第五章生物反应器

1、第五章第五章 生物反应器生物反应器 在生物反应过程中，生物反应器具有中心的作用，它是连接在生物反应过程中，生物反应器具有中心的作用，它是连接 原料和产物的桥梁。原料和产物的桥梁。 生化工程中几乎所有的内容都是围绕生物反应进行的。生化工程中几乎所有的内容都是围绕生物反应进行的。 生物反应器的设计和操作，是生物工程中的一个极其重要的生物反应器的设计和操作，是生物工程中的一个极其重要的 问题，它对产品的质量和成本有很大的影响。问题，它对产品的质量和成本有很大的影响。 据统计，生化工业有几百个产品（每年的产值上千亿美元），据统计，生化工业有几百个产品（每年的产值上千亿美元）， 产品主要涉及到医药工业，

2、化学工业，农产品加工工业。生产品主要涉及到医药工业，化学工业，农产品加工工业。生 物反应器要适应这众多的生产过程，在形状，大小和操作方物反应器要适应这众多的生产过程，在形状，大小和操作方 式上多种多样。但生物反应器设计的目标是一个，既保证产式上多种多样。但生物反应器设计的目标是一个，既保证产 品质量的前提下，使产品成本最小。品质量的前提下，使产品成本最小。 原料成本、操作成本、投资成本原料成本、操作成本、投资成本 酒精生产酒精生产62%62%、26%26%、12%12%； 青霉素生产青霉素生产35%35%、38%38%、22%22%； 产品的成本包括：产品的成本包括： 不变成本（工资、折旧、修

3、理、管理等）；不变成本（工资、折旧、修理、管理等）； 可变成本（水、电、气、消耗的原料等）；可变成本（水、电、气、消耗的原料等）； 原料成本在总的成本中占的比例较大，和反应器有关的原料成本在总的成本中占的比例较大，和反应器有关的 是操作成本和投资成本。在操作成本中，动力消耗占主是操作成本和投资成本。在操作成本中，动力消耗占主 要方面。要方面。 因此在反应器的设计中，在满足工艺要求的前提下，节因此在反应器的设计中，在满足工艺要求的前提下，节 能是一个重要问题。能是一个重要问题。 生物反应器与化学反应器在使用中的主要不同点生物反应器与化学反应器在使用中的主要不同点 是 生 物 （ 酶 除 外 ）

4、反 应 都 以是 生 物 （ 酶 除 外 ） 反 应 都 以 “ 自 催 化自 催 化 ” （Autocalalysis) )方式进行，即在目的产物生成的过方式进行，即在目的产物生成的过 程中生物自身要生长繁殖。程中生物自身要生长繁殖。 生物反应器的作用就是为生物体代谢提供一个优生物反应器的作用就是为生物体代谢提供一个优 化的物理及化学环境，使生物体能更快更好地生长，化的物理及化学环境，使生物体能更快更好地生长， 得到更多需要的生物量或代谢产物。得到更多需要的生物量或代谢产物。 一、生物反应器概述一、生物反应器概述 生物反应器的操作特性生物反应器的操作特性 反应器类型反应器类型 pHpH 控制

5、控制 温度温度 控制控制 工业重要特性工业重要特性 主要应用领域主要应用领域 批式批式( (通用罐通用罐) ) 连续搅拌罐式连续搅拌罐式 气升式反应器气升式反应器 鼓泡式反应器鼓泡式反应器 自吸式反应器自吸式反应器 通风制曲设备通风制曲设备 嫌气反应器嫌气反应器 动植物细胞用动植物细胞用 反应器反应器 光合反应器光合反应器 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 难控难控 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 如需如需 人事费用高人事费用高 流速受冲出限制流速受冲出限制 空压机出口压力空压机出口压力 要高要高 可

6、采用鼓风机可采用鼓风机 需转子高速旋转需转子高速旋转 人事费用高人事费用高 无需通风设备无需通风设备 剪切应力小剪切应力小 需光源需光源 大多数工业生产大多数工业生产 污水处理、污水处理、SCPSCP生产等生产等 有机酸有机酸, ,如柠檬酸生产等如柠檬酸生产等 面包酵母等生产面包酵母等生产 乙酸、酵母等生产乙酸、酵母等生产 麸曲、酶制剂和麦芽生产等麸曲、酶制剂和麦芽生产等 酒精、啤酒等生产酒精、啤酒等生产 杂交瘤单克隆抗体、烟草细胞杂交瘤单克隆抗体、烟草细胞 培养等培养等 微藻等生产微藻等生产 生物反应器设计和操作的限制因素生物反应器设计和操作的限制因素 反应器生产能力（反应器生产能力（g/L

7、h）主要取决于两方面的因素：）主要取决于两方面的因素： 1生物催化剂（酶，微生物）的浓度和比活力；生物催化剂（酶，微生物）的浓度和比活力； 2反应器的传质和传热能力；反应器的传质和传热能力； 当生物催化剂浓度较低但比活力也较低时，生物催当生物催化剂浓度较低但比活力也较低时，生物催 化剂的因素是反应器生产能力的限制因素；化剂的因素是反应器生产能力的限制因素； 但是生物催化剂的浓度较高且比活力较高时，反应但是生物催化剂的浓度较高且比活力较高时，反应 器传质和传热能力就成为提高反应器生产能力的限器传质和传热能力就成为提高反应器生产能力的限 制因素。制因素。 生物反应器设计的基本原理生物反应器设计的基

