疑难血型鉴定苗老师讲解资料

1、疑难血型疑难血型(xuxng)鉴定鉴定与临床输血与临床输血第一页，共63页。红细胞血型(xuxng)ISBT分类血型系统：由单一基因位点、或两个血型系统：由单一基因位点、或两个(lin )或多或多个相邻但相互之间极少重组同源基因所编码的一个个相邻但相互之间极少重组同源基因所编码的一个或多个抗原组成。（或多个抗原组成。（30个）个）血型集合：在血清学、生物化学或遗传学上有相关血型集合：在血清学、生物化学或遗传学上有相关性、目前不能进一步证明其为一个血型系统的一组性、目前不能进一步证明其为一个血型系统的一组抗原。（抗原。（5个）个）血型系列：目前不能归类于血型系统和血型集合的血型系列：目前不能归类

2、于血型系统和血型集合的血型抗原。血型抗原。低频率抗原：抗原频率在人群中小于低频率抗原：抗原频率在人群中小于%。（。（700系列，系列，22个抗原）个抗原）高频率抗原：抗原频率在人群中大于高频率抗原：抗原频率在人群中大于99%。（。（901系列，系列，11个抗原）个抗原）第二页，共63页。血型(xuxng)系统目前为止发现30个血型系统。临床输血最重要的两个血型系统：ABO、Rh系统。临床输血技术规范第十五条 输血科（血库）要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者ABO血型（正、反定型），并常规检查患者Rh（D）血型（急诊抢救(qingji)患者紧急输血时Rh（D）检查可除外

3、），正确无误时可进行交叉配血。第三页，共63页。一、一、ABO血型血型(xuxng)ABO血型鉴定是输血前最重要的血清学检血型鉴定是输血前最重要的血清学检测，必须保证测，必须保证(bozhng)ABO血型鉴定系血型鉴定系统的安全性和敏感性。统的安全性和敏感性。应尽可能运用全自动检测系统，以减少结应尽可能运用全自动检测系统，以减少结果解释和抄录错误的风险。果解释和抄录错误的风险。第四页，共63页。ABO血型(xuxng)ABO血型定型的方法正反定型不符的原因解决(jiju)正反定型不符的程序ABO亚型ABO血型定型常见问题的解决(jiju)方法ABO血型与临床输血第五页，共63页。ABOABO血

4、型血型(xuxng)(xuxng)的分型原则的分型原则第六页，共63页。ABOABO血型血型(xuxng)(xuxng)的定型的定型第七页，共63页。ABOABO血型定型血型定型(dng xng)(dng xng)方法方法献血者：微量板法、微柱凝集法、纸片 （玻片）法、试管法。受血者：微柱凝集法、微量板法、试管法。不推荐使用纸片（玻片）法 纸片（玻片）法定型的缺点 1、必须在2-3分钟内看结果，时间略长，标本干燥， 易将红细胞聚集误判为凝集。 2、无法检出弱抗原、抗体。 3、无法观察红细胞的混合(hnh)外观现象。 4、无法观察红细胞的溶血现象。第八页，共63页。ABOABO血型检测血型检测(

5、jin c)(jin c)：正反定型不：正反定型不符符 ABO 正反定型相符：正定型反应(fnyng)强度4+；反定型反应(fnyng)强度 2+。ABO 正反定型不符的定义和范围ABO 正反定型不符（多或少抗原、抗体）。ABO 正反定型相符，但弱反应(fnyng)，正定型反应(fnyng)强度4+，反定型反应(fnyng)强度2+。ABO 正反定型相符，但反定型反应(fnyng)强度差别2+以上。第九页，共63页。正反定型不符正反定型不符(bf)(bf)的原因的原因实验技术(jsh)及管理原因生理性因素疾病影响临床治疗的影响第十页，共63页。正反定型不符：正反定型不符：1 1、实验、实验(s

6、hyn)(shyn)技技术及管理原因术及管理原因试剂质量试剂质量(zhling)问题：过期失效、被污染及使用未经确问题：过期失效、被污染及使用未经确认的试剂等。认的试剂等。仪器设备问题：设备故障及使用未经确认的设备等。仪器设备问题：设备故障及使用未经确认的设备等。试验技术人员的操作问题：技术错误、判读错误（溶血、弱试验技术人员的操作问题：技术错误、判读错误（溶血、弱凝集、混合外观）、记录错误等。凝集、混合外观）、记录错误等。标本问题：采样不规范（静脉输液处采样、非抗凝管）、标标本问题：采样不规范（静脉输液处采样、非抗凝管）、标本接收不规范（溶血、乳糜、变质标本）等。本接收不规范（溶血、乳糜、变

