试验六淀粉含量测定

1、实验六 （红薯 / 马玲薯 / 黄地瓜等淀粉块茎类植物）中淀粉含量测定（酸水解法）综合设计（4 学时）一、实验原理1 、淀粉提取，也称为浆渣分离或分离，是淀粉加工中的关键环节，直接影响到淀粉提取率和淀粉质量。粉碎后的物料是细小的纤维，体积大于淀粉颗粒，膨胀系数也大于淀粉颗粒，比重又轻于淀粉颗粒 , 将粉碎后的物料，以水为介质，使淀粉和纤维分离开来。2、淀粉是食品中主要的组成部分，也是植物种子中重要的贮藏性多糖。淀粉跟稀硫酸在加热的条件下能够完全水解成葡萄糖、麦芽糖等还原糖。还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸及其他产物，3， 5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-

2、氨基-5 硝基水杨酸。在一定范围内， 还原糖的量与棕红色物质的深浅成正比关系，利用分光光度计，在 540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线。由于淀粉完全水解成还原糖的量是成正比的，所以，也与棕红色物质的深浅成正比关系。二、材料、仪器与试剂（一）材料：五指山红薯。（二）仪器：分光光度计722、小台秤、分析天平、烧杯（100mL） 、研钵、容量瓶（100mL） 、洗瓶、漏斗、滤纸、具塞刻度试管（15mL） 、恒温水浴、移液管（1mL, 2mL ） 。（三）试剂1 2mol/L NaOH 溶液准确称取4g NaOH 固体，溶于15 mL 蒸馏水中，并倒入50ml 容量瓶中，用蒸馏水分几次清洗烧杯

3、并将清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。2 3， 5-二硝基水杨酸试剂准确称取3, 5-二硝基水杨酸1g,溶于2mol/L NaOH 溶液20mL,加入50mL蒸储水，再加入 30g酒 石酸钾钠，待溶解后用蒸馏水定容至100mL 。盖紧瓶塞，勿让CO2 进入。若溶液浑浊，可过滤后使用。3 0.1mol/L 柠檬酸缓冲液（pH5.6）A液（0.1mol/L柠檬酸）：称取C6H8O7 ?H2O 21.01g ,用蒸储水溶解并定容至 1000mL。B液（0.1mol/L柠檬酸钠）：称取Na3c6H5O7 ?2H20 29.41g,用蒸储水溶解并定容至 1000mLA 液 110 mL 与

4、B 液 290 mL 混匀，即为0.1mol/L 柠檬酸缓冲液（pH5.6） 。4 1mg/mL 淀粉溶液称取 0.1g 淀粉溶于0.1mol/L 柠檬酸缓冲液（pH5.6）100 mL 中。5 20%硫酸用 50mL 的量筒量取50mL 的水， 倒入 100mL 烧杯中； 再用 20mL 的量筒量取12.6mL98% 的浓硫酸，沿内壁缓缓倒入烧杯内的水中，边倒边用玻璃棒搅拌。等冷至室温后，倒入100ml 容量瓶中，用蒸馏水分几次清洗烧杯并将清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。三、操作步骤a） 淀粉的制备1 .操作步骤取一定量马铃薯洗涤 一磨碎一加水纱布过滤（滤渣继续粉碎加水过滤）一

5、滤液白布过滤静置一倒掉上层液体一加水搅拌静置一布氏漏斗抽滤一烘干2 .操作要点：1）洗涤：对生产淀粉的原料进行清洗，是保证淀粉质量的基础，清洗的越干净，淀粉的质量就越好。2）磨碎：经过洗涤后，送至磨碎机处理。磨碎的目的就是破坏物料的组织结构，使微小的淀粉颗粒能够顺利地从块根中解体分离出来。尽可能的使物料的细胞破裂，释放出更多的游离淀粉颗粒。3）筛分：经过磨碎后的马铃薯糊用纱布过滤筛分，在过滤过程中要加水洗涤，滤液为淀粉乳，滤渣再进彳T 2次粉碎过滤。4）过滤后的淀粉乳放在水桶中静置数小时，倒掉上层液体，加水搅拌继续静置数小时。5）脱水干燥：淀粉清洗后，含水分很高，必须脱水，用布氏漏斗抽滤得到含

6、水分为45%的湿淀粉，把湿淀粉放入60c烘箱烘干即得淀粉成品。3 .淀粉得率计算称量干燥获得的淀粉重量，按照以下公式计算得率。淀粉得率=成品淀粉重量马铃薯重量b）淀粉含量的测定（一） 样品淀粉溶液的制备准确称取0.1g样品，溶于于100ml的容量瓶中，即配成 1mg/ml样品淀粉溶液，并在相应的容量瓶 上贴上标签。（二）淀粉标准曲线的制作取7支洁净的具塞比色管，编号，按表 1内容进行操作：表1淀粉标准曲线制作操作项目操作项目12345671mg/mL标准淀粉溶液/mL01.01.41.82.22.63.020陶酸/mL2.02.02.02.02.02.02.0蒸储水/mL4.03.02.62.

7、21.81.41混匀，置于80c水中水浴反应 34min,冷却一段时间后2mol/LNaOH 溶液 /mL1.0+21.01.01.01.01.01.03,5-二硝基水杨酸/mL4.04.04.04.04.04.04.0混匀，置沸水浴煮沸 5min,取出，冷至室温后，以 1号为参比溶液，各试管淀粉含量/mg01.01.41.82.22.63.0A540将测定结果记录于表 1中，以淀粉含量（mg）为横坐标，吸光度 A540为纵坐标，绘制标准曲线。（三）样品淀粉的测定取6支洁净的具塞比色管，编号，按表2内容进行操作。显色反应后，以0为参比溶液，于 540nm处测定吸光度 A540,将测定结果记录于

8、表 2中。操作项目操作项目0样品1mg/mL标准淀粉溶液/mL0220陶酸/mL2.02.0蒸储水/mL4.02.0混匀，置于80c水中水浴反应 34min,冷却一段时间后2mol/LNaOH 溶液 /mL1+21+23,5-二硝基水杨酸/mL4.04.0混匀，置于沸水中水浴反应5min,取出，冷至室温后，以 0号为参比溶液，于540nm处测定各试管吸光度A540根据测定的吸光度A540,在标准曲线上查出的淀粉含量（m。，按下列公式计算各种制备马铃薯淀粉的含量：制备马铃薯淀粉的含量=淀粉含量（mg /制备马铃薯淀粉（m。x 100%注意事项1 由于本实验是以酸作催化剂水解淀粉的，其水解的主要特点是非专一性，因此为了获得较高纯度的淀粉溶液，应尽量减少糖化时杂质的生成, 因此选用的大米外观要无结块，无霉变，无异味2 大米所含杂质越少越好，尤其应尽量设法除去水溶性杂质。3 在称取样品时要准确称量，以免造成实验误差。4 水解了淀粉后，要加入碳酸钠与试管内，中和硫酸，否则会影响3， 5- 二硝基水杨酸与还原糖的反应。5 由于本实验要用到浓硫酸配制成20%的硫酸，不论是98%的