医疗器械初始污染菌检验

1、4.2取样方法4.3试验方法4.3.1配制洗脱液4.3.1.1 称量4.3.1.2 溶解用电子太平准确称取 9gNaCloABCM用材料有限公司文件号：生效日期：版本号：A/0修改日期：初始污染菌检验规程页次：1/4起草人/日期审核人/日期批准人/日期分发部门品质部1、目的检测产品灭菌前实际带菌（活的微生物群）的数目。2、适用范围适用于本公司产品初始污染菌的检测。3、职责由品管部负责执行实施。4、检测程序4.1检验频次：车间生产的产品三个月做一次初始污染菌检验，至少抽取3个批次进行检测，对不同车间和材质的产品进行轮流循环抽样。标准作业规程标准要求用灭菌镣子于同一个批次三个大包装（三个以上员工的

2、产品）中至少随机抽取90g或抽取12个最小销售包装样品，1/3样品用 于检测,1/3样品用于留样，另1/3样品（可就地封存）必要时用于 复检。装入无菌的塑料袋中，立即密封好（塑料袋上应标示产 品的生产日期、定单编号、规格、生产车间、员工姓名、产品 代号）并立即送检，送检中不得打开塑料袋，三分之一用于测 试，三分之一用于留样，三分之一必要复试。样品最小包装不 应有破损，检验前不得开启。4.3.1.3洗脱液分装将已称好9gNaCl溶于1000ml蒸储水中，充分搅拌直至完全溶 解。4.3.1.4洗脱液灭菌4.3.2.2样品混匀4.3.2.3吸取样液ABCM用材料有限公司文件号：生效日期：版本号：A/

3、0修改日期：初始污染菌检验规程页次：2/4称取9gNaCl溶于1000ml蒸储水中,然后用锥形瓶分装，每瓶100ml （可以根据实验的需要分装不同体积的液体）。用牛皮纸或医用透析纸密封，放入高压蒸汽灭菌器中 121c灭菌，15分钟。4.3.2样品处理4.3.2.1 样品制备在100级净化工作台条件下用无菌方法打开用于检测的至少3个包装，从每个包装中随机取样，准确称取10g 土 1g样品.用灭菌剪刀和镣子把样品剪碎.样品剪碎后用灭菌镣子加入到100ml的洗脱溶液中，将装有样品的锥形瓶靠压在旋涡混合器上的施转垫上振荡（2800次/min ） 2min。如被检样品是吸水量较高的材料而导致不能吸出足够

4、样液时，洗脱液量可按每次 50ml,递增，直至能吸出足够测试在无菌操作台中，待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液 用灭菌移液管从锥形瓶中吸取 1ml样品的洗脱液转移到无菌 平皿。每个样品分别接种于两个平皿.4.3.2.4平板倾注法ABCM用材料有限公司文件号：生效日期：版本号：A/0修改日期：初始污染菌检验规程页次：3/44.2.3培养4.2.4菌落计数阳性组实验组4.2.5复检4.2.6结果报告将冷却到45 c左右的熔化营养琼脂培养基1520ml倾注无菌平皿内，立即旋转平皿，使样液与培养基充分混匀。每个 样品应倾注两个平皿，待琼脂凝固后，翻转平皿，使底部面 向上，平皿的菌落数即为产品灭菌前的

5、菌落数。待琼脂凝固后，翻转平皿，使底部面向上。日本、美洲、欧洲产品以及它区域产品在 30-35 C下的恒温箱内培养 3D7D后 进行菌落计数，若是培养霉菌、酵母菌则更换成沙氏琼脂培养 基或马铃薯葡萄糖琼脂（PDA至25C± 2 c培养7D,分别于 3、5、7天观察，计算平板上菌落数，如果发现菌落蔓延，以前一次的菌落计数为准。两个平板中的平均菌落数为0.1g产品灭菌前的菌落数。菌落呈片状生长的平板不宜采用；计数符合要求的平板上的菌 落。当菌落数在100以内，按实有数报告，大于100时采用二位有 效数字。如果样品菌落数超过 4.2.3.8规定应进行复检.将留存的复检样品依前法复测 2次，2次结果平均值都达到本 标准的规定，则判定被检样品合格其中有任何 1次结果平均值 超过本标准规定，则判定被检样品不合格。在对照组的对照下数菌落数，产品初始污染菌=产品灭菌前菌落计数乘以校正因子日本产品根据日本药典要求真菌w 100cfu/g,好氧性细菌w 1000cfu/g,欧洲产品根据 EN ISO11737.1-2006要求菌落总数 <100cfu/g,其它产品根据ISO11737.1-2006要求菌落总数w 100cfu/g,即为产品的实际带菌数。记录结果，出具报告。ABCM用材