7、质标本）等。第十一页，共63页。正反定型正反定型(dng xng)(dng xng)不符：不符：2 2、生理性因、生理性因素素年龄：老年人（抗体减弱）、年龄：老年人（抗体减弱）、4个月前的婴儿（抗原个月前的婴儿（抗原(kngyun)或抗体不成熟）。或抗体不成熟）。ABO亚型：抗原亚型：抗原(kngyun)减弱或血清中出现意外抗减弱或血清中出现意外抗体（抗体（抗-A1、抗、抗-B）。）。意外抗体：意外抗体： 受检者血清中存在室温反应性受检者血清中存在室温反应性IgM类同种抗类同种抗体（体（MN、Lewis、P血型系统同种抗体）血型系统同种抗体） 、冷凝集素，、冷凝集素，这些意外抗体能与试剂红细胞

8、发生凝集，造成反定型异这些意外抗体能与试剂红细胞发生凝集，造成反定型异常。常。“先天性先天性”无无ABO抗体抗体前带现象前带现象第十二页，共63页。正反定型正反定型(dng xng)(dng xng)不符：生理性因素不符：生理性因素嵌合体血型（卡米拉，嵌合体血型（卡米拉，chimerism）：这种血型）：这种血型者体内有两类血型红细胞群体，正定型时可出现者体内有两类血型红细胞群体，正定型时可出现“混合外观混合外观”凝集现象。凝集现象。个体特异性：个别人血清中个体特异性：个别人血清中ABO血型物质过高，血型物质过高，可干扰正定型。可干扰正定型。红细胞多凝集现象：红细胞因遗传的表面异常，红细胞多凝

9、集现象：红细胞因遗传的表面异常，发生多凝集现象。发生多凝集现象。试剂试剂(shj)红细胞保护剂因素：患者体内可能含红细胞保护剂因素：患者体内可能含有针对试剂有针对试剂(shj)红细胞保护剂成分相应的抗体，红细胞保护剂成分相应的抗体，导致反定型发生与导致反定型发生与ABO 血型抗体无关的红细胞血型抗体无关的红细胞凝集反应。凝集反应。第十三页，共63页。正反定型不符：正反定型不符：3 3、疾病、疾病(jbng)(jbng)的影的影响响白血病或其它造血系统恶性疾病：造成白血病或其它造血系统恶性疾病：造成ABO（或（或RhD）抗原减弱甚至消失、抗原减弱甚至消失、ABO抗体抗体(kngt)减弱。减弱。低

10、丙种球蛋白血症：因免疫球蛋白水平下降而使反定型低丙种球蛋白血症：因免疫球蛋白水平下降而使反定型时不凝集或弱凝集。时不凝集或弱凝集。肝脏疾病、结核病等：导致血浆白蛋白肝脏疾病、结核病等：导致血浆白蛋白/球蛋白比例倒球蛋白比例倒置，干扰反定型。置，干扰反定型。真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤等：红细胞呈钱串状真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤等：红细胞呈钱串状干扰正定型，多发性骨髓瘤患者血浆中的干扰正定型，多发性骨髓瘤患者血浆中的M蛋白会干扰蛋白会干扰反定型。反定型。第十四页，共63页。正反定型不符：疾病正反定型不符：疾病(jbng)(jbng)的影响的影响自身抗体：自身免疫性溶血性贫血、淋巴瘤、胶原疾

11、病自身抗体：自身免疫性溶血性贫血、淋巴瘤、胶原疾病（红斑狼疮）等患者的自身抗体会干扰反定型。（红斑狼疮）等患者的自身抗体会干扰反定型。红细胞自身凝集：患者体内存在高效价冷凝集素使红细红细胞自身凝集：患者体内存在高效价冷凝集素使红细胞发生自发的凝集现象胞发生自发的凝集现象(xinxing)。感染：感染：G-菌感染可导致类菌感染可导致类B、全凝集或多凝集，干扰正、全凝集或多凝集，干扰正定型。定型。红细胞致敏：受免疫球蛋白致敏的红细胞，在含高蛋白红细胞致敏：受免疫球蛋白致敏的红细胞，在含高蛋白介质的试剂中可发生凝集。介质的试剂中可发生凝集。第十五页，共63页。正反定型正反定型(dng xng)(dn