8、本原理 生物反应器选型与设计的要点生物反应器选型与设计的要点 1 1、选择适宜的生物催化剂。这包括要了解产物在生物反、选择适宜的生物催化剂。这包括要了解产物在生物反 应的哪一阶段大量生成、适宜的应的哪一阶段大量生成、适宜的pHpH和温度，是否好氧和和温度，是否好氧和 易受杂菌污染等。易受杂菌污染等。 2 2、确定适宜的反应器形式。、确定适宜的反应器形式。 3 3、确定反应器规模、几何尺寸、操作变量等。、确定反应器规模、几何尺寸、操作变量等。 4 4、传热面积的计算。、传热面积的计算。 5 5、通风与搅拌装置的设计计算。、通风与搅拌装置的设计计算。 6 6、材料的选择与确保无菌操作的设计。、材料

9、的选择与确保无菌操作的设计。 7 7、检验与控制装置。、检验与控制装置。 8 8、安全性。、安全性。 9 9、经济性。、经济性。 生物反应器中的混合生物反应器中的混合 混合过程的分类混合过程的分类 类类 型型 说说 明明 应应 用用 实实 例例 气气液液 液液固固 固固固固 液液液液 液液液液 液体流动液体流动 气、液接触混合气、液接触混合 固相颗粒在液相中固相颗粒在液相中 悬浮悬浮 固相间混合固相间混合 互溶液体互溶液体 不互溶液体不互溶液体 传热传热 液相好氧发酵，如味精、抗生素等发酵液相好氧发酵，如味精、抗生素等发酵 固定化生物催化剂的应用、絮凝酵母生固定化生物催化剂的应用、絮凝酵母生

10、产酒精等产酒精等 固态发酵生产前的拌料固态发酵生产前的拌料 发酵或提取操作发酵或提取操作 双液相发酵与萃取过程双液相发酵与萃取过程 反应器中的换热器反应器中的换热器 生物反应器发展的趋势和未来方向生物反应器发展的趋势和未来方向 1、开发活力高和选择性高的生物催化剂将继续占主要地位。、开发活力高和选择性高的生物催化剂将继续占主要地位。 主要途径是利用基因工程技术改变酶的初级结构，定向改造主要途径是利用基因工程技术改变酶的初级结构，定向改造 生物细胞，改进酶和细胞的固定化技术，得到更多的酶活性生物细胞，改进酶和细胞的固定化技术，得到更多的酶活性 回收，更长的使用寿命。回收，更长的使用寿命。 2、改

11、进生物反应器热量、质量传递的方法、改进生物反应器热量、质量传递的方法 随生物催化剂比活力的提高，生物反应器的性能受传质传热随生物催化剂比活力的提高，生物反应器的性能受传质传热 的限制就急需解决，必须改进生物反应器传质传热的方法和的限制就急需解决，必须改进生物反应器传质传热的方法和 设施。设施。 3、生物反应器正向大型化和自动化方向发展、生物反应器正向大型化和自动化方向发展 西德西德SCP生产反应器最大体积达生产反应器最大体积达2300 m3 （高（高60m ，直径，直径 7m ），），England 废水处理反应器最大体积达到废水处理反应器最大体积达到27000 m3。国。国 内内Biorea

12、ctor最大体积在最大体积在200300 m3之间。反应器体积的放大之间。反应器体积的放大 降低了操作成本，但大型反应器的设计还存在一定的技术问降低了操作成本，但大型反应器的设计还存在一定的技术问 题。题。 4、一些特殊用途生物反应器得到较快的应用和开发。、一些特殊用途生物反应器得到较快的应用和开发。 例如，动物和植物细胞培养用反应器，固体发酵反应器，边例如，动物和植物细胞培养用反应器，固体发酵反应器，边 发酵边分离的特殊反应器都得到了不同程度的发展。发酵边分离的特殊反应器都得到了不同程度的发展。 由于生化反应就是各种类型的酶反应，故生化由于生化反应就是各种类型的酶反应，故生化 反应器实质上也

13、就是酶反应器。反应器实质上也就是酶反应器。 广义说来，生化反应器是酶反应器、微生物反广义说来，生化反应器是酶反应器、微生物反 应器（发酵罐）和动植物细胞培养用反应器的应器（发酵罐）和动植物细胞培养用反应器的 统称（当然包括采用固定化生物催化剂的反应统称（当然包括采用固定化生物催化剂的反应 器）。器）。 微生物反应器：是生产中最基本也是最主要的设备，微生物反应器：是生产中最基本也是最主要的设备， 其作用就是按照发酵过程的工艺要求，保证和控制各其作用就是按照发酵过程的工艺要求，保证和控制各 种生化反应条件，如温度、压力、供氧量、密封防漏种生化反应条件，如温度、压力、供氧量、密封防漏 防止染菌等，促

