几种药物对大肠杆菌的治疗效果e

1、几种药物对大肠杆菌的敏感性测定结果报告40 日.* * *坦贝：报告人：* 学号：*几种药物对大肠杆菌的敏感性测定摘要：大肠杆菌的抗原性复杂，毒力因子多种多样，不同血清型、不 同毒力因子菌株的宿主范围和致病性大不相同， 可在不同的动物或在 同种不同年龄的动物中引起多种多样的疾病。 通过采用不同的抗菌药 物对鸡大肠杆菌病进行治疗，结果说明，该菌对头抱曝肠、庆大霉素、 阿米卡星、氧氟沙星和卡那霉素敏感。【实验目的】通过检测抑菌圈大小测定大肠杆菌对氟苯尼考、头抱嚷味呐、硫酸新霉素可溶粉、氧氟沙星和卡那霉素几种药物的敏感程度。【实验原理】纸片法药敏试验是将抗菌药物吸收到特定的纸片中， 然后置于已接 种

2、待测定菌的固体培养基上，抗菌药物通过向培养基内的扩散， 抑制 敏感细菌的生长，从而出现抑菌环带。由于药物扩散的距离越远， 到达该距离的药物浓度越低，故可以根据抑菌环的大小，判断细菌对 药物的敏感度。通过药物敏感试验，我们可以找出针对于某些致病菌 的敏感药物，从而对临床中的细菌性疾病的治疗提供指导。【实验材料】1-药品及细菌一一氟苯尼考、头抱嚷味呐、硫酸新霉素杆菌净 、 氧氟沙星和卡那霉素等抗菌药物，生理盐水，磷酸盐缓冲溶液， MH 营养肉汤，MH培养基，麦康凯培养基，蒸储水，大肠杆菌2-器材一一纸片，试管，移液器，酒精灯，高压蒸汽锅，无菌操作 台，镣子，剪刀，锥形瓶，烘箱，培养箱，天平，玻璃棒

3、，干净毛巾报纸，炭笔，接种环，小广口瓶【实验方法及内容】1 .药敏纸片的制作1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成 6毫米直径的 圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁枯燥的小广口瓶中，瓶口以单 层牛皮纸包扎。经15-20分钟高压消毒后，放在37c温箱或烘箱中数 天，使完全枯燥。因不好取材，故扩大十倍配药。，并翻动纸片，使各纸片充分浸透 药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放 37c温箱内过夜，枯燥后即密盖，如有条件可真空枯燥。切勿受潮， 置阴暗枯燥处存放，有效期3-6个月。2 .药液的制备用于商品药的试验：按商品药的使用治疗量的比例 配制药液；如商品药百病消按其

4、说明量治疗量 0.01%饮水，可按这个 比例配制药液，可取10毫克参加10毫升的水中混匀。此稀释液即为 用于做药敏试验的药液。蛋白月东2g杭州微生物试剂牛肉膏成都长寿生物利剂Nacl 1g成都市科龙化工试剂厂200ml 按上述要求称取各种成分于三角瓶中，混合均匀，用 NaOH调PH至 7.4,调好PH后其瓶口用报纸封好，至于高压蒸汽灭菌中灭菌30min。 待冷却后，倒于无菌平板中。冷凝后放置在无菌操作台上备用。水解酪蛋白琼脂M-H琼脂杭州微生物试剂用法 称取本品36g于1000ml蒸储水中，加热溶解，经121c 15min 高压灭菌，待冷至50c左右，倾注无菌平板。此次实验只需要配置 200m

5、l,称取水解酪蛋白琼脂于三角瓶中，往 三角瓶中参加200ml蒸储水即可。放入高压蒸汽灭菌锅里灭菌 30min。 待冷却50 c左右，倾注无菌平板。4.细菌的转种、纯化、活化培养(1)在麦康凯培养基上用无菌接种环接种大肠杆菌(2)用无菌接种环将细菌接种到 MH培养基中6个，保证细菌均 匀的涂布在培养基中。注意无菌操作。(3)将培养基置于37c的恒温多f中培养24h。4.药敏片法操作方法4.1 在“超净台中，用经酒精灯火焰灭菌的接种环挑取适量 细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用 灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划 线涂菌至平皿的1/2。然后，找到

6、第二点划线至平皿的1/2,依次划线,直至细菌均匀密布于平皿。另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中 制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基 外表。要求涂布均匀致密4.2 将镣子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基外 表。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镣子轻按几下药敏片。为 了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基 上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴假设干片外周一般 可贴四片，每种药敏片的名称要记住。4.3 将平皿培养基置于37c温箱中培养24小时后，观察效果。附：1 .结果判断依据r表1药物触感实地判定标淮抑菌圈直径（塞米）触感度20以

7、上根以高顼申顼低映不敏15<010-141。以下2 .所用药品:A杆菌净泰硫酸新霉素可溶粉主要成分：硫酸新霉素生产商：四川莱邦药业用法及用量：200g兑水600kgB 头抱嚷味钠 批号061202生产商：浙江海正药业 浓度：89.6% C 卡那霉素 用法及用量：禽类10g可混饮水500-1500kgD氧氟沙星可溶粉生产商：广东大华农动物保健品动物保健厂用法及用量：禽类每1L水混饮2.5g,每日2次，连用3-5日E氟苯尼考可溶粉生产商：广东养宝生物制药用法及用量：鸡每1L水混饮100mg3 .【考前须知】培养基：应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时，厚度适宜 约5-6mm，不可太薄，

8、一般 90mm直径的培养皿，倾注培养基18-20ml为宜。培养基内应尽量防止有抗菌药物的拮抗物质，如钙、 镁离子能减低氨基糖甘类的抗菌活性，胸腺喀咤核甘和对氨苯甲酸PABA能拮抗磺胺药和TMP的活性。细菌接种量：细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌 株更可破坏药物的抗菌活性。药物浓度：药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果， 需精确配制。商品药应严格按照其推荐治疗量配制。培养时间：一般培养温度和时间为37c 8-18小时，有些抗菌药扩散 慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4c冰箱内24 小时，使抗菌药预扩散，然后再放 37c温箱中培养，可以推迟细菌 的生长。【实验进度】上午：称量和制备药液，药敏片打孔、装瓶、灭菌、枯燥，称量制 备肉汤、普通、麦康凯、MH培养基并灭菌，实验用品和器 具的灭菌处理。下午：将药液参加已枯燥的药敏小瓶，制备药敏片。倒平