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1、会计学1KAI基因在人肺癌细胞株中表达水平基因在人肺癌细胞株中表达水平(shupng)及调控机制的研究及调控机制的研究第一页,共22页。二、研究二、研究(ynji)不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株中株中KAI1的的mRNA表达水平,探讨表达水平,探讨KAI1与与nm23-H1在调控肺癌转移中的相互关系在调控肺癌转移中的相互关系三、研究甲基化抑制剂三、研究甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞苷杂氮脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肺对肺癌细胞株癌细胞株L9981、GLC-82和和NCI-H460中中KAI1的的mRNA表达表达(biod)水平和体外增殖能力的影响水平和体外增殖能

2、力的影响 第1页/共21页第二页,共22页。主要主要(zhyo)材料与方法材料与方法主要实验方法:主要实验方法: 实时荧光定量实时荧光定量(dngling)PCR MTT法绘制细胞生长曲线法绘制细胞生长曲线甲基化抑制剂:甲基化抑制剂: 第2页/共21页第三页,共22页。实 验 结 果第3页/共21页第四页,共22页。1. MRC-5 , 正常人肺成纤维(xinwi)细胞株;2. L9981, 人高转移大细胞肺癌细胞株;3. NL9980,人低转移大细胞肺癌细胞株;4. L9981-nm23-H1-pEGFP,稳定转染nm23-H1的L9981细胞株;5. A549,6. GLC-82,7. A

3、2,8. SPCA-1,肺腺癌细胞株;9. NCI-H460,人大细胞肺癌细胞株;10. SH-77,11. NCI-H446,人小细胞肺癌细胞株;12. LTEP-2,肺腺癌细胞株;13. YTMLC-90,肺鳞癌细胞株; P第4页/共21页第五页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L9

4、9810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.000

5、0.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. MRC-5 , 正常人肺成纤维细胞株;2. L9981, 人高转移大细胞肺癌(fi i)细胞株;3. NL9980,人低转移大细胞肺癌(fi i)细胞株;4. L9981-nm23-H1-pEGFP,稳定转染nm23-H1的L9981细胞株;5. A549,6. GLC-82,7. A2,8. SPCA-1,肺腺癌细胞株;9. NCI-H460,人大细胞肺癌(fi i)细胞株;10. SH-7

6、7,11. NCI-H446,人小细胞肺癌(fi i)细胞株;12. LTEP-2,肺腺癌细胞株; 13. YTMLC-90,肺鳞癌细胞株; 第5页/共21页第六页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.000

7、0.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.002

8、0.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. L9981;2. NL9980;3. L9981-nm23-H1-pEGFP第6页/共21页第七页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.00

9、00.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.

10、443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.012;2. A549;3. GLC-82;4. A2;5. SPCA-1;6. NCI-H460;7. SH-77;8. NCI-H446;9. LTEP-2;10. YTMLC-90 第7页/共21页第八页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0

11、000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.00

12、00.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NL9980;2. L9981-nm23-H1-pEGFP;3. A549;4. GLC-82;5. A2;6. SPCA-1;7. NCI-H460;8. SH-77;9. NCI-H446;10. LTEP-2;11. YTMLC-90 第8页/共21页第九页,共22页。C

13、elllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.000

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15、-H460;6. SH-77;7. NCI-H446;8. LTEP-2;9. YTMLC-90 第9页/共21页第十页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800

16、.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.

17、000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.012;2. A2;3. SPCA-1;4. NCI-H460;5. SH-77;6. NCI-H446;7. LTEP-2;8. YTMLC-90 第10页/共21页第十一页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0

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19、.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. A2;2. SPCA-1;3. NCI-H460;4. SH-77;5. NCI-H446;6. LTEP-2;第11页/共21页第十二页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.

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21、.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. SPCA-1;2. NCI-H460;3. SH-77;4. NCI-H446;5. LTEP-2;第12页/共21页第十三页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTE

22、P- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-

23、820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H460;2. SH-77;3. NCI-H446;4. LTEP-2;第13页/共21页第十四页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549G L C -82A2

24、SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.11

25、10.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. SH-77;2. NCI-H446;3. LTEP-2;第14页/共21页第十五页,共22页。CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23

26、-H1A549G L C -82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000

27、A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H446;2. LTEP-2;第15页/共21页第十六页,共22页。1. Control ;2. 2mol/L 5-Aza-CdR

28、;3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsNCI-H4605-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)NCI-H4600.0010.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.005NCI-H460NCI-H460和和L9981L9981细胞株对照组与实验组间细胞株对照组与实验组间KAI1KAI1基因基因(jyn)(jyn)表达水平比较的表达水平比较的P P值表值表1. Control ;2. 2mol/L 5-Aza-CdR ;3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsL99815-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/

29、L)L99810.0000.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.016NCI-H460 cellsL9981 cells第16页/共21页第十七页,共22页。1. 对照组 ;2. 2mol/L 5-Aza-CdR ;3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsGLC-825-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)GLC-820.7241.0005-Aza-dR(2mol/L)0.724GLC-82细胞株对照组与实验组间细胞株对照组与实验组间KAI1基因表达基因表达(biod)水平比较的水平比较的P值表值表第17页/共21页第十八页,共22页。012345670.00.40.81.21.62.0A570 nm ODNCI-460 cell line t/d 对照组 实验组(5-Aza-CdR/2umol/L) 实验组(5-Aza-CdR/10umol/L)5-Aza-CdR

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