![基于核酸适配体荧光法检测赭曲霉素A_第1页](http://file2.renrendoc.com/fileroot_temp3/2021-11/14/775a7751-2d3d-45c1-aa1a-94a21e5f86dd/775a7751-2d3d-45c1-aa1a-94a21e5f86dd1.gif)
![基于核酸适配体荧光法检测赭曲霉素A_第2页](http://file2.renrendoc.com/fileroot_temp3/2021-11/14/775a7751-2d3d-45c1-aa1a-94a21e5f86dd/775a7751-2d3d-45c1-aa1a-94a21e5f86dd2.gif)
![基于核酸适配体荧光法检测赭曲霉素A_第3页](http://file2.renrendoc.com/fileroot_temp3/2021-11/14/775a7751-2d3d-45c1-aa1a-94a21e5f86dd/775a7751-2d3d-45c1-aa1a-94a21e5f86dd3.gif)
![基于核酸适配体荧光法检测赭曲霉素A_第4页](http://file2.renrendoc.com/fileroot_temp3/2021-11/14/775a7751-2d3d-45c1-aa1a-94a21e5f86dd/775a7751-2d3d-45c1-aa1a-94a21e5f86dd4.gif)
下载本文档
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、wyiT论女第表&冢基于核酸适配体荧光法检测赭曲霉素 A【摘要】:第一章:简单介绍了核酸适配体的定义和特点,赭曲霉素A(OTA)检测的重要性和常用的检测方法;综述了基于核酸适配体检 测赭曲霉素A的不同方法;阐述了本论文的立题背景、研究内容及 创新点。第二章:利用核酸适配体荧光探针,基于荧光共振能量转移原理建立了一种检测赭曲霉素 A的荧光分析方法。赭曲霉素 A在 375nm波长下激发,在430nm处可以发荧光,赭曲霉素A与标记有荧光 素的核酸适配体结合后,两者之间可发生荧光共振能量转移,荧光素在 518nm处的荧光强度增强。根据 518nm处荧光强度的变化可实现对 赭曲霉素A的检测。这种
2、检测方法简单、快速、特异性强,检出限达 到了 1nmol/L。第三章:利用荧光素标记的核酸适配体(FDNA)和荧光 猝灭基团(BHQ)标记的互补寡聚核苷酸链(QDNA)建立了一种检测赭 曲霉素A的荧光分析法。未加入赭曲霉素 A时,标记有荧光素的核酸 适配体与标记有猝灭基团的互补寡聚核苷酸链结合,荧光基团与猝灭 基团靠近,导致荧光猝灭;当加入赭曲霉素 A后,FDNA与赭曲霉素A 高亲和力高特异性结合,荧光基团与猝灭基团远离,FDNA的荧光信号 得到恢复。根据FDNA与目标物结合前后荧光强度的变化,可以实现 对赭曲霉素A的定量检测。第四章:利用赭曲霉素 A本身的荧光特 性,发展了一种通过荧光各向异
3、性分析快速考察赭曲霉素A(OTA)与核酸适配体之间的相互作用的方法。赭曲霉素A与核酸适配体的特异性结合使分子体积增大,赭曲霉素A旋转变慢,引起荧光各向异性值增大。通过荧光各向异性分析考察了缓冲液成分中金属离子对适配体 亲和力的影响,结果发现当Na+与Ca2+同时存在时赭曲霉素A与核酸 适配体之间的亲和力明显增强,这与溶液中只有Ca2+时相比亲和力增 大了 18倍,当Ca2+不存在时适配体亲和力完全消失。另外,利用荧光 各向异性方法研究了核酸适配体突变对亲和力的影响,对适配体亲和力起重要作用的碱基可以被鉴别出。建立了一种基于适配体检测 OTA 的荧光各向异性分析法,在缓冲液中固定适配体和OTA标
4、准物的浓度, 加入不同浓度的OTA待测物,OTA荧光各向异性值会随着待测物浓度 的增加而降低,根据荧光各向异性值的变化可以实现对 OTA的检测。 第五章:建立了一种采用单荧光基团标记的核酸适配体检测赭曲霉素 A的方法。当标记有荧光基团的适配体与 OTA结合时,荧光基团周围 的环境发生变化,从而引起荧光强度的变化,根据荧光强度的变化实现 对OTA的检测。考察了适配体不同位点上标记荧光素(包括T碱基,3' 端,5'端)对适配体亲和力的影响,还考察了荧光素标记的适配体对 OTA的响应性能。一些荧光素标记的核酸适配体在检测OTA时表现出信号增加或是降低的响应。采用荧光开关适配体,实现了
