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文档简介
1、第一章概论 首页习 题习题参考答案习 题名词解释简答题一、名词解释1. 灵敏度2. 误差3. 噪音4. 最小检测量5. 精度6. 可靠性7. 重复性8. 分辨率9. 测量范围10. 线性范围11. 响应时间12. 频率响应范围二、简答题1.学习临床检验仪器学课程的目的是什么?2.学习临床检验仪器学课程的基本要求是什么?3.临床检验仪器具有哪些特点?4.通常临床检验仪器的分类是从哪两个方面进行的?5.简述临床检验仪器的发展趋势。6 临床检验仪器常用的性能指标有哪些?7.临床检验仪器有哪些主要部件?8.临床检验仪器的维护应从哪几个方面考虑?9.根据哪些标准选用临床检验仪器?10.显示装置有何功能?
2、11.补偿装置有什么作用?49812.样品前处理系统的工作任务是什么?习题 参 考 答案一、名词解释:1.灵敏度: 检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。2.误差: 当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。3. 噪音: 检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围即为噪音。4.最小检测量: 检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如
3、含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。5.精度: 对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。6.可靠性: 仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。7.重复性: 在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固 有误差的精密度。8.分辨率: 仪器设备能感觉、识别或
4、探测的输入量(或能产生、能响应的输出量)的最小值。9.测量范围:在允许误差极限内仪器所能测出的被检测值的范围。10.线性范围: 输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围。11.响应时间: 表示从被检测量发生变化到仪器给出正确示值所经历的时间。12.频率响应范围: 为了获得足够精度的输出响应,仪器所允许的输入信号的频率范围。二、简答题:1. 学习临床检验仪器学课程的目的是什么? 答:培养和提高医学院校相关专业的各层次学生、实验室工作人员熟练掌握和使用各类现代化检验仪器,使之在疾病的诊断和治疗中发挥最佳的效能,成为相当急迫,重要的任务。因此,使各层次学生 和相关工
5、作人员了解和掌握名目繁多的检验仪器的性能质量,掌握各种常用检验仪器的工作原理、分类 结构、技术指标、使用方法、常见故障的排除、临床检验仪器中的计算机技术,关注其发展趋势及特点, 以使有限的仪器得到综合应用,为他们更好地从事临床检验工作打下坚实的基础,这就是学习临床检 验仪器学课程的目的。2. 学习临床检验仪器学课程的基本要求是什么?答: 学习临床检验仪器学课程的基本要求是:掌握主要临床检验仪器的基本概念和基本工作 原理、仪器的基本结构,掌握各类仪器的主要系统、构成部件及其功能,掌握仪器的主要应用及常见故 障的排除。3. 临床检验仪器具有哪些特点? 答:临床检验仪器具有以下特点:结构复杂、涉及的
6、技术领域广、技术先进、精度高、对使用环境要求严格。4. 通常临床检验仪器的分类是从哪两个方面进行的? 答:通常以临床检验的方法为主对临床检验仪器进行分类或以检验仪器的工作原理为主对临床检验仪器进行分类。5. 简述临床检验仪器的发展趋势。 答:由计算机技术和通信技术相结合而发展的计算机网络,形成了多用户共享高精度、高速度、多功能、高可靠性的检验仪器;临床检验仪器正朝着集大型机的处理能力和小型机的应变能力于一身,超 小型、多功能、低价格、更新换代频繁、床边和家庭型的方向迈进;模块式设计形成一个高质量多功能 的检验系统,实现了一机多用;生物传感器和芯片的应用将使检验仪器小型化,灵活多用,相应的检验
7、仪器正在不断出现和发展;专家系统技术更趋完善,使临床检验仪器具有更高级的智能;仪器更机器人 化;自动化水平更高。检验结果标准化;仪器更个性化;仪器小型便携化。6. 临床检验仪器常用的性能指标有哪些?答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高,可 靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。7. 临床检验仪器有哪些主要部件?3答:通常,临床检验仪器有取样装置、预处理系统、分离装置、检测器、信号处理系统、显示装置、 补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等主要部件。8. 临床检验仪器的维护应从哪几个方面考虑? 答:使用前,操作人员应认真阅读仪器操作说明书,熟
