显微镜物镜的五个基本参数

1、显微镜物镜的五个基本参数一、数值孔径（NA）子午光线能进入或离开纤芯（光学系统或挂光学器件）的最大圆锥的半顶角之正弦，乘以圆锥顶所在介质的折射率，数值孔径是判断 物镜性能（分辨率、焦深、亮度等）的重要 指数。数值孔径又叫镜口率，简写为NA它是由物体与物镜间媒质的折射率（n）与物镜孔径 角的一半（9 2）的正弦值的乘积，其大小由下式决定： NA=rK sin 9 12。数值孔径:N.A. = nXsin0n：样品和樹俛舸端之闾前介茄所目曹的折射率（空-山=匚油2 0 = K 515 ）门最外光拔与光轴何的與书数值孔径简写NA蔡司显微镜的数值孔径简写CF）,数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参 数，

2、是判断两者（尤其对物镜而言）性能高低（即消位置色差的能力，蔡司公司的数值孔代表 消位置色差和倍率色差的能力）的重要标志。其数值大小分别标在 物镜和聚光镜的外壳上。孔径角又称“镜口角”，是 物镜光轴上的物体点与 物镜前透镜的有效直径所形成的角 度。孔径角越大，进入 物镜的光通亮就越大，它与 物镜的有效直径成正比，与焦点的距离 成反比。显微镜观察时，若想增大 NA值，孔径角是无法增大的，唯一的办法是增大介质率 n值。基于这一原理，就产生了水浸系 物镜和油浸物镜，因介质的折射率n值大于1，NA 值就能大于1。数值孔径最大值为1.4，这个数值在理论上和技术上都达到了极限。目前， 有用折射率高的溴萘作介

3、质，溴萘的折射率为 1.66，所以NA值可大于1.4。与其他参数的关系：数值孔径是显微镜 物镜的重要参数，决定了物镜的分辨率。与物 镜的放大倍数，工作距离，景深有直接关系。一般来说，它与分辨率成正比，与放大率成 正比，焦深与数值孔径的平方成反比，NA值增大，视场宽度与工作距离都会相应的变小。容易产生的误区：数值孔径与分辨率成正比，但这并不是说在选择物镜的时候一定要选择数值孔径（NA）最大才是最好，因为 物镜还会有很多其他重要参数，比如荧光透过率、 工作距离等等，最好根据自己的实验选择。二、焦深焦深也叫景深，其定义是：指使用显微镜观察和拍摄样品表面时，从对准焦点的位置开始，改变物镜与样品表面的距

4、离时，对焦能够保持清晰的范围。肉眼的调整能力因人而异，所以焦深也会出现因人而异的情况。现在常用的是与实验结果比较一致的Berek公式。0.0 .F .=co x 2 50 tQQ(N?A. X M(Uni)皿；眼睛的分耕嗨力0.001占（13KB5的飯角为5舒M ；忌儁率（物復借率X昌镜倍率）A :光的波址（可mA A =0. 55um）士D.O.F.二0*275N.A.):，上式RMTN.A.m大焦翠腔小的特悝nM：UPLFLNW0x ,3弭 .$01 coo二、齐焦距离齐焦距离是指，对准焦点时的物镜镜体定位面到物体表面的距离。OLYMPUSS2/UIS光学系统物镜的齐焦距离为45 mm Z

5、EISS ICCS光学体统、LEICA HC光学系统的齐焦距离 也是45mm NIKON CFI 60光学系统的齐焦距离是 60mm齐焦距离示意图四、工作距离工作距离也叫物距，即指 物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。镜检时，被检物体应处在物镜的一倍至二倍焦距之间。因此，它与焦距是两个概念, 平时习惯所说的调焦，实际上是调节工作距离。在 物镜数值孔径一定的情况下，工作距离 短孔径角则大。数值孔径大的高倍 物镜，其工作距离小。五、分辨率分辨率是指在物体表面能够分解的最小间隔。数值孔径（NA）越大，分辨率越高。通常，分辨率的大小可以用下式表示。e - 0-61 x （Revleigli式）M.使用渡长（可见无徴闱人=0-55U皿计貝N