14、进微生物的新陈代谢，使之能在低消防止染菌等，促进微生物的新陈代谢，使之能在低消 耗下获得较高的产量。耗下获得较高的产量。 厌氧生物反应器厌氧生物反应器：其反应器不需供氧，设备结构一般较为简其反应器不需供氧，设备结构一般较为简 单。应用于乙醇、啤酒、丙酮、丁醇的生产。单。应用于乙醇、啤酒、丙酮、丁醇的生产。 好氧生物反应器好氧生物反应器：生产过程中需不断通入无菌空气，因而其生产过程中需不断通入无菌空气，因而其 设备的结构比厌氧生物反应器复杂。应用于氨基酸、有机酸、设备的结构比厌氧生物反应器复杂。应用于氨基酸、有机酸、 酶制剂、抗生素和单细胞蛋白酶制剂、抗生素和单细胞蛋白SCPSCP等的生产。等的

15、生产。 二二.生化反应器的特点生化反应器的特点 生化反应与一般化学反应的不同主要在于其反应皆生化反应与一般化学反应的不同主要在于其反应皆 由生物催化剂由生物催化剂-酶来催化的。决定了酶反应必须在比酶来催化的。决定了酶反应必须在比 较温和的条件下进行，也就是在接近中性的较温和的条件下进行，也就是在接近中性的pH、较、较 低的温度及近似细胞生理条件下进行。低的温度及近似细胞生理条件下进行。 生物的酶系是非常复杂的，在活细胞中它们是相互生物的酶系是非常复杂的，在活细胞中它们是相互 协调而处于最优化的状态，故活细胞常被用来合成一协调而处于最优化的状态，故活细胞常被用来合成一 些代谢产物如多糖及蛋白质等

16、。由于反应的环境会随些代谢产物如多糖及蛋白质等。由于反应的环境会随 着时间的进程而改变，就产生了一个如何控制反应过着时间的进程而改变，就产生了一个如何控制反应过 程使其最优化的问题。程使其最优化的问题。 对生长细胞来说，要考虑到如何维持发酵的最对生长细胞来说，要考虑到如何维持发酵的最 佳条件，主要包括细胞营养、代谢的调控以及佳条件，主要包括细胞营养、代谢的调控以及 反应产物的干扰。反应产物的干扰。 由于酶作用对底物的高度特异性，它可以定向由于酶作用对底物的高度特异性，它可以定向 的产生一些用一般化学方法难以甚至无法得到的产生一些用一般化学方法难以甚至无法得到 的产品的产品 大多数生化反应都在水

17、相中进行，相对来说产大多数生化反应都在水相中进行，相对来说产 物浓度较低，这就产生了一个产物回收工艺及物浓度较低，这就产生了一个产物回收工艺及 成本的问题。成本的问题。 三三. 生化反应器的种类及选择与操作生化反应器的种类及选择与操作 按生化反应是在一个相或是在多个相内进行，可分为按生化反应是在一个相或是在多个相内进行，可分为 均相反应器和非均相反应器。发酵工业中的绝大多数均相反应器和非均相反应器。发酵工业中的绝大多数 都属于非均相反应器。都属于非均相反应器。 （一）机械搅拌式生化反应器（一）机械搅拌式生化反应器 从牛顿型流体直到非牛顿型的丝状菌发酵液，都能根从牛顿型流体直到非牛顿型的丝状菌发

18、酵液，都能根 据实际情况和需要，为之提供较高的传质速率和必要据实际情况和需要，为之提供较高的传质速率和必要 的混合速度。缺点是机械搅拌器的驱动功率较高，一的混合速度。缺点是机械搅拌器的驱动功率较高，一 般般24kw/m3，这对大型的反应器来说是个巨大负担。，这对大型的反应器来说是个巨大负担。 流体单位面积上所承受的剪切应力流体单位面积上所承受的剪切应力,与单元的剪切速率与单元的剪切速率dy/du成正成正 比比,称为牛顿粘性定律称为牛顿粘性定律,服从这一定律的流体称为服从这一定律的流体称为牛顿型流体牛顿型流体。 空气、水等均为牛顿流体；聚合溶液、含有悬浮粒杂质或纤维的空气、水等均为牛顿流体；聚合

19、溶液、含有悬浮粒杂质或纤维的 流体为流体为非牛顿流体非牛顿流体。 通用式发酵罐的结构包括有通用式发酵罐的结构包括有 筒体、搅拌装置、换热装置、筒体、搅拌装置、换热装置、 挡板、消泡器、电动机与变挡板、消泡器、电动机与变 速装置、空气分布装置等，速装置、空气分布装置等， 并在适当部位设置排气、取并在适当部位设置排气、取 样、放料、接种、酸等管接样、放料、接种、酸等管接 口以及人孔、视镜等部件。口以及人孔、视镜等部件。 通用发酵罐内设置机械搅拌通用发酵罐内设置机械搅拌 的目的首先是打碎空气气泡，的目的首先是打碎空气气泡， 增加气液接触面积，以提高增加气液接触面积，以提高 气液相间的传质速率；其次气

20、液相间的传质速率；其次 是为了使发酵液充分混合，是为了使发酵液充分混合， 也使液体中的固形物料能保也使液体中的固形物料能保 持悬浮状态持悬浮状态。 通气搅拌罐主要组成：壳通气搅拌罐主要组成：壳 体、控温部分、搅拌部分、体、控温部分、搅拌部分、 通气部分、进出料口、测通气部分、进出料口、测 量系统和附属系统等。量系统和附属系统等。 反应器主体采用不锈钢材反应器主体采用不锈钢材 料，通常采用涡轮式搅拌料，通常采用涡轮式搅拌 器。搅拌轴与罐体的连接器。搅拌轴与罐体的连接 要进行无菌密封。罐体底要进行无菌密封。罐体底 部设有空气分布器或喷嘴，部设有空气分布器或喷嘴， 通过空气过滤器的无菌空通过空气过滤