12、g xng)不符：疾病的影响不符：疾病的影响急性大量失血：外周血网织红细胞增多，并出现有核红急性大量失血：外周血网织红细胞增多，并出现有核红细胞，使正定型减弱。细胞，使正定型减弱。血型型物质过高：某些血型型物质过高：某些(mu xi)疾病（如腹腔癌）导疾病（如腹腔癌）导致血浆中存在大量的型物质，中和抗致血浆中存在大量的型物质，中和抗-A或抗或抗-B抗体，引抗体，引起正定型为假阴性或弱阳性。起正定型为假阴性或弱阳性。第十六页，共63页。正反定型不符正反定型不符(bf)(bf)：4 4、临床治疗影、临床治疗影响响近期输血：患者近期输入异型红细胞，使正定型时显示近期输血：患者近期输入异型红细胞，使正

13、定型时显示“混合外观混合外观”现象，输入异型的血浆会干扰反定型。现象，输入异型的血浆会干扰反定型。造血干细胞移植：造血干细胞移植：ABO不同型造血干细胞移植，可影响不同型造血干细胞移植，可影响正、反定型。正、反定型。单采血浆或血浆置换治疗：血浆稀释会造成反定型减弱，单采血浆或血浆置换治疗：血浆稀释会造成反定型减弱，如果使用大量的非同型的血浆做置换治疗，标本中血浆如果使用大量的非同型的血浆做置换治疗，标本中血浆为输入的，可能为输入的，可能(knng)造成反定型异常。造成反定型异常。第十七页，共63页。正反定型不符：临床正反定型不符：临床(ln chun(ln chun) )治疗影治疗影响响免疫抑

14、制治疗：可能会导致抗体减弱。免疫抑制治疗：可能会导致抗体减弱。大量大量(dling)输液：抗体被稀释，反定型减弱。输液：抗体被稀释，反定型减弱。静脉输入高分子药物：如甘露醇、右旋糖苷、羟乙基静脉输入高分子药物：如甘露醇、右旋糖苷、羟乙基淀粉等会干扰正反定型。淀粉等会干扰正反定型。第十八页，共63页。正反定型不符结果正反定型不符结果(ji gu)(ji gu)分类：红细分类：红细胞胞ABO亚型血液病致抗原减弱血型型物质过高急性大量失血4个月内婴儿近期(jn q)输（异型）血造血干细胞移植（异型）红细胞自身凝集直抗强阳性红细胞获得性B、多凝集红细胞红细胞血型嵌合体等第十九页，共63页。正反定型不符

15、正反定型不符(bf)(bf)结果分类：血浆结果分类：血浆年龄（4个月内婴儿、老年人）。白血病、淋巴瘤及使用免疫抑制剂的患者、先天丙种球蛋白缺乏的患者、免疫缺陷的患者抗体减弱。先天无ABO抗体。前带现象。单采血浆或血浆置换治疗。大量输液。意外抗体。ABO不同型造血干细胞移植(yzh)患者。近期输入异型血浆。缗钱状红细胞非特异性凝集等。第二十页，共63页。正反定型不符正反定型不符(bf)(bf)处理的程序处理的程序排除人为因素及操作失误。查阅、询问临床资料，设计针对性试验(shyn)。选择试管法做正反定型。ABO血型鉴定的特殊技术。第二十一页，共63页。一、询问、查阅临床资料一、询问、查阅临床资料

16、(zlio)（临床输血申请单）（临床输血申请单）患者的年龄患者的临床诊断患者的近期输血(sh xu)史患者的近期用药史、治疗史患者是否进行了造血干细胞移植患者以前的血型第二十二页，共63页。二、试管二、试管(shgun)(shgun)法法 试管法定型的优点试管法定型的优点可以反复离心看结果。可以反复离心看结果。可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改变可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改变反应温度（反应温度（44、3737孵育），有利于弱抗孵育），有利于弱抗原、抗体的检出或排除冷凝集素的干扰。原、抗体的检出或排除冷凝集素的干扰。可以观察可以观察(gunch)(gunch)红细胞混合外观现象。红细胞

