专题2 微生物的培养与应用

1、考点考点1、微生物的实验室培养、微生物的实验室培养一、培养基的分类一、培养基的分类例：加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌；伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌例：加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌；伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌选择培养基的应用选择培养基的应用加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基分离固氮菌分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物分离自养型微生物加入氨基喋呤的培养基加入氨基喋呤的培养基分离杂交瘤

2、细胞分离杂交瘤细胞二、微生物的营养要素二、微生物的营养要素 1、有关微生物营养物质的叙述中，正确的是、有关微生物营养物质的叙述中，正确的是 a.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 b.凡碳源都能提供能量凡碳源都能提供能量 c.除水以外的无机物只能提供无机盐除水以外的无机物只能提供无机盐 d.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量d 2、如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：、如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答： （1）依物理性质，该培养基属于）依物理性质，该培养基属于培养基。培养基。依用途划分，则属于依用途划分，则属于培养基。培养基。 （2）根据培养基原料，所

3、培养微生物的同化作用）根据培养基原料，所培养微生物的同化作用类型是类型是，培养的微生物可能是，培养的微生物可能是。 （3）培养基中的碳源是）培养基中的碳源是。生长因子是。生长因子是。 （4）如何要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标，）如何要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标，至少要加入至少要加入和和，除去，除去。选择选择液体液体异养型异养型酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌ch2o无无琼脂琼脂伊红美蓝伊红美蓝青霉素青霉素三、无菌技术三、无菌技术灭菌方法灭菌方法要求要求适用范围适用范围灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 160170 12h100kpa 121 15-30min接种环的接种环

4、的灭菌灭菌培养皿、玻璃培养皿、玻璃棒的灭菌棒的灭菌培养基、无菌培养基、无菌水的灭菌水的灭菌四、培养基的制备过程四、培养基的制备过程称量溶化灭菌倒平板计算考点考点2、微生物的分离操作、微生物的分离操作以纯化大肠杆菌为例以纯化大肠杆菌为例一、菌落与菌苔一、菌落与菌苔 单个或少数同单个或少数同种细菌在固体培种细菌在固体培养基上大量繁殖养基上大量繁殖时，就会形成一时，就会形成一个肉眼可见的，个肉眼可见的，具有一定形态结具有一定形态结构的子细胞群体，构的子细胞群体，叫做菌落。叫做菌落。二、二、纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌的方的方法法平板划线法平板划线法二、二、纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌的方法的方法稀释涂布平板

5、法法稀释涂布平板法法3 3、研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌、研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是相关叙述错误的是 a. a.培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源 b. b.如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法 c. c.若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为惟一碳源若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为惟一碳源 d. d.使用平板划线法可以在上获得单菌落使

6、用平板划线法可以在上获得单菌落c4 4、微生物平板划线示意图。划线的顺序为、微生物平板划线示意图。划线的顺序为1234512345。下列操。下列操作方法正确的是作方法正确的是a.a.只有操作前将接种环放在火焰旁灼烧灭菌只有操作前将接种环放在火焰旁灼烧灭菌b.b.划线操作需在火焰上进行划线操作需在火焰上进行c.c.在在5 5区域中才可以得到所需菌落区域中才可以得到所需菌落d.d.在在1234512345区域中画线前后都要对接种环灭菌区域中画线前后都要对接种环灭菌d （1 1）鉴定分解尿素的细菌的方法：在以）鉴定分解尿素的细菌的方法：在以 为为唯一氮源的培养基加入唯一氮源的培养基加入 指示剂，指示

7、剂指示剂，指示剂若变红色，说明该菌种分解尿素。若变红色，说明该菌种分解尿素。 （2 2）鉴定纤维素分解菌的方法：利用）鉴定纤维素分解菌的方法：利用 染色染色法，如果培养基中出现法，如果培养基中出现 ，则说明含有纤维，则说明含有纤维素分解菌。素分解菌。考点考点3、微生物的鉴定与数目测定、微生物的鉴定与数目测定尿素尿素酚红酚红刚果红刚果红透明圈透明圈附加：纤维素酶是一种复合酶，至少包括附加：纤维素酶是一种复合酶，至少包括c c1 1、c cx x和葡萄糖和葡萄糖苷酶。苷酶。1 1、微生物的鉴定原理、微生物的鉴定原理稀释涂布平板法稀释涂布平板法 5 5、请回答下列与检验饮用水有关的问题：、请回答下列

8、与检验饮用水有关的问题： （1 1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量数量, ,这种方法称为这种方法称为 。下面四种菌。下面四种菌落分布图中，不可能由用该方法得到的是落分布图中，不可能由用该方法得到的是 。 a b c d a b c d （2 2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？组？ 。为什么？。为什么？

9、。稀释涂布平板法稀释涂布平板法d需要需要判定培养基是否被杂菌污染判定培养基是否被杂菌污染 请回答下列与检验饮用水有关的问题：请回答下列与检验饮用水有关的问题： （3 3）如分别取）如分别取0.1ml0.1ml已稀释已稀释10103 3倍的水样分别涂布倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为到大肠杆菌的菌落数分别为5555、5656、5757，则每升原，则每升原水样中大肠杆菌数为水样中大肠杆菌数为 。 （4 4）已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供）已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？5.6108个个通过无菌操作通过无菌操作，向试管内注入一定量待检水样，向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌的乳