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文档简介
1、微生物检验标本采集运送程序1目的规范微生物检验标本采集、运送,保证实验检测前标本质量。2范围微生物检验标本。3职责3.1 医护人员和检验人员负责指导病人如何正确留取标本。3.2 门诊抽血人员和病房护理人员负责临床标本的采集,特殊标本由临床医师采集。3.3 标本运送人员负责及时送到检验科细菌室, 急诊检验标本和值班采集的标本由临床科室 相关人员直接送到细菌室 (备注: 周一至周五 8:00AM 5:30PM、节假日 8:00AM-12:00AM 送细菌室,余下时间送门诊检验室) 。4程序4.1 采集标本前, 采样人员根据检验项目的要求, 确认采样计划并进行适当的准备工作。 包 括核对医嘱, 打印
2、条形码, 选择合适的标本容器, 粘贴条形码及指导病人做好采样前的准备 工作等。4.2 认真核对病人、标本容器和检验申请是否一致,严防差错。4.3 选择正确的解剖部位, 采用适当的技术和设备来采集标本, 注意避免自身正常菌群的污 染,各标本采集技术、设备和方法参见微生物标本采集指南。4.4 采集厌氧菌培养标本时一般情况下不要使用拭子, 最好选择活检或抽吸物; 厌氧菌培养 标本的运输应避免接触空气, 立即送检, 切不可冷藏; 厌氧标本采集与需氧标本采集均参见 微生物标本采集指南。4.5 收集足够量的标本,量少可能导致假期阴性结果。4.6 在每份标本容器上贴上条形码标识, 标识中包含有病人基本信息与
3、检验项目, 有时还需 标明标本来源、采集部位、采集时间。4.7 将标本放置于合适的密封容器中。4.8 采集样品所用材料需按照废弃物处理程序处置,参见废弃物处理程序 )。4.9 采集标本后,运送人员及时送到检验科细菌室。4.10 标本运送人员收集标本时,需核对标本数,用硬质、密闭防泄漏的二级容器将标本安 全送抵细菌室,参见微生物标本采集指南。4.11 标本送达细菌室后,运送人员需与细菌室标本接收人员对标本进行核收登记并签名。4.12 标本采集和运输中的生物安全防护参见二级生物安全防护程序 。4.13 采样人员需培训合格后方可进行采样,病人自行留取标本时,需受专业人员的指导。4.14 所有标本必须
4、记录采样时间并立即送检,一般不得超过 2 小时。4.15 组织标本如果在厌氧转动系统中存放,不能超过2024 小时。4.16 志贺菌(应立即处理) 、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌对环境温度敏感, 因此脑脊液、生殖系统、眼或内耳标本不能冷藏。4.17 标本采集后无论运送距离的远近都应按要求进行标本的包装和标识。4.18 微生物标本采集指南详见下表。微生物标本采集指南(一)标本类型采集时间温度转运报告时间(工作日)采样限制注意事项原则装置和 最小量血液骨髓1、培养瓶消毒:用 75%乙醇消毒橡胶塞 30s 2、静脉穿刺消毒: 严格按皮肤消毒步 骤操作(酒精 -碘酊 - 酒精) 3、血液培养
5、需特别 注意消毒, 因许多微 生物、尤其葡萄球菌 属通常存在皮肤表 面或近表层处, 易造 成污染 4、采血时机:在寒 战出现时或发热初 期采集血培养最佳血培养瓶有 两种规格,采 血量不一样。 成人瓶: 5 8ml/ 瓶 小儿瓶: 1 3ml/ 瓶2h 常温 禁止冷藏阴性: 5d 阳性:随时报 告危急值, 最 终报告及时 发出建议从不同 部 位各采 1 瓶,共 2 瓶同 时送检。病人信息标识不 可覆 盖血培 养瓶 的条形码; 标本采 集后立即送检, 如 不能立即送检, 应 置于室温, 禁止放 置冰箱脑脊液同血液、骨髓同血液、骨髓1h 常温 禁止冷藏阴性: 3 5d 阳性:随时报 告危急值, 最
