磷酸缓冲液的(PH6

1、磷酸缓冲液的（ PH6.8 ）配制4.559g +500ml 蒸馏水11.908g +500 ml 蒸馏水A:磷酸二氢钾： B:磷酸氢二钠：C: Giemsa原液A+B+C=22ml+27ml+7.5ml磷酸缓冲液的（ PH7.2 ）配制A:磷酸二氢钾：1.77g +1000ml蒸馏水B:磷酸氢二钠：19.4g +1000 ml蒸馏水C 带制作法1. 用0.0175M的NaOH溶液处理半分钟后再处理1分钟，取出放在75%、75%、 95%、95%的各级酒精中漂洗1-2分钟（脱水），将玻片干燥后置于已经预热 650C 的6SSC溶液中，放在水浴箱中12-17小时，再用370C预热的蒸馏水漂洗干净

2、， 染色。试剂的配制方法1. NaOH 0.7g+蒸馏水 1000ml2. 12SSC 溶液微核率操作步骤培养 72 小时标本 收集离心 1500/分钟（ 10 分钟） 去上清 加预热的0.1MKCL（37 度）混匀，培养箱 5 分钟预固定（ 1ML） 室温 5 分钟离心-去上清，固定（5ML） 20分钟一离心，去上清，加适量的固定液、混均 制片。3ml 的蒸馏水 +3ml 的 Giemsa.McI1vaine 's 储藏液、染色液、冲洗液的配置一 目的 ：McI1vaine's 储藏液是为玻片染色准备。McI1vaine's 冲洗液是为产前染色体检查准备。 二料和试剂

3、1磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O）,分子量是328 2柠檬酸（C6H8O7）,分子量是210.143 去离子超纯水4 甲醇（ CH3OH） 三操作步骤 McI1vaine 's 储藏液 ：1. A液：0.2M的磷酸氢二钠溶液（71.6g+1000ml水）B液：0.1M的柠檬酸溶液（21.014g+1000ml水）2. 375ml 的 A 液+125ml 的 B 液3 .用1N的盐酸或1M的氢养化钠调节PH到6.84.贴上有完整信息的标签（储存要求 4度，六个月）Mcllvaine '染色缓冲液1. 2730ml 水+180ml Mcl1vaine '储藏液 +3

4、0ml 甲醇2 .用1N的盐酸或1M的氢养化钠调节PH到6.83. 贴上有完整信息的标签（储存要求 4度，六个月）Mcllvaine '冲洗缓冲液1. 2820ml 水+180mlMcI1vaine '储藏液2. 1N的盐酸或1M的氢养化钠调节 PH到6.83. 贴上有完整信息的标签（储存要求 4度，六个月）染色液配制：24ml麦氏染色缓冲液+16ml水+14ml磊氏染色储存液（1.6mg/mL）磊氏染色储存液：0.8g（磊氏染色液Sigma）+500ml（甲醇），磁力搅拌器搅拌2小时, 置于 37 度的恒温箱 72小时。pH 值； Na2HPO4 溶液（ mL）；NaH2PO4 溶液（ mL ）5.8 ；8.0 ；92.05.9 ； 10.0 ；90.06.0 ； 12.3 ；87.76.1 ；15.0 ；85.06.2 ；18.5 ；81.56.3 ； 22.5 ；77.56.4 ； 26.5 ；73.56.5 ； 31.5 ；68.56.6 ； 37.5 ；62.56.7 ；43.5 ；56.56.8 ； 49.0 ；51.06.9 ； 55.0 ；45.07.0 ；61.0 ；39.07.1 ；67.0 ；33.07.2 ；72.0 ；28.07.3 ；77.0 ；23.07.4 ；81.0 ；19.07.5 ；84.0 ；