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文档简介

1、蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作 蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质结构蛋白质结构 ）蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作聚丙烯酰胺凝胶（polyacrylamide gel，PAG） 丙烯酰胺单体和甲叉双丙烯酰胺交联剂在催化剂(如过硫酸铵，TEMED等)作用下形成的凝胶。凝胶孔径大小可以通过制备时所使用的浓度和交联度控制。 聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE） 利用聚丙烯酰胺形成的凝胶对大分子生物物质（如核酸、蛋白质）通过附加电场使分子不同的按照分子量大小在凝胶中得到分离。 蛋白质的聚丙烯凝胶电泳

2、类型： 按蛋白质变性与否分为变性电泳和非变性电泳； 按凝胶浓度梯度分为不连续电泳与连续电泳； 按电泳的向性分为单向电泳与双向电泳。蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作 蛋白质电泳与操作SDS-PAGE分离分离胶浓度胶浓度最佳分离范最佳分离范 围围6%胶50-150kD8%胶30-90kD10%胶20-80kD12%胶12-60kD15%胶10-40kD蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作试剂名称配制10ml不同浓度分离胶试剂用量/ml配制5ml浓缩胶试剂用量5%7.5%10%15%3%分离胶贮液（30%Acr-0.8%Bis)1.652.503.335.00-4X 分离胶缓冲液（pH8.8Tris-HCl）2.502.502.502.50-浓缩胶贮液（10%Acr-0.5%Bis）-1.54X 浓缩胶缓冲液（pH6.8 Tris-HCl）-1.2510% SDS 0.100.100.100.100.51%TEMED 1.001.001.001.001.00ddH2O 4.753.903.071.44.60混匀后，置真空干燥器中，抽气10min10%AP0.050.050.050.050.025蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作蛋白质电

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