罗氏降钙素检测试剂盒(电化学发光法)说明书

1、降钙素检测试剂盒(电化学发光法)说明书Calcitonin【产品名称】通用名称：降钙素检测试剂盒(电化学发光法）英文名称：Calcitonin包装规格100测试/盒预期用途主要用途该产品适用于体外定量测定人血浆和血清中的人降钙素(甲状腺降钙素)。降钙素测定主要是结合其它临床和实验室检测结果用于辅助诊断和治疗一些涉及甲状腺和甲状旁腺的疾病，包括甲状旁腺功能尤进以及其他的临床和实验室检査发现。Elecsys和cobase免疫检测分析&的检测原理是电化学发光法。概要人降钙素(hCT)是由32个氨基酸构成的肽激素，分子量为3418道尔顿，主要是由甲状腺的滤泡旁C细胞分泌。1它是在肝脏和肾脏中代

2、谢，受到血清钙水平调节。生理性CT对界、磷代谢有影响。它是骨吸收作用抑制剂，防止钙应激(例如妊娠、哺乳和生长)时的骨丢失。婴儿中血清CT水平相机对较高，而极低出生体重婴儿中更高。5从儿童时期到成年过程中CT水平会迅速降低，且保持着相对稳定。一般而言，男性血清降钙素水平髙于女性，而吸烟会导致血清降钙素水平进一步升高。CT水平升高可见于各种病理学状况下。9,10,11CT水平的进一步升高还可见于甲状旁腺功能亢进、高胃泌素血症、肾衰和慢性炎性疾病相关状况。1V3与CT分泌过多性疾病有关的最为突出的临床综合症是甲状腺相关疾病。这种疾病可能为散发或以表现为常染色体显性遗传特征的家族形式出现。这些疾病通常

3、产生具有诊断意义的血清降钙素浓度升髙，因此通过免疫检测方法测量血清降钙素水平可获得异常精确且具有极高特异性的诊断。此外，降興素测量值还可用于监测产降妈素患者中治疗的有效性。14,15然而，在小部分但却是越来越多的患者中，基础激素水平与正常水平不同。其中一些受试者处于C-细胞形成或增生的早期，适合接受手术治疗，在临床经验中几乎可治愈。为了在疾病早期鉴别出这些患者，有必要针对CT分泌进行激发试验，以排除假阴性患者。使用钙或五肽胃泌素或同时使用两者后，大部分患者都会出现CT水平增加的反应。16,17Elecsys降钙素检测使用针对人降钙素的特异性单克隆抗体。钌复合物标记的抗体中包括了小鼠特异性成分。

4、a)Tris(2,2,bipyridyl)ruthenium(II)-comple×(Ru(bpy)2+3三联吡啶钌【检验原理】夹心法原理。总检测时间:18分钟。 第1次孵育：50µL标本、一份生物素化的hCT特异性单克隆抗体和钌复合物标记的hCT特异性单克隆抗体一起孵育，反应形成一”三明治”样抗原-抗体复合物。 第2次孵育：加入链霉亲合素包被的磁珠微粒后，该复合物通过生物素与链霉亲合素的相互作用与固相结合。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell/ProCellM除去。给电极加以定的电压，使复合物化学发光，并通过光电倍

5、增器测量犮光强度。 通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果，定标曲线是通过2点定标和试剂条形码上获得的主曲线生成的。【主要组成成份】提供的物品包括工作溶液。工作溶液的组成如下：M链霉亲合素包被的磁珠微粒(透明瓶盖)，1瓶，6.5mL:链酶亲合素包被的磁珠微粒：0.72mg/mL;防腐剂。R1生物素化的抗人降钙素抗体(灰盖)1瓶，8mL:生物素化的单克隆抗人降钙素抗体(小鼠)1.50mg/L;磷酸盐缓冲液100mmol/L,PH7.2；防腐剂。R2钌复合物标记的抗人降钙素抗体(黑盖)，1瓶，8mL：钌复合物(Ru(bpy)2+3)标记的抗人降钙素单克隆抗体(小鼠)1.0mg/L;磷酸盐缓冲液10

6、0mmol/L,pH7.2；防腐剂。霈要的物品(未提供）l 06445861-190,CalcitoninCalSet,4×l.0mLl 05618860-190,PreciCcmtrolVaria,规格2×3mL,分别为PreciCcmtrolVaria1和2l 03609987190。DiluentMultiAssay。规格2×16mL#本稀释液l 实验室基础设备l Elecsys2010,MODULARANALYTICSE170,或cobase分析仪l Elecsys2010和cobasc411分析仪所需材料：l 11662988122,ProCell,6&

7、#215;380mL系统缓冲液l 11662970122,CleanCell,6×380mLpJ量池清洗液l 11930346122,ElecsysSysWash,l×500mL附加洗液l 11933159001,SysCleanJS配器l 11706802001tElecsys2010AssayCup,60×60反应管l 11706799001,Elecsys2010AssayTip,30×120移液管吸头MODULARANALYTICSE170,cobase601和cobase602分析仪所需材料：l 04880340190,ProCellM,2&#

