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文档简介
1、植物脱毒植物脱毒一、脱毒苗培育的意义二、脱毒的方法三、脱毒苗生根培育与驯化移栽四、脱毒苗鉴定五、脱毒苗保管与繁衍 一、脱毒苗培育的意义v一植物病毒的危害v二病毒传播的方式v三脱毒苗培育的意义二、脱毒的方法v一茎尖培育脱毒v二热处置脱毒v三茎尖脱毒与热处置相接合v四微体嫁接脱毒法v五愈伤组织培育脱毒v六珠心胚培育脱毒法v七花药培育脱毒v八抗病毒药剂法一茎尖培育脱毒v1微茎尖培育脱毒机理v2微茎尖培育脱毒的过程感染病毒植株顶芽或腋芽剥离茎尖茎尖培育植株再生病毒检测离体快繁防虫网室内繁衍脱毒苗图11-1 微茎尖培育消费脱毒苗的流程图陈世昌,2021马铃薯脱毒马铃薯脱毒技术义务义务1选取外植体并灭菌选
2、取外植体并灭菌义务义务3解剖镜下茎尖剥离与接种解剖镜下茎尖剥离与接种 义务义务2预备培育基预备培育基 义务义务4继代培育继代培育 义务义务5诱导生根诱导生根 义务义务6试管苗驯化移植试管苗驯化移植 2021-11-13义务一义务一 外植体选取及消毒外植体选取及消毒选择:选取生长旺盛、强壮、无病或患病相对较轻的选择:选取生长旺盛、强壮、无病或患病相对较轻的的植株。切取的植株。切取4-6cm的顶芽或侧芽,除去外部可见的的顶芽或侧芽,除去外部可见的小叶。小叶。消毒:先用自来水冲洗消毒:先用自来水冲洗30mink,再用,再用75%的酒精漂洗的酒精漂洗几秒到十几秒,然后用几秒到十几秒,然后用0.1%的氯
3、化汞或的氯化汞或20倍的次氯酸倍的次氯酸钠液消毒钠液消毒10-15min。消毒后的资料用无菌水冲洗。消毒后的资料用无菌水冲洗3次。次。义务二 预备培育基 v初代培育:MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LGA3v+0.1mg/LNAA+3%蔗糖+5g/L琼脂,PH5.8v继代增殖: MS+0.1mg/LNAA+3%蔗糖+5g/L琼脂,PH5.82021-11-13将消毒后的资料在解剖镜下进展剥离,假设是用于快速繁将消毒后的资料在解剖镜下进展剥离,假设是用于快速繁衍的茎尖资料可带衍的茎尖资料可带2-4个叶原基或更多,假设是用于脱毒的个叶原基或更多,假设是用于脱毒的切取切取0.1-0.5mm
4、,带带1-2个叶原基,并迅速接到培育基上。个叶原基,并迅速接到培育基上。解剖镜下剥取茎尖解剖镜下剥取茎尖义务三义务三 茎尖剥离和接种茎尖剥离和接种义务四 继代培育 二热处置脱毒1热处置脱毒的原理2热处置脱毒的方法温烫处置脱毒法热空气处置脱毒法3影响热处置脱毒的要素4热处置的优缺陷三茎尖脱毒与热处置相接合四微体嫁接脱毒法五愈伤组织培育脱毒v六珠心胚培育脱毒法v七花药培育脱毒v八抗病毒药剂法v 三氮唑核苷、5-二氢尿嘧啶、双乙酰-二氢-5-氮尿嘧啶、 三、脱毒苗生根培育与驯化移栽四、脱毒苗鉴定一直接察看法二指示植物鉴定法 1汁液涂抹鉴定 2小叶嫁接法待检草莓叶,叶柄削成楔形指示植物削去中间小叶,从切口纵切1.5cm左右将削好的待检小叶插入切口封口膜包扎喷少量水,用小孔塑料袋罩上,放入防虫网室,10d后去袋图11-2 草莓指示植物小叶嫁接检测法指示植物待检植物砧木砧木指示植物待检植物图11-3双重芽接法王国平,2002 图11-4双重切接法王国平,2002v3双重芽接法v4双重切接法三抗血清鉴定法四分子生物学鉴定法 1双链RNA法dsRNA 2核酸杂交技术 人工合成能与病毒碱基互补的 (cDNA 3聚酶链反响技术PCR)五电
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