8、悉仪器性能,严格按照操作规程掌握正确的使用方法,才能使仪器始终保持在良好运行状态;应该有一个符合检验仪器使用标准的环境;应有良 好的供电以保证检验仪器的精度和稳定性;应当按照仪器说明书提供的方法和标准(图谱)对仪器定期进 行校验;应该认真做好仪器的工作记录。9. 根据哪些标准选用临床检验仪器?答:要求仪器的精度等级高、应用范围广、检测范围宽、稳定性好、灵敏度高、噪音小、响应时间 短等;要求仪器的检测速度快、检测参数多,结果准确可靠,可靠性好;用户操作程序界面全中文显示, 操作简便,快捷;有国内生产的配套试剂盒供应;器不失效的性能、寿命、可维修性和仪器的保存性能 好,如仪器的装配合理、材料先进、
9、采用标准件及同类产品通用零部件的程度高,售后维修服务好等。 能充分体现高效益、低成本。10. 显示装置有何功能? 答:显示装置的功能就是把检测结果显示出来。一般有模拟显示和数字显示两种。11. 补偿装置有什么作用? 答:补偿装置的作用是消除或降低客观条件或样品的状态对检测的影响,特别是样品的温度,环境的压力、温度的波动对检测结果的影响。12. 样品前处理系统的工作任务是什么? 答:样品前处理系统的工作任务是将标本分类、离心、分装、编排、运送、存储等,不仅用于生化分 析的样品处理,还可以用于免疫/血清、血液常规分析和尿液分析等各种标本的样品的分类和运送第二章显微镜技术和显微镜首页习题习题参考答案
10、习题名词解释选择题简答题一、名词解释1光学显微镜2荧光显微镜3、相衬显微镜4暗视野显微镜5偏光显微镜6激光扫描共聚焦显微镜7倒置显微镜8紫外光显微镜9电子显微镜10透射电子显微镜11扫描电子显微镜12超高压电子显微镜13扫描隧道电子显微镜14分辨率15放大率16数值孔径17显微摄影术18景深与焦长19视野20. 齐焦21像差22色差二、选择题【A 型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。1在光学显微镜下所观察到的细胞结构称为()1A显微结构 B超微结构 C亚显微结构 D分子结构 E微细结构2研究细胞的亚显微结构一般利用()A显微镜技术 B电子显微镜技术 C放射自显影技术 D离心
11、技术 E共焦激光扫描显微镜技术3研究组织或细胞显微结构的主要技术是() A显微镜技术B电镜技术 C离心技术 D电泳技术 E放射自显影技术4分离细胞内不同细胞器的主要技术是()A,显微镜技术 B电镜技术 C离心技术 D电泳技术 E放射自显影技术5用显微镜观察细胞时,应选择下列哪种目镜和物镜的组合在视野内所看到的细胞数目最多() A目镜 10×,物镜 4×B目镜 10×,物镜 10× C目镜 10×,物镜 20× D目镜 10×,物镜 40× E目镜 15×,物镜 40×6在物镜里增加一个相位板和在
12、聚光镜上增加一个环形光阑的显微镜是()A透射电镜 B扫描电镜 C荧光显微镜 D暗视野显微镜2E相衬显微镜7关于光学显微镜,下列有误的是() A是采用日光作光源,将微小物体形成放大影像的仪器 B细菌和线粒体是光镜能清晰可见的最小物体 C由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成 D可用于观察细胞的显微结构 E光学显微镜的分辨率由目镜决定8关于光学显微镜的使用,下列有误的是()A用显微镜观察标本时,应双眼同睁 B按照从低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行标本的观察 C使用油镜时,需在标本上滴上镜油 D使用油镜时,需将聚光器降至最低,光圈关至最小 E使用油镜时,不可一边在目镜中观察,一边上升载物台9适于观
13、察细胞复杂网络如内质网膜系统、细胞骨架系统的三维结构的显微镜是() A普通光学显微镜B荧光显微镜 C相衬显微镜 D激光扫描共聚焦显微镜 E暗视野显微镜10关于激光扫描共聚焦显微镜,下列有误的是()A以单色激光作为光源 B激光变成点光源后聚焦到标本成为点照明C点光源激光束在标本的整个焦平面进行光点扫描后在荧光屏上成像 D图像信息要经电脑三维重建处理E所用标本须经超薄切片11下面对透射电镜描述不正确的是() A利用泛光式电子束和透射电子成像 B观察细胞内部超微结构C发展最早D性能最完善 E景深长、图像立体感强12主要用于观察活细胞中有规则的纤维结构如纺锤丝、染色体以及纤维丝等构造的光学显微镜是()
14、A荧光显微镜 B相衬显微镜3C普通显微镜 D暗视野显微镜 E偏振光显微镜13关于相衬显微镜,下列有误的是()A利用了光的衍射和干涉特性 B可使相位差变成振幅差 C所观察的标本要经固定处理 D一般使用高压汞灯作光源 E装有环形光阑、相位板等部件14光学显微镜的分辨率(最小分辨距离)是() A0.1µmB0.2µm C0.3µm D0.4µm E0.5µm15关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是()A是光学显微镜的主要性能指标 B也可称为分辨本领 C与照明光的波长成反比 D指分辨出标本上两点间最小距离的能力 E显微镜的分辨率由物镜决定16分别使用光