21、器的无菌空 气从孔径几毫米的多孔管气从孔径几毫米的多孔管 鼓入培养液内。鼓入培养液内。 搅拌器由置于罐顶的搅拌搅拌器由置于罐顶的搅拌 电机以一定的转速驱动旋电机以一定的转速驱动旋 转，通过搅拌涡轮产生的转，通过搅拌涡轮产生的 液体漩涡及剪切力，将鼓液体漩涡及剪切力，将鼓 入的空气打碎成小气泡，入的空气打碎成小气泡， 并均匀分散在培养液中。并均匀分散在培养液中。 这样，既提供了细胞生长这样，既提供了细胞生长 所需氧，同时又使培养液所需氧，同时又使培养液 浓度均匀。浓度均匀。 2 3 1轴封轴封 ； 2、20人孔；人孔； 3梯；梯； 4联轴；联轴； 5中间轴承；中间轴承； 6温度计接口；温度计接口

22、； 7搅拌叶轮搅拌叶轮； 8进风管；进风管； 9放料口；放料口； 10底轴承；底轴承； 11热电偶接口；热电偶接口；12冷却管冷却管； 13搅拌轴；搅拌轴； 14取样管；取样管； 15轴承座；轴承座； 16传动皮带；传动皮带； 17电机；电机； 18压力表；压力表； 19取样口；取样口； 21进料口；进料口； 22补料口；补料口； 23排气口；排气口； 24回流口；回流口； 25视镜；视镜； 反应器的装料系数一般反应器的装料系数一般 为为7080。系统通常。系统通常 还设有消泡装置、参数还设有消泡装置、参数 测试元件、蛇管或夹套测试元件、蛇管或夹套 冷却装置等。典型通气冷却装置等。典型通气 搅

23、拌罐的一些基本特征搅拌罐的一些基本特征 可以参考图可以参考图 机械搅拌发酵罐(TRC) 工作原理： 利用机械搅拌器的作用，利用机械搅拌器的作用，使空气和发酵液充分使空气和发酵液充分 混合促使氧在发酵液中溶解，以保证供给微生物混合促使氧在发酵液中溶解，以保证供给微生物 生长繁殖、发酵所需要的氧气。生长繁殖、发酵所需要的氧气。 (1) 具有适宜的径高比；具有适宜的径高比； (2) 能够承担一定压力；能够承担一定压力； (3) 保证必需的溶解氧；保证必需的溶解氧； (4) 具有足够的冷却面积；具有足够的冷却面积； (5) 尽量减少死角，灭菌彻底，避免染菌；尽量减少死角，灭菌彻底，避免染菌； (6)

24、轴封严密。轴封严密。 之机械搅拌发酵罐 发酵罐的基本条件： 之机械搅拌发酵罐 图2.3 自动玻璃发酵罐 图2.4 玻璃搅拌发酵罐 图2.5 不锈钢搅拌发酵罐 通气搅拌罐适用于大多数的生物工程，它具通气搅拌罐适用于大多数的生物工程，它具 有以下优点：有以下优点：pHpH值及温度易于控制；工业放值及温度易于控制；工业放 大方法研究比较多；适合连续培养。不足之大方法研究比较多；适合连续培养。不足之 处是：搅拌消耗的功率较大；结构比较复杂，处是：搅拌消耗的功率较大；结构比较复杂， 难以彻底拆卸清洗，易染菌；剪切力稍大，难以彻底拆卸清洗，易染菌；剪切力稍大， 特别是培养丝状菌体时，对细胞有较大损伤。特别

25、是培养丝状菌体时，对细胞有较大损伤。 通气搅拌罐的几何尺寸都趋向于标准化，通气搅拌罐的几何尺寸都趋向于标准化， 由圆柱体及椭圆形或碟形封头焊接而成，材料为碳由圆柱体及椭圆形或碟形封头焊接而成，材料为碳 钢或不锈钢。为了满足工业要求，在一定压力和温度钢或不锈钢。为了满足工业要求，在一定压力和温度 下操作，罐为一个受压耐温容器，通常要求耐受下操作，罐为一个受压耐温容器，通常要求耐受130130 和和0.25MPa(0.25MPa(绝对压力绝对压力) )。 之机械搅拌发酵罐 罐 体 作为通气搅拌罐的主要特征之一，机械搅拌系统提供作为通气搅拌罐的主要特征之一，机械搅拌系统提供 的动力是机械搅拌罐质量传

26、递、热量传递、混合和悬的动力是机械搅拌罐质量传递、热量传递、混合和悬 浮物均匀分布的基本保证。搅拌装置的设计和选择必浮物均匀分布的基本保证。搅拌装置的设计和选择必 须综合考虑以满足上述要求并降低造价和动力消耗。须综合考虑以满足上述要求并降低造价和动力消耗。 搅拌轴既可以从顶部伸入罐体，也可以从底部伸入罐体，前搅拌轴既可以从顶部伸入罐体，也可以从底部伸入罐体，前 者称为上搅拌，后者称为下搅拌。一般而言，上搅拌的制造者称为上搅拌，后者称为下搅拌。一般而言，上搅拌的制造 和安装成本要略高于下搅拌。但是，采用下搅拌时，培养基和安装成本要略高于下搅拌。但是，采用下搅拌时，培养基 中的固体颗粒或者可溶性成