17、混合外观现象。可以观察可以观察(gunch)(gunch)红细胞溶血现象。红细胞溶血现象。第二十三页，共63页。试管试管(shgun)(shgun)法正反定型法正反定型第二十四页，共63页。ABOABO正定型正定型(dng xng)(dng xng)中各种试剂用中各种试剂用途途抗抗-A-A、抗、抗-B-B抗抗-AB -AB 确认弱确认弱A A、B B抗原抗原(kngyun)(kngyun)，与弱，与弱A A、B B抗抗原原(kngyun)(kngyun)亲亲 和力强和力强, ,会产生较强反应，主要用会产生较强反应，主要用 于鉴定于鉴定AxAx和和BxBx。抗抗-H -H 用于检查用于检查ABO

18、ABO亚型及孟买及类孟买型。亚型及孟买及类孟买型。抗抗-A1 -A1 用于用于A A亚型检测。亚型检测。第二十五页，共63页。ABOABO反定型反定型(dng xng)(dng xng)中各种试剂用途中各种试剂用途A1A1、B B细胞细胞O O细胞细胞 检查是否存在检查是否存在ABOABO系统以外室温反应性系统以外室温反应性 抗体干扰抗体干扰ABOABO反定型。反定型。自身自身(zshn)(zshn)对照对照 用于确认正反定型结果的有效用于确认正反定型结果的有效性性, ,排排 除自身除自身(zshn)(zshn)抗体对定型的干扰抗体对定型的干扰( (如冷如冷凝集等凝集等) )。A2A2细胞细胞

19、 用于用于A A亚型的鉴定（亚型的鉴定（A A亚型产生抗亚型产生抗-A1-A1抗抗 体）。体）。第二十六页，共63页。三、三、ABOABO血型鉴定血型鉴定(jindng)(jindng)的特殊技的特殊技术术吸收放散试验唾液型物质检测(jin c)毛细管离心分离自身和输入红细胞DTT处理自身凝集红细胞分子生物学检测(jin c)（血型基因）第二十七页，共63页。吸收放散吸收放散(fngsn)试验试验 表达弱A和弱B抗原的红细胞与相应抗体反应不出现凝集现象，但可以吸收相应的抗体，并且可以将其放散出来，通过检测放散出来的抗体，可以证明弱A或弱B抗原的存在。吸收用RBC：盐水洗涤3次的待检压积RBC

20、1ml。吸收用的标准血清：人源或可用于吸收放散的单克隆抗-A、抗-B 。将压积RBC和标清按等体积比例混合，在4孵育至少1小时，期间每隔15分钟混匀一次。用冷盐水洗涤孵育后的细胞4-6次，得到压积RBC，加入(jir)等量盐水。56水浴震荡10分钟，离心获得上清即为放散液。用标准试剂红细胞检测放散液。第二十八页，共63页。唾液唾液(tuy)型物质检测型物质检测 大约78%的个体具有Se基因，它控制着产生水溶性的ABH抗原的分泌。通过检测(jin c)分泌型人唾液中的ABH物质可作血型鉴定。 用于：ABO亚型、近期输血史等型物质准备：1-2ml唾液，沸水煮10分钟，离心后得到的上清。标清的修正：

21、标清用盐水稀释至与相应红细胞产生4+的最高稀释度。中和：将上清与修正的标清等体积混合,室温放置30分钟。检测(jin c)：用Ac检测(jin c)中和后的抗-A, Bc检测(jin c)中和后的抗-B，Oc检测(jin c)中和后的抗-H。结果判断：通过ABH抗血清的抑制试验证明ABH抗原存在于唾液中。第二十九页，共63页。毛细管离心分离自身毛细管离心分离自身(zshn)(zshn)和输入红和输入红细胞细胞 新生成的自体红细胞比输入的旧红细胞密度(md)小，可以通过离心方法与输入的红细胞分离开。用盐水洗涤红细胞3次，在保留白膜层的情况下尽可能去掉上清，混匀。在微量红细胞比积管中加入洗涤红细胞