5、对OTA的 快速、有选择性的检测,在稀释后的红葡萄酒中也可以检测 OTA,表明 本方法可以实现复杂基质中 OTA的检测。【关键词】:核酸适配体赭 曲霉素A荧光分析荧光各向异性【学位授予单位】:山西大学【学位级别】:硕士【学位授予年份】:2013【分类号】:0657.3【目录】:中文摘要10-12ABSTRACT12-14第一章绪论14-341.1引言14- 151.2赭曲霉素A检测方法研究进展15-251.2.1核酸适配体介绍15- 161.2.2基于核酸适配体的赭曲霉素 A的检测16-251.2.2.1基于核酸适配体光学方法检测赭曲霉素A16-191.2.2.2基于核酸适配体电化学方法检测赭
6、曲霉素 A19-241.2.2.3基于核酸适配体检测赭曲霉素A的其他方法24-251.3立题背景及主要研究内容25-261.4创新点26-27 参考文献27-34第二章基于荧光共振能量转移的核酸适配体探针检测赭曲霉素A34-462.1引言34-352.2实验部分35-362.2.1仪器与试剂 352.2.2荧光分析352.2.3实验条件的优化35-362.2.4赭曲霉素A的检 测362.2.5特异性实验362.2.6回收率实验362.3结果与讨论36-422.3.1 实验原理36-372.3.2赭曲霉素A与FAM标记的适配体之间的FRET 考察372.3.3离子浓度的影响37-392.3.4方
7、法选择性的考察39-402.3.5 赭曲霉素A的检测40-412.3.6红葡萄酒样品中赭曲霉素 A的检测 41-422.4结论42参考文献42-46第三章基于结构转换适配体荧光法 检测赭曲霉素A46-583.1引言46-473.2实验部分47-483.2.1仪器和试 剂473.2.2荧光分析473.2.3实验条件的优化47-483.2.4赭曲霉素A的 检测483.2.5特异性实验 483.2.6回收率实验 483.3结果与讨论48- 553.3.1实验原理48-493.3.2离子浓度、pH值、Tween20的影响49- 513.3.3试剂加入顺序及温育温度的影响51-523.3.4选择性的考察
8、yiT论女為表站家52-53335赭曲霉素A的检测53-543 36复杂基质中赭曲霉素 A的检 测54-553.4结论55参考文献55-58第四章利用荧光各向异性分析研 究赭曲霉素 A与适配体之间的相互作用及对赭曲霉素A的检测58-804.1引言58-594.2实验部分59-60421仪器和试剂594.2.2实验 方法59-604.2.3解离常数的测定604.3结果与讨论60-754.3.1赭曲霉 素A与适配体之间相互作用的荧光各向异性分析60-624.3.2阳离子对适配体亲和力的影响 62-644.3.3缓冲液pH对适配体亲和力的影响 64-654.3.4解离常数的测定65-694.3.4.1亲和力的测定654.3.4.2解离 常数的测定65-664.3.4.3不同缓冲液中解离常数的考察 66-694.3.5适 配体碱基突变对亲和力的影响69-724.3.6采用荧光各向异性法检测赭 曲霉素A72-754.3.6.1荧光各向异性法检测赭曲霉素 A72-734.3.6.2复 杂基质中赭曲霉素A的检测73-754.4结论75-76参考文献76-80第五 章利用单荧光基团标记的核酸适配体检测赭曲霉素A80-945.1引言805.2实验部分80-825.2.1仪器和试剂80-815.2.2荧光分析81-825.3 结果与讨论82-895.3.1实验原理 825.3.2适配体标记位点的筛选
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 第十四课 声情并茂-音频编辑 说课稿 -2023-2024学年大连版(2015)初中信息技术七年级上册001
- 第20课《人民英雄永垂不朽》说课稿2024-2025学年统编版语文八年级上册
- 初中物理力学知识
- 2024新版摩托车协议合同标准版
- 2024水利工程给排水劳务分包合同
- 2024年鱼池承包及渔业产业链整合服务合同3篇
- 基础护理学病人的安全
- 2024版办公用品耗材购销合同
- 2024版养殖项目商业协议模板版B版
- 2024版借调工作安排具体合同版B版
- 2024年R1快开门式压力容器操作证考试题库及答案
- 《数学物理方法》期末测试卷及答案
- 铁路工务劳动安全
- 直播电商年终总结
- 沪科版九年级物理下册教案全册
- 二年级数学(上)计算题专项练习
- PAS 2050:2011-商品和服务在生命周期内的温室气体排放评价规范(英文)
- 历史期中复习课件八年级上册复习课件(统编版)
- 幕墙作业安全技术交底
- 保护性约束完整版本
- 埃森哲流程制造-智能工厂规划设计相关两份资料
评论
0/150
提交评论