15、镜的低倍镜和高倍镜观察同一细胞标本相,可发现在低倍镜下()A相较小、视野较暗 B相较小、视野较亮 C相较大、视野较暗 D相较大、视野较亮 E相及视野的亮度均不改变17适于观察小细胞或细胞群体复杂而精细的表面或断面的立体形态与结构的显微镜是() A普通光学显微镜B荧光显微镜 C相差显微镜 D扫描电子显微镜 E透射电镜18适于观察细胞内超微结构的显微镜是()4A透射电镜 B普通光学显微镜 C荧光显微镜 D相差显微镜 E暗视野显微镜19关于荧光显微镜,下列哪项有误()A其光源通常为高压汞灯或氙灯 B必需装备为激发滤片和压制滤片 C根据光化荧光的原理设计制造的 D可用于观察固定细胞和活细胞 E使用时应
16、在较明亮的环境中进行20关于电子显微镜,下列哪项有误()A 组织或细胞观察前均需经超薄切片 B分为透射式和扫描式两大类 C分辨率可达 0.3nm D利用电子束作照明源 E在荧光屏上成像21下列哪种显微镜需将标本进行超薄切片并经醋酸铀等染料染色后才能观察()A扫描式电子显微镜 B透射式电子显微镜 C扫描隧道显微镜 D荧光显微镜 E相差显微镜22电子散射少、对样品损伤小、可用于观察活细胞的电子显微镜是() A普通透射电镜B普通扫描电镜 C超高压电镜 D扫描透射电镜 E扫描隧道显微镜23关于透射式电镜,下列哪项叙述是错误的()A由德国科学家 Ruska 等发明 B以电子束作为光源 C电子透过标本后在
17、荧光屏上成像 D分辨率较高5E适于观察细胞的外观形貌24关于扫描式电镜,下列哪项有误() A 20 世纪 60 年代才正式问世 B景深长,成像具有强烈立体感C电子扫描标本使之产生二次电子,经收集放大后成像 D标本无需经超薄切片即可观察 E适于观察细胞的内部构造25适于观察细胞表面及断面超微结构三维图像的仪器是()A普通光镜 B荧光显微镜 C相差光镜 D扫描电镜 E透射电镜26适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是() A透射电镜B扫描电镜 C荧光显微镜 D倒置显微镜 E相差显微镜27要将视野内的物像从右侧移到中央,应向哪个方向移动标本()A左侧 B右侧 C上方 D下方 E以上都可以28当显微镜的目镜
18、为 10X,物镜为 10X 时,在视野直径范围内看到一行相连的 8 个细胞。若目镜不变, 物镜换成 40X 时,则在视野中可看到这行细胞中的()A2 个 B4 个 C16 个 D32 个 E64 个29收集轰击样品所产生的二次电子经转换放大后在荧屏上成像的显微镜是() A透射电镜6B扫描电镜 C荧光显微镜 D倒置显微镜 E相差显微镜30下列哪种组成不是荧光显微镜的结构元件() A激发光源B二组滤光片 C二色镜 D聚光镜 E环形光阑31用于透射电镜的超薄切片厚度通常为()A50 nm 100nm B0.2m C10mD2nmE100m32人们需要观察立体感很强的细胞内的三度(维)空间的微细结构,
19、需要()技术 A光镜技术B透射电镜 C扫描电镜 D超高压透射电镜 E免疫荧光镜技术33用荧光染料标记的抗体处理细胞后在荧光显微镜下对细胞中特殊分子进行定位属于()A放射自显影技术 B免疫荧光显微镜技术 C免疫电镜技术 D液相杂交技术 E原位杂交技术34关于超薄切片,下列()有误A厚度在 50nm100nm 的切片称为超薄切片 B通过超薄切片可将一个细胞切成 100 片200 片 C制备超薄切片需使用专门的器械超薄切片机 D超薄切片常用玻璃制成的刀切成 E组织细胞样品被切片之前常需双重固定但无需包埋735关于扫描隧道显微镜(STM),下列()叙述错误ASTM 是 IBM 苏黎世实验室的 Binn
20、ig 等人在 1981 年发明的 B为扫描探针显微镜的一种,具有高分辨本领 C仅可在真空条件下工作 D依靠一极细的金属针尖在标本表面扫描来探测标本的形貌 E可直接观察到 DNA、RNA 和蛋白等生物大分子36落射式荧光显微镜的吸收滤片应安装在() A激发滤片与分色镜之间 B物镜与分色镜之间 C光源与激发滤片之间 D分色镜与目镜之间E物镜与载玻片之间37下面哪一种措施与提高显微镜分辨能力无关() A使用波长较短的光源B使用折射率高的介质C扩大物镜直径 D使用放大倍率较高的目镜 E提高分辨本领38.透射电镜的反差取决于样品对()的散射能力 A二次电子B入射电子 C样品质量厚度 D样品重量 E样品性
21、质39某学生在显微镜下观察标本切片,当转动细调节螺旋时,有一部分细胞看得清晰,另一部分细胞较模糊,这是由于() A反光镜未调节好 B标本切得厚薄不均 C细调节螺旋未调节好 D显微镜物镜损坏 E聚光镜光圈大小不适合40仅仅反映固体样品表面形貌信息的物理信号是()A背散射电子 B二次电子8C吸收电子 D透射电子 E俄歇电子41如图所示,1、2 为物镜长度,3、4 为目镜长度,5、6 为观察时物镜与标本切片间距离,哪种组合情况下,显微镜的放大倍数最大()123456A1、3、5B2、4、6C2、3、5D2、4、5E2、3、442在光学显微镜下,观察透明的、染色较浅的细胞时,必须注意做到() A把光圈
