第八章染菌防治

1、第八章染菌的防治第八章染菌的防治染菌（染菌（contamination）的危害）的危害影响产量影响产量影响质量影响质量使能耗主耗上升使能耗主耗上升第一节染菌的检查与判断第一节染菌的检查与判断一、杂菌污染的检查一、杂菌污染的检查培养基培养基（1）细菌培养基）细菌培养基营养肉汤：营养肉汤：glucose10g,peptone5g,beefextract5g,nacl5g,distilledwater1000ml,ph7.27.4。酚红肉汤酚红肉汤：营养肉汤营养肉汤+1%phenolred3ml。营养琼脂：营养琼脂：glucose5g,peptone10g,beefextract3g,nacl5g,

2、agar1520g,distilledwater1000ml,ph7.27.4。2）酵母培养基）酵母培养基萨氏培养基萨氏培养基（sabouraudsagar）：glucose40g,peptone10g,agar1520g,distilledwater1000ml,ph5.6。（3）霉菌培养基）霉菌培养基察氏培养基察氏培养基（czapeksagar）：sucrose3 0 g , n a n o3 3 g , k2h p o4 1 g ,mgso47h2o0.5g,kcl0.5g,agar1520g,distilledwater1000ml,ph6.6。无菌检查的流程：无菌检查的流程：取样取样

3、接入试管或斜面接入试管或斜面培养培养（细菌3237，12天；真菌2528，13天）肉眼检查肉眼检查镜检镜检二、通过异常现象判断二、通过异常现象判断溶解氧水平异常变化显示染菌溶解氧水平异常变化显示染菌发酵时间发酵时间溶氧浓度溶氧浓度正常发酵正常发酵污染噬菌体发酵时间发酵时间溶氧浓度溶氧浓度正常发酵正常发酵污染好气性杂菌污染好气性杂菌污染非好气性杂菌污染非好气性杂菌排气中排气中co2异常变化显示染菌异常变化显示染菌二、通过异常现象判断二、通过异常现象判断工艺一定，尾气中工艺一定，尾气中co2量变化有一定规律量变化有一定规律污染杂菌，糖耗加快，尾气中污染杂菌，糖耗加快，尾气中co2量增加量增加污染噬

4、菌体，糖耗减慢，尾气中污染噬菌体，糖耗减慢，尾气中co2量减少量减少种子系统空气带菌设备渗漏培养基灭菌不彻底操作失误第二节染菌原因的分析第二节染菌原因的分析从染菌规模分析从染菌规模分析大规模染菌大规模染菌空气净化系统空气净化系统种子染菌、接种管道渗漏种子染菌、接种管道渗漏部分罐批染菌部分罐批染菌某一批号种子染菌某一批号种子染菌某一套连消系统染菌某一套连消系统染菌补料管路渗漏或补料液带菌补料管路渗漏或补料液带菌个别罐批连批染菌个别罐批连批染菌设备问题设备问题个别罐不连批染菌个别罐不连批染菌培养基灭菌不彻底或操作失误培养基灭菌不彻底或操作失误早期染菌早期染菌培养基灭菌不彻底培养基灭菌不彻底种子带菌

5、种子带菌接种管道灭菌不彻底或接种操作不当接种管道灭菌不彻底或接种操作不当中期染菌中期染菌培养基灭菌不彻底培养基灭菌不彻底加消沫剂、补料系统灭菌不彻底或渗漏加消沫剂、补料系统灭菌不彻底或渗漏发酵设备渗漏发酵设备渗漏泡沫顶罐泡沫顶罐后期染菌后期染菌空气系统有问题空气系统有问题从染菌时间分析从染菌时间分析酵母菌酵母菌：种子室、摇瓶间、计量罐、进料补种子室、摇瓶间、计量罐、进料补料阀门、搅拌轴封、被倒流的空气介质料阀门、搅拌轴封、被倒流的空气介质霉菌：霉菌：种子室、摇瓶间、搅拌轴封、被倒流种子室、摇瓶间、搅拌轴封、被倒流的空气介质、空气的空气介质、空气普通杆菌：普通杆菌：空气过滤介质、冷水设备渗漏、空

6、气过滤介质、冷水设备渗漏、设备死角渗漏设备死角渗漏芽孢杆菌：芽孢杆菌：培养基灭菌不彻底、设备有死角培养基灭菌不彻底、设备有死角球菌：球菌：空气系统、无菌间摇瓶间空气中空气系统、无菌间摇瓶间空气中从染菌的菌型分析从染菌的菌型分析第三节染菌的防治措施第三节染菌的防治措施一、一般染菌的防治一、一般染菌的防治预防种子带菌：预防种子带菌：环境清洁，无菌操作设备完好、可靠，无菌操作用品灭菌彻底，操作熟练，制度严格。一、一般染菌的防治一、一般染菌的防治消灭培养基染菌：消灭培养基染菌：严格物料采购、运输、仓贮严格物料采购、运输、仓贮配料（防止块状物料、清洗配料罐）配料（防止块状物料、清洗配料罐）灭菌（保证蒸汽

7、的压力、稳定及畅通、按操作灭菌（保证蒸汽的压力、稳定及畅通、按操作规程操作）规程操作）保压保压（防治培养基倒流）（防治培养基倒流）严防空气带菌：严防空气带菌：提高空气进口的洁净度提高空气进口的洁净度除尽压缩空气中的油和水除尽压缩空气中的油和水空气过滤器灭菌时防止被冲翻空气过滤器灭菌时防止被冲翻保证空气过滤器介质的填装质量保证空气过滤器介质的填装质量一、一般染菌的防治一、一般染菌的防治杜绝设备污染：杜绝设备污染：良好的设计（无死角）良好的设计（无死角）规范的安装规范的安装彻底的清洗彻底的清洗严密的维修严密的维修有效的灭菌。有效的灭菌。一、一般染菌的防治一、一般染菌的防治染菌罐的处理染菌罐的处理种

8、子罐染菌种子罐染菌灭菌后放下水道并对种子罐、管道进行检查和灭菌启用备用罐或倒种发酵灌染菌发酵灌染菌前期：前期：危害大的危害大的灭菌后放下水道灭菌后放下水道危害不大，可重新灭菌，重新接种危害不大，可重新灭菌，重新接种中后期：中后期：降低培养温度，降低通风降低培养温度，降低通风提前放罐提前放罐控制补料量控制补料量染菌罐的处理染菌罐的处理二、二、噬菌体污染的防治噬菌体污染的防治噬菌体污染的鉴别噬菌体污染的鉴别现象鉴别：发酵液变稀、发粘，our，do，nh4+n，泡沫。平板鉴别：观察噬菌斑。污染的预防污染的预防选育抗噬菌体菌株选育抗噬菌体菌株；环境、明沟、下水道定期消毒；环境、明沟、下水道定期消毒；排气过滤，菌体排放前灭菌；排气过滤，菌体排放前灭菌；选用孔径为选用孔径为0.01 m的微滤膜空气过滤器；的微滤膜空气过滤器；发酵车间远离农田、排污明渠、污水处发酵车间远离农田、排污明渠、污水处培养基中加入适量化学消毒剂：培养基中加