6、终报告及时 发出无病人信息标识不 可覆 盖血培 养瓶 的条形码; 标本采 集后立即送检, 如 不能立即送检, 应 置于室温, 禁止放 置冰箱微生物标本采集指南(二)标本类型采集时间温度转动报告时间(工作日)采样限制说明原则装置和最小量脓肿伤口1、采集前用无盐水或 75%酒精清创,以去除 表面细菌。2、用无菌针穿刺法抽 吸深部脓液, 或用无菌 拭子从伤口深处采集 渗出物。无菌容器1ml常温1h阴性: 3d 阳性:随时报 告危急值, 最 终报告及时 发出1/d #组织或抽吸物标本优于拭子标本组织1、用无菌容器呈送2、小样本应滴加几滴 无菌盐水保持湿润 3、不能使组织干涸无菌容器,需要加一些盐水无呈
7、送组织的量尽 可能多, 不要呈送 表面简单摩擦的 拭子静脉导管1、用 75%酒精消毒导 管周围的皮肤 2、将导管未端约 5 移入无菌管无菌试管1/d#穿刺液、 心包液、 胸腹水、 关节液、 等1、注意彻底消毒,因 许多微生物, 尤其葡萄 球菌属通常存在皮肤 表面或近表层处, 易造 成污染 2、尽量留取多量标本同血液、骨髓无引流液1、用 75%酒精消毒导 管采集部分 2、用注射器从引流管 无菌采集 2 3ml无菌容器1ml常温2h阴性: 2d 阳性:及时发 送报告标本不能直接从 引流袋放出, 因引 流液在袋中潴留 时间太长容易孳 生细菌微生物标本采集指南(三)标本类型采集时间温度转动报告时间(工
8、作日)采样限制说明原则装置和最小量眼结膜1、用无菌盐水预 湿的拭子绕每一 个结膜取标本 2、采集完即接种 培养基无菌试管常温(需要时保温),立即送检阴性: 3d 阳性:随时报 告危急值, 最 终报告及时 发出无1、采集时,需避 免感染蔓延至眼 部临近区域 2、需标明左眼、 右眼的标本肺泡灌 洗液、气 管 抽 吸 物、痰、 等1、用温开水清洗 或漱口去除口腔 表面菌 2、指导病人从肺 深部咳出痰液, 采 集到无菌容器内无菌容器1ml2h 常温阴性: 2d 阳性:及时发 送报告1/d#对不能咳痰的病 人,应经抽吸获得 标本,最好的标本 应 10 个鳞状细 胞/LPF鼻用被无菌盐水湿 润的拭子插入鼻
9、 孔约 2 ,对鼻黏 膜用力旋转无菌试管咽1、用无菌盐水湿 润的拭子经鼻轻 轻插入鼻咽后部 2、慢慢旋转拭子 5s,吸收分泌物喉1、用压舌板压舌2、用无菌盐水湿 润的试子从咽后、 扁桃体和发炎区 采样喉拭子培养不能用于会厌发炎的病人1/d#表示一天中仅需送检 1 次,无需多次重复送检相同标本。微生物标本采集指南(四)标本 类型采集时间 温度 转动报告时间 (工作日)采样限制说明原则装置和 最小量粪便1、取有脓血、黏液部分的 粪便 1 3g 2、液体粪便取 13ml无菌容器1、住院超过 3d 或 入院诊断不是胃 肠炎的病人, 不做 常规粪便培养直肠拭子1、小心插入拭子超越肛门 括约肌, 轻轻旋转
10、拭子, 在 肛门隐窝取样 2、用于检测病原的拭子应 能见到粪便无菌试管常温2h阴性: 2d 阳性:及时 发出#1/d#褥疮溃疡1、一般不选择拭子标本2、无菌盐水清洗表面 3、如得不到活检标本或抽 吸物,则用拭子用力采集损 伤底部1、由于褥疮溃疡 拭子提供不了什 么临床信息, 一般 选择组织活检或 针头抽吸标本中 段 尿1、在未使用抗生素之前采 集标本,注意避免消毒剂污 染标本2、最好留取早晨清洁中段 尿,采集前先用中性肥皂和 水清洁外阴及尿道口周围 留取时将前段尿排去, 截留 中段尿 5 10ml 病人睡前 少饮水无菌容 器 3ml导尿1、用 75% 酒精消毒导管采 集部分2、用注射器从导尿管
