含量验证方案

1、头抱替安酯片含量分析方法验证方案方案编号：protocol no.v-154生效日期：eff. date替代：supersedes总页数：protocol contains pages6 pages1.0 方案审批protocol approval准备人prepared by姓名name签名signature日期date质量控制部quality control审批人reviewed by姓名name签名signature日期date质量控制部quality control质量保证部quality assurance批准人approved by姓名name签名signature日期date质量保

2、证部quality assuranee2.0概述2.1目的证明头抱替胺酯片含量测定的分析方法的可行性。2.2实验设备及试剂sr.实骑设备及试剂1高效液相色谱仪(waters 2487) aglient12002玻璃容器3头泡替胺酯工作对照品4纯化水 磷酸 磷酸二氢钾乙月青(色谱纯)5头抱替胺酯片样品3.0实验室操作程序3.0.1方法摘要头抱替胺酯片含量测定依照日本药典采用高效液相色谱内标法进行计算。规定限度 为标示量的90.0% 110.0%。3.0.2液相色谱条件色谱柱：c18硅烷键合硅胶柱流动相:0.2m磷酸氢二钾(1->2)：乙瞒 冰醋酸(72:28:1)稀释液:1%磷酸：乙月青=

3、4:1检测波长：254nm进样量：20ul3.0.3操作步骤(方法学)3.0.3.1内标物溶液的配制称取苯甲酸约700mg置1000ml容量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。3.0.3.2系统适用性溶液的制备：精密称取头孑包替胺酯对照品约18mg置20ml容量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻 度，摇匀。精密量取续滤液5ml和5ml内标液置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇 匀即可。头泡替胺酯反式异构体两个峰之间的分离度不小于2.0。重复进样6针的的 rsd%w1.0%3.0.3.3对照品溶液的制备：精密称取头砲替胺酯对照品约18mg置20ml容量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻 度，摇匀。精密

4、量取5ml对照品溶液和5ml内标液置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻 度，摇匀即可。3.0.3.4供试品溶液的制备：取本品20片"，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于头范替胺30mg）,置 50ml量瓶中，加稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml样品溶液和5ml内标液 置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀即可。4.0验证参数4.0.1专属性：专属性是指在其他成分（如辅料）可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特性。 按方法学项下方法制备对照品溶液和空白辅料溶液，注入液和色谱仪，观察比较在规定 的色谱条件下，辅料对主成份有无干扰。4.0.2精密度：精密度是指在规定的

5、测试条件下，同一均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间 的接近程度。方法精密度需进行下列几种精密度实验：a. 系统精密度b. 方法精密度c. 中间精密度a.系统精密度：此项是确认同一分析员用同一试剂和设备所测结果的重复性。以此来评估设备和试剂的 可靠性。程序：按方法学项下方法准备对照品溶液，重复进样6次，计算相对标准偏差。可接受标准：相对标准偏差应不大于1%b方法精密度此项是确认同一分析员配制6个溶液的重复性。程序：按方法学用同一批样品进行含量的测定。可接受标准相对标准偏差应不大于2%oc 中间精密度中间精密度是用同一批号的样品由两个分析员用不同的设备在不同的日期检测含量 重复性。程序：按方法

6、学的方法用同一批样品进行含量的测定，计算方法精密度和中间精密度之间 的相对标准偏差。可接受标准总的相对标准偏差不大于2%。403线性和范围分析方法的线性是指在设定的范围内测试结果与试样中被测物浓度直接称呈正比关系的 程度。分析方法的线性是通过预先配制一定浓度范围的标准溶液测定其响应值。线性曲线是由 溶液的浓度和峰面积描绘岀来的，相关系数则利用上述曲线计算。程序：按方法学用头孑包替安酯对照品配制浓度为0.035mg/ml、0.045mg/ml> 0.06mg/mk 0.072mg/ml 0.085mg/ml的标准溶液。以各标准溶液的浓度和对应峰面积绘制线 性图并求出回归方程，计算相关系数。

7、可接受标准相关系数不低于0.9994.0.4准确度准确度是指用该方法测定的结果与真实值接近的程度。通常用回收率()表示。 称取对照品及辅料适量配置成相当于对照品浓度的80% (0.048mg/ml)、100% (0.06mg/ml) . 120% (0.072mg/ml)的溶液各三份，在规定的色谱条件下测定。程序：按方法学项下方法配制80%、100%、120%的溶液样品溶液的配制0.048mg/ml (80%)溶液的制备称取头孑包替安酯对照品约14mg及相应的辅料20ml容量瓶屮，加稀释液溶解并稀释 至刻度，摇匀。精密量取续滤液5ml和5ml内标液置50ml量瓶屮，用稀释液稀释至刻 度，摇匀即可。制成约0.048mg/ml的溶液。0.060mg/ml (100%)溶液的制备称取头孑包替安酯对照品约18mg及相应的辅料20ml容量瓶中，加稀释液溶解并稀释 至刻度，摇匀。精密量取续滤液5ml和5ml内标液置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻 度，摇匀即可。制成约0.060mg/ml的溶液。0.072mg/ml (120%)溶液的制备称取头他替安酯对照品约22mg及相应的辅料20ml容量瓶中，加稀释液溶解并稀释 至刻度，摇匀。精密量取续滤液5ml和5ml内标液置50ml量瓶中，用稀释液稀释至刻 度，摇匀即可。制成约0.072mg/ml的溶液。可接受标准回收率应在98-10