27、分在水分挥发后形成的结晶会损中的固体颗粒或者可溶性成分在水分挥发后形成的结晶会损 坏轴封，使其维护成本增加。小型通气搅拌罐一般只有一层坏轴封，使其维护成本增加。小型通气搅拌罐一般只有一层 搅拌桨，而大型通气搅拌罐一般具有搅拌桨，而大型通气搅拌罐一般具有2 24 4层搅拌桨以改善混层搅拌桨以改善混 合和传质。合和传质。 之机械搅拌发酵罐 搅拌器和挡板 搅拌器：搅拌器： 有平叶式、弯叶式、箭叶式、涡轮式和推进式等；其作用有平叶式、弯叶式、箭叶式、涡轮式和推进式等；其作用 是打碎气泡，使氧溶解于发酵液中，从搅拌程度来说，以平叶是打碎气泡，使氧溶解于发酵液中，从搅拌程度来说，以平叶 涡轮最为激烈，功率

28、消耗也最大，弯叶次之，箭叶最小。为了涡轮最为激烈，功率消耗也最大，弯叶次之，箭叶最小。为了 拆装方便，大型搅拌器可做成两半型，用螺栓联成整体。拆装方便，大型搅拌器可做成两半型，用螺栓联成整体。 图2.6 发酵罐搅拌叶轮结构图 1-六直叶涡轮式；2-推进式 3-Lightnin A-315式 图2.7 不同搅拌器的流型 搅拌器可以使被搅拌的流体搅拌器可以使被搅拌的流体 产生圆周运动，称为原生流。产生圆周运动，称为原生流。 原生流在受到挡板的作用后原生流在受到挡板的作用后 又产生了轴向运动，这称为又产生了轴向运动，这称为 次生流。显然，原生流的圆次生流。显然，原生流的圆 周运动无助于流体的混合，周

29、运动无助于流体的混合， 流体混合的好坏主要取决于流体混合的好坏主要取决于 次生流。原生流速与搅拌转次生流。原生流速与搅拌转 速成正比，而次生流速则近速成正比，而次生流速则近 似与搅拌转数的平方成正比，似与搅拌转数的平方成正比， 因此当转速提高时，主要是因此当转速提高时，主要是 由于次生流速的加快而使流由于次生流速的加快而使流 体的混合、传热以及传质速体的混合、传热以及传质速 率提高率提高 常用的搅拌桨有涡轮式、螺旋式和平桨式。常用的搅拌桨有涡轮式、螺旋式和平桨式。 目前采用较多的是涡轮式。为了避免气泡在阻目前采用较多的是涡轮式。为了避免气泡在阻 力较小的搅拌器中心部位沿着轴周边上升逸出，力较小

30、的搅拌器中心部位沿着轴周边上升逸出， 在搅拌器中央安装有圆盘。常用的圆盘涡轮搅在搅拌器中央安装有圆盘。常用的圆盘涡轮搅 拌器有平叶式、弯叶式和箭叶式三种。叶片数拌器有平叶式、弯叶式和箭叶式三种。叶片数 量一般为六个。量一般为六个。 常常 用用 圆圆 盘盘 涡涡 轮轮 式式 斜叶式斜叶式平直叶式平直叶式 弯叶式弯叶式 半圆弧圆盘涡轮式半圆弧圆盘涡轮式 箭叶圆盘涡轮式箭叶圆盘涡轮式 根据搅拌所产生的流体运动的初始方向，将根据搅拌所产生的流体运动的初始方向，将 搅拌桨分为搅拌桨分为径向流搅拌桨径向流搅拌桨和和轴向流搅拌桨轴向流搅拌桨。 径向流搅拌桨将流体向外推进，遇反应器内径向流搅拌桨将流体向外推进

31、，遇反应器内 壁和档板后再向上下两侧折返，产生次生流。壁和档板后再向上下两侧折返，产生次生流。 轴向流搅拌桨则使流体一开始就沿轴向运动。轴向流搅拌桨则使流体一开始就沿轴向运动。 一般而言，轴向流搅拌桨的反应器，其功率一般而言，轴向流搅拌桨的反应器，其功率 准数较低，达到同样混合效果所需消耗的能准数较低，达到同样混合效果所需消耗的能 量要远低于径向流搅拌桨。径向流搅拌桨所量要远低于径向流搅拌桨。径向流搅拌桨所 造成的剪切力大于轴向流搅拌桨，这有利于造成的剪切力大于轴向流搅拌桨，这有利于 打碎气泡，从而增大总括氧传递速率常数，打碎气泡，从而增大总括氧传递速率常数， 但会对有些细胞产生伤害。但会对有