11、无菌 采集 5 10ml不能直接从导尿 袋放出,因尿液在 袋中潴留时间太 长,容易孳生细菌1/d #表示一天中仅需送检 1 次,无需多次重复送检相同标本。涂 片 抗 酸 染 色痰量多为宜无菌容器无1h 出报告至少连续送 3d,每日 1 次尿(24h 尿沉淀或12h 全夜尿沉淀)10ml无菌管留取 24h尿或 12h全夜尿于洁 净容器中,必须静止 2h 后, 弃上清液,收集沉渣约 10ml 于无菌容器送检脑脊液1 2ml体液(胸腹水、 关节 液等)5 10ml胃冲洗液或灌洗液5 10ml无菌容器脓液、伤口、抽取液1 5ml无菌容器支气管刷片载玻片细菌室标本接收处理操作规程1目的规范细菌室标本接收
12、处理操作规程,保证实验室不误检、漏检。2范围适用于细菌室所有标本。3职责细菌室标本接收、处理岗位人员应遵守本程序。4程序4.1 微生物标本送至细菌室后, 接收人员与标本运送人员共同核对标本及标本信息, 并记录, 包括接收标本数、接收人与接收日期。4.2 细菌培养标本需抄写培养记录单,包括患者姓名、性别、年龄、科室、床号、 ID 号、 标本种类、检验申请条码号、接收日期,并在医院信息系统上记费,记费时只收细菌培养、 鉴定费用,药敏费用先不记,如果标本中分离到致病菌后做药敏试验时再收药敏费用。4.3 涂片染色镜检标本先编号后在记录本上登记, 内容包括姓名、 性别、 年龄、 科室、 床号、 ID 号
13、、检验申请条码号、标本种类、接收日期。5相关文件及记录表格5.1 中国合格评定国家认可委员会 .CNAS-CL31:2007 医学实验室质量和能力认可准则在临 床微生物学检验领域的应用说明 .20075.2 中国合格评定国家认可委员会 .CNAS-CL02:2008 医学实验室质量和能力认可准则 (ISO15189:2007).2008备注: 值班人员按 4.1 进行。细菌检验标本处理完后不能丢弃, 交班时需将贴有检验条形码 的原始标本与其它涂片及培养物一起交细菌室! !细菌室标本拒收程序1目的规范标本拒收程序。2范围适用于细菌室所有标本。3职责细菌室所有工作人员应遵守本程序。4程序4.1 细
14、菌室检验人员应根据各类标本的送检要求评估标本的合格性, 具体参见 标本采集运 送程序。4.2 必须严格执行标本的接收、拒收制度和标准,拒收所有可能导致错误结果的标本。4.3 下表中列举了常见微生物标本拒收原因及处理方式。拒绝原因处理方式无标识送检延迟(超过规定时间)容器不合适或标本泄漏标本运送条件不合适(例如厌氧条件送检的标本却用需氧条件送检)同一天内同一检测条件的重复标本(血除外)标本污染标本量不够1、非损伤方法获得的标本 (例如: 痰、粪便等标本), 重新送检。2、损伤方法获得的标本 (例如血、 脑脊液或组织等) , 与取样医师协商后,再处理标本。并在检验记录单 上注明问题所在,记录所采取
15、的措施。 提示送检者拒收原因,并要求重新送检,在拒收标 本记录本上登记“标本送检延迟” 。 通知送检者,并要求重新送检,在拒收标本记录本 上登记。与送检者联系,阐明检测要求,指出不符合之处, 并要求重新送检,在拒收标本记录本上登记。通知送检者,指出重复标本,在拒收标本记录本上 登记。重新采样 重新采样4.4 下表中列举了一些不适合微生物学检查的标本及替代处理方法或建议。标本类型替代方法或建议烧伤,伤口(拭子)送检深部组织标本或抽吸物结肠造口术排出物不处理褥疮(拭子)送检深部组织标本或抽吸物Foley 导管头不处理坏疽损伤(拭子)送检深部组织标本或抽吸物牙周损害(拭子)送检组织标本或抽吸物直肠周