22、缩小一些,使视野暗一些B把光圈开大一些,使视野暗一些C把光圈缩小一些,使视野亮一些 D把光圈开大一些,使视野亮一些 E以上全不是43在普通光学显微镜下,一个细小物体若被显微镜放大 50 倍,这里“被放大 50 倍”是指该细小物体的() A体积B表面积C像的面积 D长度或宽度 E像的长度或宽度44电子枪产生的电子是()A入射电子 B透射电子 C弹性散射电子 D二次电子 E俄歇电子945用来显示组织和细胞的内部超微结构像的电子为() A入射电子B透射电子 C弹性散射电子 D二次电子 E吸收电子46下面哪种电镜可以在观察结构的同时,对组织细胞内的元素成分进行分析() A透射电镜B扫描电镜 C扫描隧道
23、显微镜 D超高压透射电镜 E原子力显微镜47下面哪项不是超高压电子显微镜的优点()A可用于观察厚切片 B可以提高分辨率 C可提高图像质量 D结构复杂 E减少辐射损伤范围48电子枪由()组成 A阴极、阳极 B阴极、栅极 C阳极、栅极 D阴极、阳极、栅极 E正极、负极、栅极49二次电子检测系统不包括()A收集体 B显像管 C闪烁体 D光电倍增管 E视频放大器50扫描电镜的反差是由()决定的 A二次电子产率 B反射电子产率 C吸收电子产率10D俄歇电子产率 E特征 X 射线产率【X 型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上的正确答案。1物象在低倍镜(10×)下清晰可见,换高倍镜(40
24、15;)后看不见了,这是因为() A玻片放反了B高倍物镜故障 C物象不在视野正中央 D焦距没调好E 低倍物镜故障2在普通光镜上可用于调节视野内光线强弱的装置有() A通光孔B反光镜 C光阑 D聚光镜 E目镜3常用于观察细胞超微结构的仪器是()A荧光显微镜 B相衬显微镜 C扫描电镜 D透射电镜 E暗视野显微镜4普通光镜上决定放大倍数的部件有() A目镜B物镜 C反光镜 D聚光镜 E光阑5普通光镜上的下列物镜中哪些不能浸在香柏油中使用()A4×物镜 B10×物镜 C40×物镜 D45×物镜 E100×物镜6透射电镜所具有的特征有()11A分辨率高
25、B放大倍数高 C成像立体感强 D标本须超薄 E标本表面喷镀金属膜7扫描电镜的基本特征是()A可见细胞表面的三维形态 B成像立体感强 C标本须超薄 D标本表面喷镀金属膜 E放大倍数高8在电镜下所观察到的细胞结构称为() A显微结构B超微结构 C亚显微结构 D微细结构 E电镜结构9电镜标本制备时常用的固定剂()A锇酸 B戊二醛 C丙酮 D联苯胺 E过碘酸10荧光显微镜以紫外线为光源,通常采用落射式照明,是因为() A如采用柯拉式照明,紫外线会伤害人的眼睛 B紫外线穿透能力较弱 C紫外线可通过镜筒中安装的双向反光镜D视野背景很暗 E整个视场均匀照明11. 适于观察无色透明活细胞微细结构的光学显微镜是
26、() A相衬显微镜B暗视野显微镜C荧光显徽镜 D偏振光显微镜12E普通显微镜三、简答题1简述光学显微镜的工作原理。2简述光学显微镜的结构组成。3物镜和目镜在工作条件和技术要求上有哪些不同?4光学显微镜的性能参数有哪些?这些参数间的影响和制约关系如何?5简述医学检验中常用的荧光显微镜的原理、结构及用途。6. 简述荧光显微镜的使用注意事项。7简述相衬显微镜的工作原理、结构特点及其主要用途。8简述偏光显微镜的结构特点、工作原理及其主要用途。9简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。10简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点在医学领域的主要用途。11. 电镜的基本类型有哪些?各有什么特点?12扫描电镜有哪些特
27、点?13电镜由哪几个主要部分组成?对成像质量影响较大的部件有哪些?14光学显微镜与电子显微镜的主要区别是什么?15扫描隧道显微镜是纳米生物学研究工具,为何能用来观察活的生物样品?习题参考答案一、名词解释1光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物形成放大影像的精密光学仪器,由光学系统、机械装 置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成,其核心是物镜和目镜中的两组透镜,其放大成像的 机理是先由物镜形成放大的实像,再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。2荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。3相衬显微镜:是把透