8、215;2L系统缓冲液l 04880293190,CleanCellM,2×2L检测池清洗液l 03023141001，PC/CC-Cups,12杯用于在测定前预热ProCellM和CleanCellMl 03005712190,ProbeWashM,12×70mL洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。l 03004899190,PreCleanM,5×600mL检测清洗溶液l 12102137001,AssayTip/AssayCupCombimagazineM,48盒×84反应杯或移液管吸头，废物袋l 03023150001,WasteLin

9、er,废物袋l 03027651001,SysCleanAdapterM所有分析仪需要材料：l 11298500316，ElecsysSysClean>5×l00mL系统清洗液【储存条件及有效期】存储在2-8，有效期为15个月。请垂直摆放Elecsys降钙素试剂盒，以确保使用前自动混合过程中微粒完全有效。稳定性：未开封试剂，2*81C有效期内均可使用开封试剂，2-81C84天fl2周）置于分析仪上28天(4周）适用仪器罗氏全自动电化学发光免疫分析系统：Elecsys2010MODULARANALYTICSE170cobasc411cobase601cobase602【样本要求】

10、样本采集和制备只有以下类型的样本可用于检测。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂，K2-EDTA和K3-EDTA血莱以及含有分离凝胶的肝素锂血浆试管。判断标准：浓度<10pg/mL时，回收率总偏差S初始值的±2.0Pg/mL;浓度lOpg/mL且斜率0.9-1.1+截距±2X空白限(LoB)+相关系数0.95时，回收率在初始值±20%以内。20-25温度下可稳定保存4小时，2-8温度下可稳定保存1天，-20：温度下可稳定保存3个月。只可冻存一次。所列出的被检测的样本类型采用经挑选的市售样本管采集，即并非检测了所有厂商的试管产品。各生产商提供的样

11、本采集系统可能含有不同的材料，某些情况下这些材料有可能影响到检测结果。如果采用原始试管(样本采集系统)处理样本，请参照试管生产商提供的说明。如果样本中有沉淀，测定前要进行离心。切勿使用加热灭活的标本。不可使用叠氮化物作为稳定剂的样本和质控品。检测前，请确保标本、定标液及质控液平衡至室温(20-25)。考虑到可能的蒸发效应，上机的样本、定标液和质控品应在2小时内分析/测定。【检验方法】试剂处理该试剂盒为即用型，请勿分开使用。正确操作需要的所有信息可通过相应的试剂条码读取。测定为实现最佳检测性能，请参照本文针对相应分析仪所给出的指导说明。正确参考针对特定分析仪检测的操作人员手册。使用前分析仪自动对

12、磁性微粒进行再混匀。通过试剂条码读取测试具体参数。在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。将冷藏试剂室温平衡至20左右，放置分析仪的试剂盘(20)内。避免形成泡沬。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。定标溯源性：这种方法已被IRPWHO89/620参考标准标准化。每批ElecsysCalcitonin试剂的试剂盒上都有条形码记录各批号试剂特异的定标信息。预先确定的主曲线适用于用ElecsysCalcitoninCalSrt试剂盒进行测定的分析仪。定标频率：新批号试剂必须进行定标(新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时)。以下情况建议重新进行定标：

13、使用同一批号试剂2个月后(56天）7天后(在分析仪上使用同一试剂盒）根据需要：如质控数据超过额定的限度质量控制质控采用PreciControl Varia其他合适的质控品也可使用。各浓度质控至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。应根据各实验室的具体要求采用适合的质控间隔和限值。获得的数值应当在设定的范围内。若失控每个实验室必须采取相应的纠正措施。请遵循政府法规和当地行业导则进行质量控制。计算分析仪自动计算每一份标本的分析物浓度，单位可为pg/mL或pmol/L(可选)。转换因子：pg/mL×0.2926=pmol/LpMnol/L×3.4176=pg

14、/mL稀释若标本中降钙素浓度超过测定范围，则可使用DiluentMultiAssay稀释标本。推荐稀释比是l:l(×)(MODULARA NALYTICSEl70,Elecsys2010和cobasdih析仪自动稀释或者人工稀释)。稀释标本的CK-MB浓度必须>20pg/mL。手动稀释后，结果要乘上稀释因子。分析仪稀释后MODULARANALYTICSEl70，Elecsys2010和cobas e软件会自动计算结果。【参考值(参考范围)】预期值参考范围上限是以第97.5百分位数给出各实验室应研宄参考值对于各自患者人群的适用性，必要时建立各自的参考范围。【产品性能指标】分析仪的