32、些细胞产生伤害。 因此，径向流搅拌桨多用于对剪切力不敏感的好氧细菌和酵母的因此，径向流搅拌桨多用于对剪切力不敏感的好氧细菌和酵母的 培养，而轴向流搅拌桨多用于对剪切力敏感的生物反应体系。对培养，而轴向流搅拌桨多用于对剪切力敏感的生物反应体系。对 于大型发酵罐，可采用这两类搅拌桨混合配置的设计，以充分发于大型发酵罐，可采用这两类搅拌桨混合配置的设计，以充分发 挥各自的优点。最下层的桨一般采用平板桨，这种桨具有优良的挥各自的优点。最下层的桨一般采用平板桨，这种桨具有优良的 气泡破碎效果，这是在青霉素发酵研究和开发中得到的经验，一气泡破碎效果，这是在青霉素发酵研究和开发中得到的经验，一 直沿用至今。

33、直沿用至今。 挡板挡板 为防止搅拌时液面上产生大的旋涡，并促进罐为防止搅拌时液面上产生大的旋涡，并促进罐 内流体在各个方向的混合，与搅拌桨相对应，内流体在各个方向的混合，与搅拌桨相对应， 在罐体上还安装有挡板。挡板的设计要满足在罐体上还安装有挡板。挡板的设计要满足 “全挡板条件全挡板条件”。所谓全挡板条件，是指在搅。所谓全挡板条件，是指在搅 拌罐中再增加挡板或其它附件时，搅拌功率不拌罐中再增加挡板或其它附件时，搅拌功率不 再增加。挡板的数目通常为再增加。挡板的数目通常为46块，其宽度为块，其宽度为 0.10.12D。全挡板条件是达到消除液面漩涡。全挡板条件是达到消除液面漩涡 的最低条件。在一定

34、的转速下面增加罐内附件的最低条件。在一定的转速下面增加罐内附件 而轴功率保持不变。此条件与挡板数而轴功率保持不变。此条件与挡板数Z，挡板，挡板 宽度宽度W和罐径和罐径D有关。有关。 挡板：挡板： 改变液流的方向，由径向流改为轴向流，促使液改变液流的方向，由径向流改为轴向流，促使液 体激烈翻动，增加溶解氧。通常挡板宽度取体激烈翻动，增加溶解氧。通常挡板宽度取( (0.1 0.12)D，装设，装设46块即可满足全挡板条件。块即可满足全挡板条件。 所谓所谓“全挡板条件全挡板条件”是指在一定转速下再增加罐内附是指在一定转速下再增加罐内附 件而轴功率仍保持不变。件而轴功率仍保持不变。(W/D)Z=0.5

35、 D-罐的直径 Z-挡板数 W-挡板宽度 要达到全挡板条件必须满足下式要求：要达到全挡板条件必须满足下式要求： 5 . 0 12. 01 . 0 n D D n D b 之机械搅拌发酵罐 无挡板的搅拌器形成的流型 有挡板的搅拌器形成的流型 使罐顶或罐底与轴之间的缝隙加以密封，防止泄露和污染杂使罐顶或罐底与轴之间的缝隙加以密封，防止泄露和污染杂 菌菌。机械传动部件往往是造成染菌的主要原因之一，因此轴 封设计的关键是避免染菌和泄漏，应尽可能采用无菌密封材 料。常用的轴封有常用的轴封有填料函轴封填料函轴封和和端面轴封两种。端面轴封两种。 轴 封 填料函轴封填料函轴封：由填料箱体，填料底衬套，由填料箱

36、体，填料底衬套， 填料压盖和压紧螺栓等零件构成，使旋转轴达填料压盖和压紧螺栓等零件构成，使旋转轴达 到密封的效果。到密封的效果。 压紧螺栓压紧螺栓 填料箱体填料箱体 图2.10 填料函 转轴转轴 填料压盖填料压盖 铜环铜环 填料填料 端面式轴封又称机械轴封：端面式轴封又称机械轴封：密封作用是靠弹性元密封作用是靠弹性元 件（弹簧、波纹等）的压力使垂直轴线的动环和静环件（弹簧、波纹等）的压力使垂直轴线的动环和静环 光滑表面紧密地相互贴合，并作相对转动而达到密封。光滑表面紧密地相互贴合，并作相对转动而达到密封。 端面接触的密封构件之一为硬质合金，如高硅铸铁、端面接触的密封构件之一为硬质合金，如高硅铸

37、铁、 金属碳化钨等；另一种为软质耐磨材料，如不锈性石金属碳化钨等；另一种为软质耐磨材料，如不锈性石 墨，用作静环。墨，用作静环。 转轴转轴 端面封轴 动环动环 静环静环 堆焊硬质堆焊硬质 O形环形环 转轴转轴 端面封轴 动环动环 静环静环 堆焊硬质堆焊硬质 O形环形环 通气系统 通气系统由无菌空气制备系统、空气分布装置和出口气体除通气系统由无菌空气制备系统、空气分布装置和出口气体除 菌系统组成。菌系统组成。 细胞生长和代谢所需的无菌空气通过空气分布管引入罐中。细胞生长和代谢所需的无菌空气通过空气分布管引入罐中。 空气分布管一般位于最下层的搅拌桨的正下方。为保证气泡空气分布管一般位于最下层的搅拌