28、过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,用于观 察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。4暗视野显微镜:是利用特殊的聚光镜使照明光线斜射而不能直接进入物镜,形成暗视野,那些经过标 本散射的光线才能进入物镜放大,在黑暗的背景中呈现标本明亮的轮廓的显微镜。5偏光显微镜:是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光) 的晶态、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。136激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点, 使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像,而焦面以外的漫射光不参加成像,改变焦平面,可获得
29、细胞或原 标本不同层次的图像,从而得到样品的三维结构图像。7倒置显微镜:当观测活体标本时,需要把照明系统放在载物台及标本之上,而把物镜组放在载物台器皿下进行放大成像的显微镜,又称生物培养显微镜。8紫外光显微镜:使用紫外光源进行照明的显微镜。9电子显微镜:简称电镜,是利用波长很短的电子束作为照明光源,通过电子流对细胞样品的透射或反 射及电磁透镜的多级放大而在荧光屏上成像的大型精密仪器。10透射电子显微镜:简称透射电镜,是利用电子枪发出的高速电子束照射超薄的生物样品,收集透射 电子流经电磁透镜的多级放大后成像的仪器。11扫描电子显微镜:简称扫描电镜,是一种主要用于观察组织细胞表面或细胞内断面的电镜
30、。其工作原理是从电子枪发出的电子束经电磁聚光镜汇聚成极细的电子探针,并在细胞样品表面逐点扫描,收集样品 表面产生的二次电子再经转换、放大,最终在荧光屏同步扫描成像。12超高压电子显微镜:生成电子束的电压超过 500kV 的电子显微镜。13扫描隧道电子显微镜:当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时,此处电子云重叠, 外加电压(2mV2V),针尖与样品之间产生隧道效应而有电子逸出,形成隧道电流,通过隧道电流获取显微 图像的电子显微镜。14分辨率:也称分辨本领,指分辨物体细微结构的的能力。15放大率:或称放大倍数是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小 的比值。16
31、数值孔径:又叫镜口率,是物体与物镜间媒质的折射率 n 与物镜孔径角的一半()正弦值的乘 积。17显微摄影术:是利用显微照相装置,把显微镜视野中所观察到物件的细微结构真实地记录下来, 以供进一步分析研究之用的一种技术。18景深与焦长:在成一幅清晰像的前提下,像平面不变,景物沿光轴前后移动的距离称“景深”。景物不动,像平面沿光轴前后移动的距离称“焦长”。19视野:视野又称视场,是指通过显微镜所能看到的标本所在空间的范围。20. 齐焦:当某一物镜调焦清晰后,变换其它物镜时,也能基本保证焦距适当、成像清晰。21. 像差:光学仪器不可能使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着高斯光学的理想光路成像, 从而
32、导致成像在形状方面的缺陷,称之为像差。22. 色差: 是一种由白光或复色光在即使严格满足高斯条件下也存在的特殊类型的成像缺陷。当用 白光或复色光经透镜成像时,会因各种色光存在着光程差而造成颜色不同、位置不重合、大小不一致的 不同成像效果,从而造成像和物体的较大失真。二、选择题14【A 型题】1A2B3A4C5A6E7E8D9D10E11E12E13C14B15C16B17D18A19E20A21B22C23E24E25D26D27B28A29B30E31A32D33B34E35C36D37D38B39B40B41C42A43D44A45.B46.C47.D48.D49.A50.A【X 型题】1
33、ABCD2BCD3CD4AB5ABCD6ABD7ABD8BC9AB10BE11.ACD三、简答题1简述光学显微镜的工作原理。 答:显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统,是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜,而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜 作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大, 得到最大放大效果的倒立的虚 像,位于人眼的明视距离处。2简述光学显微镜的结构组成。 答:基本结构包括光学系统和机械系统两大部分。光学系统是显微
34、镜的主体部分,包括物镜、目镜、聚光镜及反光镜等组成的照明装置。机械系统是为了保证光学系统的成像而配置的,包括调焦系统、载 物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件。照明设置的主要部件有光源、滤 光器、聚光镜和玻片等。3物镜和目镜在工作条件和技术要求上有哪些不同?答:显微镜的物镜、目镜各由数只组成一套,物镜和目镜间的不同组合构成不同的放大倍率。物镜 采用转换器调换,显微镜的物镜应满足齐焦要求,即调换物镜后,不需要重新调焦就能看到物体的像。 为此,不同倍率物镜的共轭距应为常数。目镜采用插入式调换,目镜的相对孔径很小,一般为 1/201/40。 显微镜的目镜是在窄光束、大视场的条
