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文档简介

1、.高二下册生物微生物的实验室培养期中复习要点2019一、配制时的质量控制1容器:配制和分装培养基的烧瓶、平皿或试管等器材应为中性,无酸、碱抑制物残留,平皿底部要平,以免琼脂厚薄不一,影响药敏试验结果。2成分来源:各种成分来源可靠,不含对目的菌生长有抑制的物质。特殊要求的培养基,如葡萄糖氧化发酵试验O/F试验,除参加葡萄糖外,不能含有其他糖类,指示剂不能用乙醇溶液,防止O/F试验的假阳性。培养基配制用水应是蒸馏水。3pH值调整:根据培养基的不同要求调整pH值,控制在要求范围的0.2之内。应当注意,培养基在高压灭菌后其pH值降低0.10.2,故矫正时应比实际需要pH值高0.10.2。4灭菌:根据培

2、养基所含成分及配制数量的不同,选择不同的灭菌方式,既要到达灭菌效果,又不破坏培养基成分。一般对稳定的培养基,如MH琼脂、营养琼脂可用高压灭菌,即12115min而含糖的培养基那么以108灭菌为好,以防止糖类破坏。不耐高热的物质如血清、牛乳等,可采用间隙灭菌法灭菌。5分装:根据使用的目的和要求决定分装量。分装培养基所用的平皿、试管要求清洁,不残留酸碱;制备平板培养基时,操作台要程度,以防止琼脂平板厚薄不一,同时确保无菌操作。二、配制后质量控制1培养基外观情况:包括颜色、透明度、有无沉淀和凝固。如发现培养基外表有裂纹或与培养皿的边缘别离,说明培养基有脱水现象,必须丢弃。2无菌试验:每一批配好的培养

3、基均须进展无菌试验。先灭菌后分装的培养基,可采用抽样方法试验,少于100个样本通常选取5%10%的量,假如配制大量培养基,那么任意选取10个培养基;无菌分装培养基那么需全部做无菌试验。样本在35或其他适宜的温度下隔夜培养,如培养基含有血液,那么需再置于室温1天,以检查嗜冷菌。选择性培养基因含有抑制物质,能抑制许多微生物,因此,可参加10倍量的无菌液体培养基,稀释抑制物质,以利于检出污染菌。即使做过无菌试验,接种时,也要检查每个平板上的可见菌落。3性能测试:每一批新制或新购的培养基,使用前均须取性质的库存菌种进展性能测试。培养基按目的不同可分为增菌培养基、别离培养基和鉴定培养基。增菌培养基:接种少量难以生长的细菌,在一定时间内观察增菌情况,细菌能生长的最小接种浓度越小,说明增菌培养基性能愈好。别离培养基:要求目的菌生长良好,非目的菌被抑制。一般要求生长的目的菌接种量不可过多,较好的方法是将测试菌调成0.5麦氏浊度的菌悬液,再用0.001ml的标准接种环涂划在培养基上,观察菌落生长。鉴定培养基:应选择具有典型特征的菌株作性能试验。如三糖铁琼脂,须用弗劳地枸橼酸杆菌、福氏志贺菌及铜绿假单胞菌3种菌分别接种3支培养基,

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