38、桨的正下方。为保证气泡 的分散，多采用带小孔的环状空气分布管，环的直径一般等的分散，多采用带小孔的环状空气分布管，环的直径一般等 于搅拌桨的直径。在大型通气搅拌罐中，搅拌桨尖附近的剪于搅拌桨的直径。在大型通气搅拌罐中，搅拌桨尖附近的剪 切力非常大，一般足以达到充分打碎气泡的目的，为防止培切力非常大，一般足以达到充分打碎气泡的目的，为防止培 养液中的固体物料或菌丝堵塞空气分布管，对某些特殊的发养液中的固体物料或菌丝堵塞空气分布管，对某些特殊的发 酵体系有时采用向下开口的单孔管。酵体系有时采用向下开口的单孔管。 在一些简单的反应器中，气体的排出只是通过一个简单的阀在一些简单的反应器中，气体的排出只

39、是通过一个简单的阀 门控制的。为避免染菌，必须调节空气的排出阀以保证反应门控制的。为避免染菌，必须调节空气的排出阀以保证反应 器内始终处于高于大气压的正压状态。一些精密的反应器则器内始终处于高于大气压的正压状态。一些精密的反应器则 配备了出口气体冷凝装置和过滤装置配备了出口气体冷凝装置和过滤装置 之机械搅拌发酵罐 空气分布器的作用：吹入无菌空气，并使空气均匀空气分布器的作用：吹入无菌空气，并使空气均匀 分布。分布装置的形式有单管及环形管等，常用的分分布。分布装置的形式有单管及环形管等，常用的分 布装置有单管式。布装置有单管式。 空气由分布管喷出上升时，被搅拌器打碎成小气空气由分布管喷出上升时，

40、被搅拌器打碎成小气 泡，并与发酵液充分混合，增加了气液传质效果。泡，并与发酵液充分混合，增加了气液传质效果。 环形管的分布装置的空气分散效果不及单管式分环形管的分布装置的空气分散效果不及单管式分 布装置。同时由于喷孔容易被堵塞，已很少采用。布装置。同时由于喷孔容易被堵塞，已很少采用。 通常通风管的空气流速取通常通风管的空气流速取20m/s。 为了防止吹管吹入的空气直接喷击罐底，加速罐为了防止吹管吹入的空气直接喷击罐底，加速罐 底腐蚀，在空气分布器下部罐底上加焊一块不锈钢补底腐蚀，在空气分布器下部罐底上加焊一块不锈钢补 强。可延长罐底寿命强。可延长罐底寿命 空气分布器 消泡系统 消泡系统对好氧发

41、酵过程是非常重要的。通气搅拌罐的装液消泡系统对好氧发酵过程是非常重要的。通气搅拌罐的装液 量一般不能超过容器容积的量一般不能超过容器容积的7080，一方面，这是由于通，一方面，这是由于通 气后液面会有所上升；更重要的原因是，预留部分空间可以气后液面会有所上升；更重要的原因是，预留部分空间可以 避免泡沫马上冲出罐体，为消除泡沫提供一段缓冲的时间。避免泡沫马上冲出罐体，为消除泡沫提供一段缓冲的时间。 一般对越容易产生泡沫的体系，装液量要越少。一般对越容易产生泡沫的体系，装液量要越少。 通气搅拌罐顶部有一个额外的搅拌桨，称为消泡桨，其作用通气搅拌罐顶部有一个额外的搅拌桨，称为消泡桨，其作用 就是通过

42、机械作用消除泡沫。在多数情况下，仅凭消泡桨还就是通过机械作用消除泡沫。在多数情况下，仅凭消泡桨还 不足以及时破坏所有的泡沫，因此通常还须进一步采用添加不足以及时破坏所有的泡沫，因此通常还须进一步采用添加 化学消泡剂的方法消泡。化学消泡剂的方法消泡。 之机械搅拌发酵罐 消泡装置 消泡装置就是安装在发酵罐内转动轴的上部或安装在消泡装置就是安装在发酵罐内转动轴的上部或安装在 发酵罐排气系统上的，可将泡沫打破或将泡沫破碎分离发酵罐排气系统上的，可将泡沫打破或将泡沫破碎分离 成液态和气态两相的装置，从而达到消泡的目的。成液态和气态两相的装置，从而达到消泡的目的。 两种消泡方法两种消泡方法: (1) 加入

43、化学消泡剂；加入化学消泡剂；(2)使用机械消泡使用机械消泡 装置装置 化学消泡剂：植物油脂，如玉米油、豆油等；动物油化学消泡剂：植物油脂，如玉米油、豆油等；动物油 脂，如猪油等；高分子化合物。脂，如猪油等；高分子化合物。 机械消泡装置：最简单实用为耙式消泡器机械消泡装置：最简单实用为耙式消泡器 耙式消泡器 植物油、聚醚类非离子型表面活性剂都可以用于化植物油、聚醚类非离子型表面活性剂都可以用于化 学消泡，它们可以直接在配制在培养基中，也可以学消泡，它们可以直接在配制在培养基中，也可以 在发酵过程中根据需要加入，或者两种策略同时使在发酵过程中根据需要加入，或者两种策略同时使 用。为了及时检测泡沫是