35、件下工作的。4光学显微镜的性能参数有哪些?这些参数间的影响和制约关系如何?答:显微镜的性能参数主要有放大率、数值孔径、分辨率、视场、景深、镜像亮度、镜像清晰度、 工作距离和机械筒长。显微镜的数值孔径与其放大率成正比,与分辨率、景深成反比,它的平方与图像 亮度成正比。因此,使用较大数值孔径的物镜,其放大率和分辨本领较高,但视场、景深、工作距离较15小。5简述医学检验中常用的荧光显微镜的原理、结构及用途。 答:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。荧光显微镜是由光源、滤色系统和光学系统等主要部件组成。荧光显微镜与普通光学显微镜主要区 别在
36、于光源和滤光片不同。通常用高压汞灯作为光源,可发出紫外线和短波长的可见光;滤光片有二组, 第一组称激发滤片,位于光源和标本之间,仅允许能激发标本产生荧光的光通过(如紫外线);第二组是 阻断滤片,位于标本与目镜之间,可把剩余的紫外线吸收掉,只让激发出的荧光通过,这样既有利于增 强反差,又可保护眼睛免受紫外线的损伤。光学系统主要有反光镜、聚光镜、目镜、物镜、照明系统等 组成。荧光显微镜可用于观察检测细胞中能与荧光染料特异结合的特殊蛋白、核酸等,其标本染色简便、荧光图像色彩鲜亮,而且敏感度较高。6. 简述荧光显微镜的使用注意事项。 答:使用荧光显微镜时应注意以下事项:观察对象必须是可自发荧光或已被荧
37、光染料染色的标本;载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光杂质;选用最好的滤片组;荧光标本一般不能长久保存,若持续长霎时间照射(尤其是紫外线)易很快褪色。因此,如有条件则应先照相存档,再仔细观察标本;启动高压汞灯后,不得在 15 分钟内将其关闭,一经关闭,必须待汞灯冷却后方可再开启。严禁频繁 开闭,否则,会大大降低汞灯的寿命;若暂不观察标本时,可拉过阻光光帘阻挡光线。这样,即可避 免对标本不必要的长时间照射,又减少了开闭汞灯的频率和次数;较长时间观察荧光标本时,最好戴 能阻挡紫外光的护目镜,加强对眼睛的保护。7简述相衬显微镜的工作原理、结构特点及其主要用途。 答:相衬显微镜的基本原理是把透过标本的可
38、见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射,偏离了原来的光路,同时被延迟了 1/4(波长),如果再增加或减少 1/4,则光程差变为 1/2,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减小, 提高反差。相衬显微镜的结构特点:环形光阑(annulardiaphragm)位于光源与聚光镜之间,作用是使 透过聚光镜的光线形成空心光锥,聚焦到标本上;相位板(annular phaseplate)在物镜中加了涂 有氟化镁的相位板,可将直射光或衍射光的相位推迟 1/4,并能吸收直射光(背景光)的光强,使直射 光与衍射光的光强趋于一致,能更好地突出干涉的效果。相
39、衬显微镜主要用于观察活细胞和未染色的标本。8简述偏光显微镜的结构特点、工作原理及其主要用途。 答:是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光)的晶态、液晶态物质进行观察和研究的重要光学仪器。 偏光显微镜是在一般显微镜的基础上增添了使普通光线转变成偏振光和检测偏振光的装置或观察干16涉图样的特殊透镜,即光源前有偏振片(起偏器),使进入显微镜的光线为偏振光,镜筒中有检偏器(一 个偏振方向与起偏器垂直的起偏器),这种显微镜的载物台是可以旋转的。当载物台无样品时,无论如 何旋转载物台,由于两个偏振片是垂直的,显微镜里看不到光线。而放入旋光性物质后,由于光线通过 这类物
40、质时发生偏转,因此旋转载物台便能检测到这种物体。移相装置是偏光显微镜在使用过程中不可 缺少的附件。全波片、半波片及 1/4 波片可以使通过波片的偏振光分别延迟 2、 和 /2 的相位。 而补偿器则可连续调节使通过的偏振光相位发生连续改变。移相装置对观察光的偏振性质是十分必要 的。利用偏光显微镜可以清楚地观察到纤维丝、纺锤体、胶原、染色体、卵巢、骨骼、毛发、活细胞的结晶或液晶态的内含物、神经纤维、肌肉纤维等的细微结构等。9简述激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。 答:激光扫描共聚焦显微镜利用单色激光扫描束经过照明针孔形成点光源,对标本内焦平面上的每一点进行扫描,标本上的被照射点,在检测器的检测针孔处
