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文档简介

1、几种水溶性维生素对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用【摘要】目的探究争论几种水溶性维生素( vitb1 、vitb6 、vitb12and vitc)对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用;方法采纳改良的 mtt法,来检测小鼠腹腔巨噬细胞活性;结果vitb1 50 l 0.0025g, vitb6200l 0.002g, vitb12200l 0.002 g, vitc 200l0.08 g 均对小鼠腹腔巨噬细胞有活性增强作用;结论几种水溶性维生素( vitb1 、vitb6 、vitb12 and vitc)对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用;【关键词】水溶性维生素; mtt法;小鼠巨噬细胞to study t

2、he activation of in vitro mice macrophages with various water soluble vitamins【abstract 】objectiveto propose studying the effect of various water soluble vitamins vitb1,vitb6,vitb12and vitc of in vitro mice macrophages activation. methodsthe article took the modified method of mtt to explose theacti

3、vation of in vitro mrice macrophages. resultsvitb150l 0.0025g, vitb6 200 l 0.002g, vitb12 200l 0.002g, vitc 200l0.08 g all stimulated the effect of in vitro mice macrophages.conclusionvariouswater soluble vitamins vitb1,vitb6,vitb12and vitc which were able to stimulate the activation of in vitro mic

4、e macrophages under certainconcentration.【key words 】water soluble vitamin; mtt method; mice macrophage维生素是维护人体正常生理功能及细胞内各种能量代谢生化反应所必需的一类低分子量有机化合物;尽管机体对这类物质需求量相对很少,但是它们却非常重要,是人体必不行少的微量物质,假如缺乏,可引起各种各样的疾病;因此某些种类维生素对人体的免疫系统的免疫功能也起着重要作用,影响免疫系统的各种细胞功能;最近很多年,国内外养分免疫学者都在争论探讨各种维生素对免疫系统的作用,妄想探明各种维生素对免疫细胞活化的增

5、强或抑制,为提高机体免疫力,本文选用和人类基因组具有相当部分同源性小鼠,选用体外试验检测维生素 b1、b6、b12 和维生素 c对小鼠腹腔巨噬细胞活性作用的研究;mosmon1983 1报道噻唑蓝( mtt)比色法,经后人改良,使这种方法更加完善成熟,成为定量、重复性好、简便易行检测免疫细胞活性的好方法;我们采纳此法,检测小鼠腹腔巨噬细胞的活性,现将结果报告如下;1 材料与方法1.1 试验动物和主要试剂及试验仪器icr 小鼠体重( 20±2) g,雄性,由首都医科高校试验动物部供应; rpmi1640培育液为 hyclmone 公司产品;噻唑蓝( mtt)为 sigma公司产品, 1

6、0%十二烷基磺酸钠( sds)为 brl公司产品,淋巴细胞分别液为 tbd生物技术进展中心产品,液体石蜡油为北京旭东化工厂产品,vitb1(5mg/ ml )、vitb6(5mg/ ml)、vitb12( 0.5mg/ ml )均为天津金耀氨基酸有限公司产品,vitc (400mg/ ml )为北京双鹤药业有限公司产品,酶标仪为slt公司产品(型号为 a-5082);1.2 方法(1)对小鼠腹腔注射( vitb1、vitb6、vitb12和 vitc ,无菌液体石蜡油),取 icr 小鼠 40 只分成 4 组,每组 10 只,分别为 1 组、2 组、3 组和 4 组;1 组为vitb1 试验组

7、,第 1 天对其中 5 只小鼠腹腔注射无菌生理盐水0.2ml/只,作为对比,另外 5 只小鼠腹腔注射 vitb10.05ml/只作为试验组; 2 组为 vitb6试验组,第 1 天对其中 5 只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/只,作为对比,另外 5 只小鼠腹腔注射 vitb6 0.2ml/只作为试验组; 3 组为 vitb12试验组,第 1 天对其中 5 只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/ 只,作为对比,另外 5 只小鼠腹腔注射 vitb120.2ml/ 只作为试验组; 4 组为 vitc试验组,第 1 天对其中 5 只小鼠腹腔注射无菌生理盐水 0.2ml/ 只,作为对比,另外 5

8、 只小鼠腹腔注射 vitc 0.2ml/只作为试验组;以上 4 组小白鼠经腹腔注射生理盐水和维生素,均于48h 后再经腹腔注射无菌液体石蜡油0.1ml /只;48h 后行颈椎脱臼处死;( 2)巨噬细胞的制备:将处死的小白鼠行腹部皮肤消毒后,持镊提起腹中部皮肤并剪开,暴露腹膜,躲开血管剪开腹膜一小口;用毛细吸管取出腹腔液,并收集于试管中;作好标记后离心,弃上清, 洗 3 次,立刻进行台盼蓝染色,运算活细胞数;细胞数108/ ml ;( 3)噻唑蓝比色法,将制备的小鼠巨噬细胞按组分管,每组试验管(孔) 3 管(孔)对比管(孔) 3 管(孔);37温育 2h 后,每管加 10%sd(s 溶于双蒸水)

9、,轻轻震荡,待甲簪颗粒完全释放后,再用酶标仪测 od570值;2 结果2.1 vitb1对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用vitb1对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用, vitb150 l (0.0025 g)对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用, p<0.01,见图1;图 1vit b1对小鼠巨噬细胞活性的作用(略)2.2 vitb6对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用vitb6对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用, vitb6200l0.002 g)对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用,p<0.01,见图 2;图 2vit b6对小鼠巨噬细胞活性的作用(略)2.3 vitb12对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用vitb12对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用, 200l0.002 g 对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用,p<0.001,见图 3;12图 3vit b12对小鼠巨噬细胞活性的作用(略)2.4 vitc对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用vitc对小鼠腹腔巨噬细胞活性的作用,200l0.08 g 对小鼠腹腔巨噬细胞活性有增强作用, p<0.01,见图 4;3 争论mosmon(1983 年) 1报道噻唑蓝(

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