15、代表性性能指标如下所示。各个试验室获得的数据可能不同。精密度根据CLSI(临床实验室标准委员会啲改良方案(EP5-A2),使用Elecsys试剂、混合人血清和质控品进行重复性测定：每天2次重复检测，共21天(n=84).获得如下结果：Elecsys 2010和cobas e 411分析仪可重复性b中间精密度样本平均值SDCVSDCVpg/mLpg/mL%pg/mL%人血清11.010.0343.40.0525.2人血清211.50.3453.00.4133.6人血清31.713.5人血清448213.82.919.240人血清5191042.6 2.265.03.4Pre

16、ciControl Varia 18.880.1912.10.2612.9PreciControl Varia 297.71.441.52.512.6b)可重复性-批内精密度MODULARANALYTICSE170,cobase601和cobase602分析仪：可重复性中间精密度样本平均值SDCVSDCVpg/mLpg/m%pg/m%人血淸14.190.0601.40.0822.0人血淸245.40.7941.81.021 23人血淸34566.171.4g.461.9人血淸490714.0IS19.82.2 人血淸5161325.91.634.72.2PreciControl Varia 1

17、8.870.1281.40.1461.6PreciControl Varia 293.71.671.81.872.0方法学比较使用临床标本比较ElecsysCalcitonin检测(y)和商用方法(×),相关性数据如下：测量的样本数：247Passing/Bablok 线性回扫y=970X-0.133 y=l.12×-l。92t=0.911 r=0.977样本浓度在0.600和1866pg/mL之间。群组样本含量N第97.5百分位数95%可信区间下艱95%可信区间上限表观健康女性1936.40pg/mL5.17 pg/mL9.82 pg/mL表观健康男性1629.52pg/

18、mL.831 pg/mLl4.3 pg/mL分析特异性以9.11和468pg/mL的降钙素浓度检测时发现了下列交叉反应：交叉反应物检测浓度µg/L交叉反应性%鲑鱼降钙素 1000.017猪降钙素5000.007鸡降钙素5000.005ACTH(l-39) 人源1000.037C-肽400000.000降钙素基因相关肽10000.002PTH(1-84)人源15O0.013TSHlOOOmlU/mL0.009胰岛素(Insulin)试 剂盒说明书335000.000催乳素10000.001促胃液素I2000o.001依降钙素1000000.000钙抑肽400000.055限值和范围0.

19、5-2000pg/mL(通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定)。低于检测下限的值报告为<0.5pg/mL。超过检测范围的值报告>2000pg/mL(或100倍稀释结果可报告至200000pg/mL)。测量值下限空白限值(LoB),检出限(LoD)和定量检出限(LoQ)空白限=0.3pg/mL空白限=0.5pg/mL定量检出限=1.0pg/mL,总容许误差30% 空白限值和定量检出限均是按照CLSI(临床和实验室标准学会)EP17-A的要求确定。空白限值来自于几次独立测量序列中对几份无分析物样本260次测量所得数值的第95百分位数。空白限相当于低于无分析物样本检测值的浓度，其可能

20、性为95%。检出限是根据空白限以及低浓度样本的标准差来确定。检出限相当于可被检测出来的最低分析物浓度(数值有95%的可能性高于空白限)。检出限是指样本中可精确定量检出的分析物最低量，总容许误差30%。限制性-干扰因素检测结果不受黄疸(胆红素<1128pmol/L或<66mg/dL),溶血(血红蛋白<0.124mmol/或<0.2g/dL),脂血(脂肪乳剂<2000mg/dL)和生物素(<40ng/mL或<163nmol/L),以及IgG<4g/dL以及IgM 0.7g/dL和IgM<1,6g/dL的影响。判断标准：10pg/ml的样本在初始

21、值±10%的范围内回收，或<10pg/mL的样本在初始值的±1pg/mL范围内回收。对于接受高剂量生物素治疗的患者(即>5mg/天)，必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。类风湿因子浓度低于1200IU/mL时无明显干扰。降钙素浓度最高达到1µg/mL时无高剂量钩状效应。体外对17种常用和12种特殊药物进行试验未发现会影响检测结果，未发现有药物影响检测结果。采用下表中给出的浓度监测特甲状腺药物。未发现有药物影响检测结果。判断标准：在初始值±10%范围内重现。药物浓度(ug/mL)碘化物0，2左甲状腺素0,25卡比马唑30Thiamazol80

22、丙硫氧嘧啶300Perchlorat2000普萘洛尔240胺碘达隆200泼尼松龙100氢化可的松200Fluocortolon100Octreotid0.3少数病例中极高浓度的检测特异性抗体、链霉亲合素或钌抗体会影响检测结果。通过适当的实验设计可将影响因素降到最低。用作诊断用途时，应始终结合病人病历、临床检査和其他检测结果评估结果。【注意事项】注意亊项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必须遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必须按照当地法规进行处置。专业人员可索取安全数据报告。避免试剂和样本(样本、定标液和质控品)产生泡沫，【参考文献】1。ZaidiM,MoongaBS,BevisPJR

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