41、成像,由检测针孔后的光电倍增管逐点或逐 线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像,照明针孔与检测针孔相对于物镜焦平面是共轭的。 焦平面的点同时聚焦于照明针孔和检测针孔,焦平面以外的点不会在检测针孔处成像,这样得到的共聚 焦图像是标本的光学横断面,克服了普通荧光显微镜图像模糊的缺点。另外在显微镜的载物台上加一个 微量步进马达,可使载物台沿着 Z 轴上下移动,将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上, 样品的不同层面的图像都能清楚地显示,成为连续的光切图像。10简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点及其在医学领域的主要用途。答:激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,利用
42、计算机进行图像处理, 使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。另外在其载物台上加 一个微量步进马达,可使载物台沿着 Z 轴上下移动,将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面 上,样品的不同层面的图像都能清楚地显示,成为连续的光切图像。激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)具有高灵敏度、高分辨率、高放大率等特点。在医学领域主要用于细胞三维重建、细胞定量荧光测定、细胞内钙离子、pH 值和其它 离子的动态分析、细胞间通讯和膜的流动性等过程的研究。11. 电镜的基本类型有哪些?各有什么特点? 答:电镜的
43、基本类型有透射电子显微镜与扫描电子显微镜。射电子显微镜与扫描电子显微镜都用于放大与分辨微小结构,这两种技术通过标本对电子束的影响来探测标本结构。透射电子显微镜的电子束 穿过标本,聚焦成像于屏幕或显像屏上,扫描电子显微镜的电子束在标本表面进行扫描,反射的电子聚 焦成像于屏幕或显像屏。透射电子显微镜用于研究超薄切片标本,有极高分辨率,可给出细微的胞内结 构。扫描电子显微镜可以反映未切片标本的表面特征。12扫描电镜与透射电镜相比有哪些特点?答: 能够直接观察样品表面的结构,样品的尺寸可大至 120mm×80mm×50mm; 样品制备过程 简单,不用切成薄片;样品可以在样品室中作三
44、度空间的平移和旋转,因此,可以从各种角度对样品17进行观察;景深大,图像富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍,比透射电镜大几十倍;图像的放大范围广,分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍,它基本上包括了从放大镜、光学显 微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介于光学显微镜与透射电镜之间,可达 3nm;电子束对样品的 损伤与污染程度较小; 在观察形貌的同时,还可利用从样品发出的其他信号作微区成分分析。13电镜由哪几个主要部分组成?对成像质量影响较大的部件有哪些? 电子显微镜主要由电子光学系统(电子透镜和电子枪)、真空系统、供电系统、机械系统和观察显示系统等几部分组成。 对成像质量影响较大的
45、部件有电子透镜和电子枪。电子透镜存在各种像差,这是影响成像质量的主要因素。在实际设计中,是通过适当缩小口径、提高加速电压、增大电极圆筒或线圈直径及减低放大率 来减少球差,通过降低电子的初速度、提高加速电压和稳定电源电压来减少色差的。14光学显微镜与电子显微镜的主要区别是什么?答:照明源不同。电镜所用的照明源是电子枪发出的电子流,而光镜的照明源是可见光。由于电 子流的波长远短于光波波长,故电镜的放大及分辨率显著高于光镜。透镜不同。电镜中起放大作用的 物镜是电磁透镜,而光镜的物镜则是玻璃磨制而成的光学透镜。电镜中的电磁透镜共有三组,分别与光 镜中聚光镜、物镜和目镜的功能相当。成像原理不同。在电镜中
46、,作用于被检样品的电子束经电磁透 镜放大后打到荧光屏上成像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理是,电子束作用于被 检样品时,入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射,由于样品不同部位对电子有不同散射度,故样品 电子像以浓淡呈现。而光镜中样品的物像以亮度差呈现,它是由被检样品的不同结构吸收光线多少的不 同所造成。所用标本制备方式不同。电镜观察所用组织细胞标本的制备程序较复杂,技术难度和费用 都较高,在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的试剂和操作,最后还需将包埋的组织块切成超 薄标本片。而光镜观察的标本则一般置于载玻片上,如细胞涂片标本,细胞滴片标本等。15扫描隧道显微镜是纳米生物学
