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1、精品文档交流噬菌休侵染细菌的实验误差分析贵州省思南中学勾华强在噬菌体侵染细菌的实验中,赫尔希和蔡斯分别用35S S和32P P标 记的T T2噬菌体侵染大肠杆菌,在理论上,用3535S S标记的T T2噬菌体侵染大肠 杆菌后,上清液具有很高的放射性,下层沉淀物中不含放射性。用 32P P标 记的噬菌体侵染大肠杆菌后,上清液中不含放射性,下层沉淀物中具有很 高的放射性;而实际上,实验的最终结果显示:用35S S标记的T T2噬菌体侵 染大肠杆菌后,在离心的下层沉淀物中,具有一定的放射性,而上清液中 的放射性强度比理论值略低。用32P P标记的T T2噬菌体侵染大肠杆菌后,在 离心的上层清液中,具
2、有一定的放射性,而下层沉淀物中的放射性强度比 理论值略低。在此实验中,是什么原因导致实验数据与理论数据之间存在着误差呢?我们不妨来对此实验过程进行一下误差分析:一、误差的主要来源:(一) 35S标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌的误差来源:1 1、在实验中,5 5S S标记的T T2噬菌体与大肠杆菌混合培养后,在搅 拌器中搅拌不充分,使吸附在大肠杆菌外被35S标记的噬菌体蛋白质外壳 没有与大肠杆菌完全分离开,所以离心后下层沉淀物中存在放射性,而上 清液中的放射性比理论值略低。精品文档交流2 2、在实验中,被35S S标记的一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌 细胞内,经离心后少量存在于沉淀物中,使沉淀物中
3、出现放射性,而上清 液中的放射性比理论值略低。(二) 32P标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌的误差来源:1 1、在实验中,32P P标记的噬菌体和大肠杆菌混合培养的时间过长, 噬菌体在大肠杆菌细胞内增殖后释放出来,经离心后分布于上清液,使上 清液出现放射性,而下层的放射性强度比理论值略低。2 2、在实验中,仍然有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内, 经离心后少量分布于上清液中,使上清液出现放射性,而下层沉淀物中的 放射性强度比理论值略低。二、减小误差的主要方法:在此实验中要减小实验数据和理论数据之间的误差,应注意以 下几点。1 1、用被35S S和32P P标记的T T2噬菌体侵染大肠杆菌时,要
4、控制好条 件,使之让T T2噬菌体处于最适于侵染的环境中,达到充分侵染的目的。2 2、严格控制好从噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离的 时间,时间过短未充分侵染,时间过长侵染进入大肠杆菌细胞内的噬菌体 增殖后释放出来,都会使实验误差增大,故严格控制好时间是减小误差的 精品文档交流关键因素之一。3 3、在搅拌器中搅拌时一定要迅速、充分,使被35S S标记的噬菌 体蛋白质外壳与大肠杆菌完全分离开,减小误差。综合练习题:在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中,用32P P 标记的噬菌体侵染大肠杆菌,在理论上,上清液中不含放射性,下层沉淀 物中具有很高的放射性;而实际上,实验的最终结果显示:在离心上
5、层液 体中,也具有一定的放射性,而下层的放射性强度比理论值略低。(1 1)在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中,用32P P标记噬菌体的DNADNA所体现的实验方法是。(2 2)在理论上,上层液体放射性应该为0 0,其原因(3 3)由于实验数据和理论数据之间有较大的误差,由此对实验过程进行误差分析:a a、在实验中,从噬菌体和大肠杆菌混合培养,到用离心机分离,这一段时间如果过长,会使上层液的放射性含量,其原因b b、在实验中,如果有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内, 是否是误差的来源呢?。理由是:精品文档交流(4 4)噬菌体侵染细菌实验证明了。(5 5)请设计一个方法,来大量制备用35S S标记的噬菌体(简要说明)。答案:(1 1)同位素标记法(同位素示踪法)(2 2)噬菌体将含32P P的DNADNA全部注入到大肠杆菌内(3 3)a a、升高;噬菌体在大肠杆功菌内增 殖后释放出来,经离心后分布于上清液。b b是;没有侵入大肠杆菌的噬 菌体经离心后分布于上清液中,使上清液出现放射性(4 4)DANDAN是遗传物质(5 5)先用35S S的
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