22、，封死管底。用专用离心机离心15min。在距红细胞柱顶上5mm处切开微量红细胞比积管，用注射器将管中的红细胞冲到试管中。将分离出的红细胞洗涤，用盐水配成2-4%红细胞悬液备用。第三十页，共63页。巯基试剂消除巯基试剂消除(xioch)(xioch)自身凝集红细自身凝集红细胞胞巯基试剂：DTT、2-Me巯基试剂可以裂解(li ji)IgM抗体单体间的二硫键，用以消除冷自身抗体造成的红细胞的自发凝集，为血型检测提供不凝集的红细胞。用盐水洗涤红细胞3遍并配成50%的悬液，加入等量的0.01M的DTT，37孵育30分钟，将细胞洗涤3遍后配成2-4%的悬液备用。第三十一页，共63页。第三十二页，共63页

23、。分子生物学检测分子生物学检测(jin c)(jin c)血型血型应用试剂盒通过(tnggu)PCR-SSP方法检测ABO单体型。通过(tnggu)测序参照已知单体型进行分析。第三十三页，共63页。ABOABO亚型亚型ABO亚型是指在常见的A、B、AB、O 4种血型之下进一步细分的ABO血型。亚型必须具有遗传基础，有明确的血清学特点。因年龄、疾病等不可遗传的因素(yn s)造成的血型改变不是亚型。虽然有基因改变，但不影响血清学特点的ABO血型不是亚型。第三十四页，共63页。ABOABO亚型亚型A亚型：A2、A3、Aint、Ax、Am、Ay、Aend、Ael 等。B亚型：B3、Bx、Bm、Ben

24、d、Bel 等。A亚B 、AB亚 Aw、BwB（A）、A（B）cisAB 孟买(mn mi)、类孟买(mn mi)（Hh血型系统）第三十五页，共63页。ABOABO亚型亚型ABO亚型的发现亚型的发现正反定型不符正反定型不符(bf) 成人、未患使抗原、抗体减弱的疾病成人、未患使抗原、抗体减弱的疾病正定凝集强度应正定凝集强度应 4+，反定凝集强度，反定凝集强度 2+。正定凝集强度弱于正定凝集强度弱于4+提示可能是亚型。提示可能是亚型。 注意：凝集强度和凝集状态（正常凝集、混合注意：凝集强度和凝集状态（正常凝集、混合 外观）外观）反定凝集强度反定凝集强度2+，或仅存在冷反应性不规则抗，或仅存在冷反应

25、性不规则抗-A、抗、抗-B提示可能是亚型。提示可能是亚型。 注意：靠反定预测亚型不如正定可靠注意：靠反定预测亚型不如正定可靠 ！第三十六页，共63页。举例(j l)第三十七页，共63页。ABOABO定型常见问题的解决定型常见问题的解决(jiju)(jiju)方法方法 ABO ABO亚型亚型正定：抗正定：抗-A-A、抗、抗-B-B、抗、抗-AB-AB、抗、抗-A1-A1、抗、抗-H-H反定：反定：A1cA1c、A2cA2c、BcBc、OcOc、自身对照、自身对照吸收放散试验吸收放散试验(shyn)(shyn)唾液型物质检测唾液型物质检测血型基因检测血型基因检测有条件者可作家系调查有条件者可作家系

26、调查第三十八页，共63页。ABOABO定型定型(dng xng)(dng xng)常见问题的解决方法常见问题的解决方法 A A、B B抗原抗原(kngyun)(kngyun)减弱减弱延长反应时间、延长反应时间、44孵育孵育吸收放散吸收放散唾液型物质检测唾液型物质检测既往血型调查既往血型调查血型基因检测血型基因检测临床追踪：一般病情缓解后血型抗原临床追踪：一般病情缓解后血型抗原(kngyun)(kngyun)恢复恢复第三十九页，共63页。ABOABO定型常见问题的解决定型常见问题的解决(jiju)(jiju)方法方法 抗体减弱抗体减弱延长反应时间、延长反应时间、4孵育孵育酶处理试剂红细胞酶处理试

27、剂红细胞既往既往(j wn)血型调查血型调查第四十页，共63页。ABOABO定型常见问题的解决定型常见问题的解决(jiju)(jiju)方法方法 冷自身抗体冷自身抗体用用3737温盐水洗涤红细胞、温盐水洗涤红细胞、4545热放散热放散3 3分钟。分钟。巯基试剂巯基试剂(DTT)(DTT)处理红细胞。处理红细胞。将血浆和红细胞分别在将血浆和红细胞分别在3737孵育孵育(f y)(f y)后后再混合。再混合。自身吸收、自身吸收、O O型红细胞吸收、兔红细胞基质吸型红细胞吸收、兔红细胞基质吸收去除血清中的冷自身抗体。收去除血清中的冷自身抗体。第四十一页，共63页。ABOABO定型常见问题的解决定型常