47、研究工具,为何能用来观察活的生物样品?答:扫描隧道显微镜可在真空、大气、常温等不同环境下工作,甚至可将样品浸在水和其它溶液中, 不需要特别的制样技术。这些特点特别适用于研究生物样品和在不同实验条件下对样品表面的评价。由 于没有高能电子束,探测过程对样品表面没有破坏作用(如辐射, 热损伤等),所以能对生理状态下生 物大分子和活细胞膜表面的结构进行研究,样品不会受到损伤而保持完好。18第三章离心技术与离心机首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1离心现象2重力沉降3沉降速度4扩散现象5解释 R·C·F6解释沉降系数7K 系数8最大转速9最大离心力10最大容量1
48、1调速范围12温度控制范围13工作电压14电源功率二、选择题【A 型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案(最佳答案)。1物体在离心力场中表现的沉降运动现象是指() A向心现象B离心现象 C离心力 D向心技术1E失重现象2应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为() A向心现象B离心现象 C离心技术 D向心技术 E失重现象3实现离心技术的仪器是() A电泳仪B离心机 C色谱仪 D生化分析仪 E显微镜4当物体所受外力小于圆周运动所需要的向心力时,物体将作() A向心运动B匀速圆周运动 C离心运动 D变速圆周运动 E保持不动5利用不同的粒子在离心场中沉降的差别,在同一离心条件下,通过不断增加相
49、对离心力,使一个非 均匀混合液内大小、形状不同的粒子分布沉淀的离心方法是()A差速离心法 B速率区带离心法 C等密度区带离心法 D高速离心法 E超速离心法6在强大离心力作用下,单位时间内物质运动的距离称为() A沉降运动B重力沉降 C沉降速度2D离心技术 E向心力作用7在介质中,由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要是由于密度差引起的,这种现象称为() A数量极移动B扩散现象 C细胞悬浮 D分离沉降 E重力场作用8相对离心力是() A在离心力场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数 B在离心力场中,作用于颗粒的地球重力相当于离心力的倍数 C在离心力场中,作用于颗粒的离心力与地球重力的乘
50、积 D在离心力场中,作用于颗粒的离心力与地球重力的和 E在离心力场中,作用于颗粒的离心力与地球重力的差9单位离心力场下的沉降速度是指() A向心速度B离心速度 C沉降系数 D上浮速度 E下沉速度10沉降系数与样品颗粒的质量或密度的关系,下列叙述中正确的是() A质量和密度越大,沉降系数越大B质量越小,沉降系数越大 C质量或密度与沉降系数无关 D密度越大,沉降系数越小 E质量和密度越小,沉降系数越大11利用样品中各组份的沉降系数不同而进行分离的方法称为() A差速离心法B等密度区带离心法 C超速离心法3D高速离心法 E沉降平衡离心法12密度梯度离心法又称为 () A分离离心法B组份分离法 C区带
51、离心法 D低速离心法 E高速离心法13差速离心法和速率区带离心法进行分离时,主要的根据是不同样品组份的() A密度B重力 C沉降系数 D体积 E形状14在梯度液中不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内形成几条分开的样品区带,达到彼此分离 的目的,这种方法是()A差速离心法 B密度梯度离心法 C速率区带离心法 D等密度区带离心法 E分析离心法15根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是() A差速离心法B密度梯度分析离心法 C速率区带离心法 D等密度区带离心法 E分析离心法16Percoll 分离液从外周血中分离单个核细胞的分离方法属于() A差速离心法B速率区带离心法4C等密度区带离心
52、法 D分析离心法 E分析超速离心法17速率区带法要求样品粒子的密度与梯度液柱中任一点密度的关系必须是() A大于B大于等于 C等于 D小于等于 E小于18下列转头标识代表固定角转头的是() AFABV CSW DCF EZ19等密度区带离心法对样品进行分离和纯化主要是利用不同的() A质量B密度 C沉降系数 D体积 E分子大小20等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是() A液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度 B液柱顶部的密度明显大于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度 C液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显小于样品组份的密度 D液柱顶部的密度明显大于样品组份的密度,液柱底部的密度明显小于样品组份的密度 E液柱顶部的密度明显等于样品组份的密度,液柱底部的密度明显等于样品组份的密度21低速离心机可达到的最大转速是() A1000B40005C6000D10000E2000022高速离心机可达到的
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