期及特性；l2.学习粗糙脉胞菌的培育方法和杂交技术；学习粗糙脉胞菌的培育方法和杂交技术；l3.学习顺序四分子的遗传学分析方法，进展学习顺序四分子的遗传学分析方法，进展有关基因与着丝点间隔的计算和作图。有关基因与着丝点间隔的计算和作图。实验资料实验资料l1 1粗糙链孢霉野生型菌株，粗糙链孢霉野生型菌株，Lys+Lys+，分生孢，分生孢子粉红色；子粉红色；l2 2粗糙链孢霉赖氨酸缺陷型菌株，粗糙链孢霉赖氨酸缺陷型菌株，Lys-Lys-，分生孢子白色。分生孢子白色。

2、 实验原理实验原理l本实验用赖氨酸缺陷型与野生型杂交，得到的子囊本实验用赖氨酸缺陷型与野生型杂交，得到的子囊孢子分别为孢子分别为4个黑色的个黑色的+和和4个灰色的个灰色的-。l黑色孢子为野生型，赖氨酸缺陷型孢子成熟迟，在黑色孢子为野生型，赖氨酸缺陷型孢子成熟迟，在野生型孢子成熟变黑时，还未变黑，而呈浅灰色；野生型孢子成熟变黑时，还未变黑，而呈浅灰色；l根据黑色孢子和灰色孢子在子囊中的陈列顺序，可根据黑色孢子和灰色孢子在子囊中的陈列顺序，可知合子在减数分裂时，基因知合子在减数分裂时，基因Lys和着丝粒之间发生和着丝粒之间发生交换的情况，最终可有两大类型的子囊出现，即第交换的情况，最终可有两大类型

3、的子囊出现，即第一次分裂分别子囊和第二次分裂分别子囊。一次分裂分别子囊和第二次分裂分别子囊。实验原理实验原理第一次分裂分别子囊第一次分裂分别子囊第二次分裂分别子囊第二次分裂分别子囊AAaa或或aaAAAaAaaAaAAaaAaAAa实验原理实验原理l第一次分裂分别构成的子囊为非交换型子囊；第一次分裂分别构成的子囊为非交换型子囊；l第二次分裂分别构成的子囊为交换型子囊；第二次分裂分别构成的子囊为交换型子囊；l第二次分裂分别子囊的出现，是由于有关的基因和第二次分裂分别子囊的出现，是由于有关的基因和着丝粒之间发生了一次交换的结果。着丝粒之间发生了一次交换的结果。l染色体上两个基因座之间的间隔越远，那

4、么它们之染色体上两个基因座之间的间隔越远，那么它们之间发生交换的频率越高。因此，第二次减数分裂分间发生交换的频率越高。因此，第二次减数分裂分别的子囊越多，阐明基因和着丝粒间的间隔越远。别的子囊越多，阐明基因和着丝粒间的间隔越远。实验原理实验原理第二次分裂分别子囊数第二次分裂分别子囊数 1/2 1/2子囊总数子囊总数 100% 100% 着丝粒与基因间的重组率着丝粒与基因间的重组率 = =MII 1/2 MI + MII 100% 100% 重组率重组率 = =或：或：基因与着丝粒间间隔图距：基因与着丝粒间间隔图距： 重组率去掉重组率去掉% %即为图距，单位为厘摩即为图距，单位为厘摩cMcM。实

5、验步骤实验步骤l1.菌种活化菌种活化l2.杂交接种杂交接种l3.培育培育 l4.压片察看压片察看实验步骤实验步骤l4.压片察看：压片察看：l将附有子囊果的滤纸条放入将附有子囊果的滤纸条放入3%来苏尔溶液来苏尔溶液10min，杀死孢子，以防止污染实验室；，杀死孢子，以防止污染实验室；l取一载玻片，滴取一载玻片，滴12滴滴3%来苏尔溶液，然来苏尔溶液，然后用接种针挑出子囊果放在载玻片上；后用接种针挑出子囊果放在载玻片上；l盖上另一载玻片，用手指压片，将子囊果盖上另一载玻片，用手指压片，将子囊果压破；压破；l置显微镜下察看置显微镜下察看实验结果实验结果l可察看到一个子囊果中散出可察看到一个子囊果中散出3040个子囊；个子囊；l察看子囊孢子的陈列情况；察看子囊孢子的陈列情况；实验结果实验结果l察看一定数目的子囊果，记录每个杂交型察看一定数目的子囊果，记录每个杂交型完好子囊的类型，并计算出完好子囊的类型，并计算出Lys基因与着丝基因与着丝粒间的间隔。粒间的间隔。l1. 填表填表l2. 列出计算公式及结果列出计算公式及结果l3. 绘制显微镜下察看到的杂交子囊的图绘制显微镜下察看到的杂交子囊的图留意！留意！l本次实验察