28、见问题的解决(jiju)(jiju)方法方法 室温反应的同种室温反应的同种(tn(tn zhn zhn) )抗体抗体用谱细胞做抗体鉴定。用谱细胞做抗体鉴定。选择没有相应抗原的选择没有相应抗原的A A、B B细胞做反定型。细胞做反定型。常见抗体：常见抗体：MNMN、LewisLewis、P P血型系统抗体。血型系统抗体。第四十二页，共63页。ABOABO定型常见问题的解决定型常见问题的解决(jiju)(jiju)方法方法混合视野凝集混合视野凝集(nngj)(nngj)ABOABO亚型。亚型。血液病致抗原减弱。血液病致抗原减弱。ABOABO不同型输血（非不同型输血（非O O型人近期输入型人近期输入

29、O O型血型血) )：询问近期输血史、毛细管离心分离自身红询问近期输血史、毛细管离心分离自身红细胞等。细胞等。ABOABO不同型干细胞移植。不同型干细胞移植。嵌合体血型嵌合体血型第四十三页，共63页。ABOABO定型常见问题的解决定型常见问题的解决(jiju)(jiju)方法方法缗钱状凝集：盐水替代缗钱状凝集：盐水替代(tdi)试验试验前带现象：稀释血清前带现象：稀释血清抗体包被红细胞：放散试验抗体包被红细胞：放散试验 （磷酸氯喹放散法）（磷酸氯喹放散法）第四十四页，共63页。ABOABO血型与临床血型与临床(ln chun(ln chun) )输血输血红细胞红细胞血浆血浆(xujing)血小

30、板血小板第四十五页，共63页。ABOABO血型血型(xuxng)(xuxng)与红细胞输注与红细胞输注成分成分(chng fn)输血指南要求：输血指南要求： 红细胞悬液、少白红细胞、洗涤红细胞、红细胞悬液、少白红细胞、洗涤红细胞、浓缩红细胞、冰冻红细胞要浓缩红细胞、冰冻红细胞要ABO、RhD同同型、交叉配血相合。型、交叉配血相合。第四十六页，共63页。ABOABO血型血型(xuxng)(xuxng)与血浆输注与血浆输注成分成分(chng fn)输血指南要求：输血指南要求： 新鲜冰冻血浆（新鲜冰冻血浆（FFP）、普通冰冻血浆）、普通冰冻血浆（FP）、新鲜液体血浆（）、新鲜液体血浆（FLP）要求与

31、受血）要求与受血者者ABO血型相同或相容。血型相同或相容。第四十七页，共63页。ABOABO血型血型(xuxng)(xuxng)与血小板输注与血小板输注成分输血指南成分输血指南(zhnn)、临床输血技、临床输血技术规范要求：术规范要求：手工分离浓缩血小板：手工分离浓缩血小板：ABO、RhD同型、交同型、交叉配血试验相合。叉配血试验相合。机器单采浓缩血小板：机器单采浓缩血小板：ABO血型同型输注。血型同型输注。第四十八页，共63页。ABOABO血型血型(xuxng)(xuxng)相容性输血相容性输血患者血型(xuxng) 相合的红细胞相合的血浆相合全血 ， ， ， ， ， ，患者的ABO血型(x

32、uxng)无法确定而急需输血，选择O型洗涤红细胞与AB型血浆、血小板输注。ABO亚型：O型洗涤红细胞；A、B、AB亚型分别输用A、B、AB血浆和血小板。第四十九页，共63页。二、二、RhD血型血型(xuxng)RhD阳性(yngxng)：红细胞上有D抗原RhD阴性：红细胞上无D抗原第五十页，共63页。RhD RhD 抗原抗原(kngyun)(kngyun)分类分类D D抗原的分类：根据抗原的分类：根据D D抗原的数量和质量不同，将抗原的数量和质量不同，将D D抗抗 原分为以下原分为以下3 3类：类：正常的正常的D D：与：与IgMIgM抗抗-D3+ -D3+ 反应强度。反应强度。D D变异型：

