酸碱处理去除血液制品中热原工艺的探索

1、    酸碱处理去除血液制品中热原工艺的探索    闵朝【摘 要】酸碱去除血液制品中热原的工艺，操作方便、简单，一直在血液制品领域广泛使用。可以说，处理血液制品中热原是一个非常重要且复杂的问题。多年来，很多单位都在利用各种方法对热原进行处理，都在积极探索酸碱处理去除血液制品中热原的工艺，通过调整高热原制品的ph、离子强度、蛋白浓度等参数，来实现在不同的温度条件下来观察热原的种种变化。通过研究表明：酸碱处理是去除血液制品中热原较为科学、有效的方法。【关键词】酸碱处理；血液制品；热原；免疫球蛋白一、引言各种人血浆蛋白制品统称为血液制品，其中包括人胎盘血白蛋白

2、、人血白蛋白、静脉注射用人免疫球蛋白、肌注人免疫球蛋白、组织胺人免疫球蛋白等等。健康人血浆是血液制品的原料，人血浆中的水份占有92%左右，而蛋白质则占有7%-8%，蛋白质通过分离提纯制成了血液制品。自然环境中普遍存在热原质，这也是目前很多大规模血液蛋白分离技术和方法，容易受到热原污染，进而产生热原反应的原因。热原作为一种药理活性很强的毒性反应物质，对血液制品有很深的影响。二、方法去除污染细菌毒素有很多方法，一般是根据血液蛋白相对分析的不同质量来去除细菌内毒素，常用的有超滤、分子筛等方法，这些方法主要适用于一些分子含量较低的输液药品中，比如生理盐水和葡萄糖水等。【1】此外还有层析法，应用的较为广

3、泛，但是由于设备成本较高，因此处理量并不大。而酸碱处理方法，在血液制品和其化学条件相对稳定的条件下，则也有较为明显的变化。把生理盐水在注射前，平均分成均等的两份，分别用lmol/lhci或lmol/lnaoh调ph至4.0±0.5、10±0.5，分别加入一定量的标准内毒素，使内毒素浓度为4eu/而，除菌过滤后分成4份，分别放在57±0.5、37±0.5、20±0.5、（28）±0.5的温度条件下孵放，分成不同的时间段，在相应的时间内进行取样，然后對毒素含量进行测量。【2】三、酸碱处理热原的处理方法血液作为人体的液体组织，有着一定的碱性

4、，正常人的血液会将血液酸碱度保持一个相对恒定的状态，通常是以ph值作为衡量标准，其范围一般在7.357.45，而人体的生命活动耐受的最大变动的那个范围是6.97.8，酸碱度对机体有着较为明显的作用。一般情况下，酸碱度对神经肌肉组织的兴奋程度可以产生一定的影响。当血液酸碱度变化不明显时，说明人的血液酸碱度是正常的，这是由于人的血液中有着抗碱和抗酸的物质，能够对人体系统形成一定的缓冲作用，对肾脏排泄、肺呼吸等都有一定的影响。一旦出现身体疾病或者其他不良的反应，身体就会出现酸碱失衡，导致系统紊乱，我们在临床上把这样的现象称为酸碱中毒。结合我们日常酸碱处理的热原方法，我们进行以下分析和论述。（一）酸孵

5、放静脉注射免疫球蛋白中内毒素在酸孵放中会产生影响，5%的低ph（ph4±0.2）静脉注射丙种球蛋白中，分别按5seu/ml及2.5eu/ml的量加入内毒素，摇匀，采用家兔法来对热原取样进行监测，另将样品于24±1孵放24d，同样用家兔法检测热原。（二）碱处理利用家兔法和鲎试法对热源的合格度进行检测，将20%的人血白蛋白制品利用注射盐水或者其他水进行稀释，将其稀释成10%的浓度，用1mol/l的na0h把ph调到10.0±0.2，之后加入一定量的标准内的毒素，分解成3份，每份浓度变成4eu/ml，其中两份的na十浓度调为40mol/l，进行除菌过滤，然后放于37&#

6、177;0.5、57±0.5孵放。而另外一份则将na十浓度调为160mol/l，除菌过滤后则在37±0.5孵放，在不同的时间段来取样进行测试，利用鲎试法来测量内毒素含量，并观察其样品外观。四、结果内毒素浓度为4eu/ml的生理盐水样品，在不同ph（4、10）及不同的温度下进行孵放。同时在不同的时间段，利用鲎试法进行检测，检测出的结果是：ph4，经不同温度孵放24小时之内，内毒素含量均下降较快，至35h均降到1（eu/ml；ph10，孵放温度越高内毒素下降越快，57孵放35h降为阴性，37孵放76h降为阴性，而20、28下%h内毒素浓度只下降到1eu/ml，见图l、图2。五、

7、结语随着血液制品分离纯化工艺的发展，血液制品的种类在不断增加，其适应症也在不断被发现，这些使得用于临床疾病治疗的血液制品数量显著上升。根据国家食品药品监督管理总局发布的相关指导原则，生产工艺要具有一定的去除/灭活部分病毒能力，生产过程中应有特定的去除/灭活病毒方法，以提高血液制品的安全性。通过上述酸碱处理的方法可以看出，酸碱处理的血蛋白制品，其检测的热原都符合我国相关生物制品的要求和规范，并且在酸孵化后的样品（少了碱处理），高浓度的内毒素样品都和孵放前后有着明显的浓度差异。【3】同时，碱处理的3份高热原人血白蛋白制品，进行检测后均热原合格，符合我国的关于生物制品的规格和要求。【参考文献】【1】李军英. 生物制品中常用灭活剂的研究进展j. 中国生物制品学杂志， 2018， 31（09）：117-120.【2】耿军晓