16、围脓肿(拭子)送检组织标本或抽吸物4.5 在不合格标本处理记录表上登记相关信息,至少包括:病人信息、标本种类、标本 采集人姓名、标本采集时间、不合格原因及性状描述、识别者签名及时间。细菌检验标本处理操作规程1目的: 规范细菌检验标本处理操作规程。2适用范围: 细菌检验标本。3职责: 细菌检验人员严格执行本程序。4程序:4.1 血液标本接收标本后, 立即抄写检验记录单, 住院病人需先收取细菌培养鉴定费用。 门诊病人在 检验记录单上记录住址、联系电话等信息。将血细菌培养瓶置于全自动培养仪中培养。4.2 痰标本4.2.1 接收时检查送检标本质量,随后抄写检验记录单,住院病人需先收取细菌培养鉴定费 用
17、。门诊病人在检验记录单上记录住址、联系电话等信息。4.2.2 用接种环挑取脓性痰液后在第一区反复涂抹, 尽量将包裹在痰中的病原菌接种在平板 上,如无法用接种环挑取痰液时, 用无菌棉签挑取标本分别涂布于血琼脂平板、 巧克力琼脂 平板,麦康凯平板的第一区,然后用接种环划第二、第三区。4.3 咽拭子标本: 接收时检查送检标本质量, 随后抄写检验记录单, 住院病人需先收取细菌 培养鉴定费用。 门诊病人在检验记录单上记录住址、 联系电话等信息。 将标本涂布于血琼脂 平板、巧克力琼脂平板,麦康凯平板的第一区,然后用接种环划第二、第三区。4.4 脑脊液、 关节液、 心包穿刺液、 胸腹水等穿刺液: 床边抽取体
18、液标本 (成人瓶: 58ml; 小儿瓶: 1 3ml)注入细菌培养瓶后送实验室。接收标本后,立即抄写检验记录单,住院病 人需先收取细菌培养鉴定费用。 门诊病人在检验记录单上记录住址、 联系电话等信息。 将血 细菌培养瓶置于全自动培养仪中培养。4.5 粪便或肛拭标本: 接收时检查送检标本质量, 随后抄写检验记录单, 住院病人需先收取 细菌培养鉴定费用。 门诊病人在检验记录单上记录住址、 联系电话等信息。 立即取粪便脓血 部位标本接种血琼脂平板、麦康凯平板和SS 平板。4.6 尿标本: 接收时检查送检标本质量, 随后抄写检验记录单, 住院病人需先收取细菌培养 鉴定费用。门诊病人在检验记录单上记录住
19、址、联系电话等信息。将尿标本混匀,用10 l(可用定量加液器)定量接种环立即接种血琼脂平板、麦康凯平板、 TM 巧克力平板,分离 细菌和菌落计数。备注:值班人员执行 4.1 4.6 程序,可不抄检验纪录单和收费! !细菌检验标本接种操作规程1目的规范细菌检验标本接种操作规程,确保检验结果准确可靠。2范围: 细菌室所有标本的接种。3职责细菌检验人员严格执行本程序。4程序4.1 分区划线法4.1.1 此法多用于粪便等含菌量较多的标本。4.1.2 用接种环先将标本涂布在平板第一区并作数次划线, 再在二、三区依次用接种环划线。 每划一个区域, 应将接种环烧灼 1 次,待冷却后再划下一区域。 每一区域的
20、划线应接触上一 区域的接种线 23 次,使菌量逐渐减少,以形成单个菌落。4.2 定量接种划线法4.2.1 本法用于尿液等标本的细菌计数。4.2.2 将尿标本混匀,用 10l (可用定量加液器)定量接种环立即接种划线,不需分区。4.3 斜面接种法4.3.1 此法主要用于鉴定或保存菌种,或观察细菌的某些生化特性和动力。4.3.2 用左手握住菌种管和斜面培养管底部,右手持接种针(环) 。用右手小指与手掌、小 指与无名指分别拔出两管的棉塞,将管口通过火焰灭菌。 用接种针 (环) 伸入菌种管内挑取 移种之菌落。 伸入斜面培养管内, 先从斜面底部到顶端拖一条接种线, 再自下而上地蜿蜒划 线,或直接自下而上地蜿蜒划线。 将接种针垂直插入半固体培养基的中央, 穿刺至培养基底 部,然后沿原穿刺线退出接种针。4.4 穿刺培养法4.4.1 此法用于保存菌种,观察动力及某些生化反应。4.4.2 以接种针挑取细菌培养物, 插入半固体培养基的中央, 穿刺至培养基底部, 然后沿原 穿刺线退出接种针。4.5 液体培养基
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