33、与变异型：与IgMIgM抗抗-D-D弱反应或阴性，需弱反应或阴性，需IgGIgG抗抗-D IAT-D IAT 才能检出。才能检出。1 1、弱、弱D D（weak Dweak D）：只是）：只是D D抗原量少，抗原表位无变抗原量少，抗原表位无变化。过去称为化。过去称为DuDu，现已不用。，现已不用。2 2、表位不完全型、表位不完全型D D（partialpartial）：抗原数目基本）：抗原数目基本正常，但缺失正常，但缺失(qu sh)(qu sh)正常抗原上部分抗原正常抗原上部分抗原表位。表位。3 3、表位不完全型弱、表位不完全型弱D D：缺失：缺失(qu sh)(qu sh)部分抗原部分抗原

34、表位同时抗原数目也减少。表位同时抗原数目也减少。DELDEL型：只有吸收放散才能检出型：只有吸收放散才能检出D D。第五十一页，共63页。D D变异型变异型第五十二页，共63页。RhD RhD 血型血型(xuxng)(xuxng)检测检测微柱凝集(nngj)法微量板法试管法玻片或纸片法（不推荐）第五十三页，共63页。变异型受血者变异型受血者 变异型受血者应当做变异型受血者应当做hDhD阴性阴性以往观点认为弱以往观点认为弱D D患者患者(hunzh)(hunzh)不产生不产生抗抗-D-D，可以被视为，可以被视为D D阳性，而部分阳性，而部分D D能产能产生针对其表位缺失的抗生针对其表位缺失的抗-

35、D-D而被视为而被视为D D阴性。阴性。现在分子生物学和越来越多的单克隆抗现在分子生物学和越来越多的单克隆抗体检测证据表明并不一定是这样的情况，体检测证据表明并不一定是这样的情况，一些人归类为弱一些人归类为弱D D但产生抗但产生抗-D-D。弱。弱D D与部与部分分D D之间的区别不再是简单的区分。之间的区别不再是简单的区分。D D变异型受血者都当作变异型受血者都当作RhDRhD阴性，并输注阴性，并输注RhDRhD阴性血。阴性血。第五十四页，共63页。受血者受血者RhDRhD定型定型(dng xng)(dng xng)使用IgM单克隆抗-D试剂。以输血为目的常规检测没有必要使用IgM+IgG单克

36、隆抗-D试剂检测弱D、部分D及对D阴性的标本进行确认试验(shyn)，否则有不必要的风险。第五十五页，共63页。变异型献血者变异型献血者 变异型献血者应当变异型献血者应当(yngdng)(yngdng)作为作为hDhD阳性阳性D D变异型红细胞有免疫原性，若将之输给变异型红细胞有免疫原性，若将之输给RhDRhD阴性受血者，阴性受血者，有可能免疫受血者，使之产生抗有可能免疫受血者，使之产生抗-D-D。D D变异型红细胞输入已有抗变异型红细胞输入已有抗-D-D的受血者，输入红细胞会被的受血者，输入红细胞会被加速破坏，从而引起溶血性输血反应加速破坏，从而引起溶血性输血反应对于对于IgMIgM抗抗-D

37、-D初筛为阴性的献血者，要用初筛为阴性的献血者，要用IgGIgG抗抗-D-D试剂用试剂用间接抗人球法进行间接抗人球法进行RhDRhD阴性确认。阴性确认。第五十六页，共63页。RhD RhD 血型检测可能血型检测可能(knng)(knng)出现的问出现的问题题患者红细胞与患者红细胞与IgM抗抗-D反应强度反应强度2+D变异型变异型血液病致血液病致D抗原减弱：既往血型记录、血型基抗原减弱：既往血型记录、血型基因检测因检测自身凝集自身凝集(nngj)红细胞：红细胞：DTT处理红细胞处理红细胞直接抗人球蛋白阳性红细胞：氯喹放散试验直接抗人球蛋白阳性红细胞：氯喹放散试验抗抗-D引起的新生儿溶血病引起的新生儿溶血病第五十七页，共63页。RhDRhD阴性患者阴性患者(hunzh)(hunzh)的输血的输血临床输血技术规范第十条临床输血技术规范第十条