44、否达到预警高度，通常在用。为了及时检测泡沫是否达到预警高度，通常在 反应器上方装有液位电极，一旦泡沫达到相应的高反应器上方装有液位电极，一旦泡沫达到相应的高 度，就可以通过消泡控制装置自动向反应器中流加度，就可以通过消泡控制装置自动向反应器中流加 消泡剂。消泡剂。 大型发酵罐搅拌轴较长，常分为二至三段，用大型发酵罐搅拌轴较长，常分为二至三段，用 联轴器使上下搅拌轴成牢固的刚性联接。联轴器使上下搅拌轴成牢固的刚性联接。 之机械搅拌发酵罐 联轴器及轴承 小型的发酵罐可采用法兰将搅拌轴连接。小型的发酵罐可采用法兰将搅拌轴连接。 常用的联轴器有鼓形及夹壳形两种。常用的联轴器有鼓形及夹壳形两种。 联轴器

45、 法兰 中型发酵罐一般在罐内装有底轴承；中型发酵罐一般在罐内装有底轴承； 大型发酵罐装有中间轴承。大型发酵罐装有中间轴承。 罐内轴承不能加润滑油，应采用液体罐内轴承不能加润滑油，应采用液体 润滑的塑料轴瓦（如石棉酚醛塑料，聚润滑的塑料轴瓦（如石棉酚醛塑料，聚 四氟乙烯等）。四氟乙烯等）。 之机械搅拌发酵罐 轴 承 底轴承 中间轴承 之机械搅拌发酵罐 冷却装置 夹套冷却夹套冷却竖式蛇管冷却竖式蛇管冷却竖式列管冷却竖式列管冷却 适 用 范 围 5m3以下小发酵罐以下小发酵罐大型发酵罐大型发酵罐 大型发酵罐大型发酵罐 气温较高的地区气温较高的地区 优 点 结构简单，加工容结构简单，加工容 易，罐内死

46、角少，易，罐内死角少， 容易清洗灭菌容易清洗灭菌 流速大，传热系数流速大，传热系数 大，降温效果较好。大，降温效果较好。 加工方便，提高加工方便，提高 传热推动力的温传热推动力的温 差。差。 缺 点 传热壁较厚，冷却传热壁较厚，冷却 水流速低，降温效水流速低，降温效 果差。果差。 冷却水较高时，降冷却水较高时，降 温困难，弯曲位置温困难，弯曲位置 易腐蚀。易腐蚀。 用水量较大。用水量较大。 在罐外安装板式或螺旋板式热交换器，采用无菌空气使发酵液在罐外安装板式或螺旋板式热交换器，采用无菌空气使发酵液 进行循环冷却。进行循环冷却。 图2.13 机械搅拌通风发酵罐 的几何尺寸 5 . 37 . 1

47、DH3121DDi 0 . 18 . 0 i DC12181 DB 52 i DS2 0 DH Di D B 之机械搅拌发酵罐 机械搅拌通风发酵罐的几何尺寸及体积 体积 尺寸 DhDhDhDV bab 6 1 4 6 4 222 1 椭圆形封头体积： 发酵罐的总体积： DhHDV b 6 1 2 4 2 0 近似为： 22 0 15. 0 4 DHDV 之机械搅拌发酵罐 之气升式发酵罐 (二)气升式发酵罐(ALR) 工作原理 特点及应用 主要结构及操作系数 典型的气升式发酵罐 工作原理 之气升式发酵罐 o 类型 气升环流式、塔式、空气喷射式等。 o 工作原理 把无菌空气通过喷嘴或喷孔喷 射进入

48、发酵液中，通过气液混合 物的湍流作用而使空气泡分割细 碎，同时由于形成的气液混合物 密度降低故向上运动，而气含率 小的发酵液则下沉，形成循环流 动，实现混合与溶氧传质。 G 泵L G 气液双喷射气升环流反应器 气升式反应器利用气体的喷射功能和流体密度气升式反应器利用气体的喷射功能和流体密度 差造成反应液循环流动差造成反应液循环流动无机械搅拌无机械搅拌 o 特点 1）反应溶液分布均匀 2）较高的溶氧速率和溶氧效率 3）剪切力小 4）传热良好 5）结构简单 6）能耗小 7）不易染菌 8）操作和维修方便 特点及应用 之气升式发酵罐 o 应用 酵母生产、单细胞蛋白生产、细胞培养 酶制剂和有机酸等发酵生

49、产、废水生化处理 主要结构及操作系数 之气升式发酵罐 o主要结构参数 1）反应器径高比H/D 2）导流筒径与罐径比DE /D 3）空气喷嘴直径与反应器直径比Dl/D o 操作特征 平均循环时间tm循环周期指液体微元在 反应器内循环一周所需要的平均时间， 即平均循环时间。循环周期一般在 2.54min之间 之气升式发酵罐 ICIs air lift system for making single-cell protein in 1979 冷却水 G G 培养基 AA B 注射入口 ICI压力循环气升发酵罐 1 2 3 4 5 6 7 11 8 9 10 12 之气升式发酵罐 气升式玻璃发酵罐

50、具有外循环冷却的 气升环流式发酵罐 之自吸式发酵罐 （三）自吸式发酵罐 自吸式发酵罐：自吸式发酵罐： 不需空气压缩机不需空气压缩机提供加提供加 压空气，而依靠特设的压空气，而依靠特设的 机械吸气装置或液体喷机械吸气装置或液体喷 射吸气装置吸入无菌空射吸气装置吸入无菌空 气，实现混合搅拌与溶气，实现混合搅拌与溶 氧传质的发酵罐。氧传质的发酵罐。 应用：应用： 酵母及单细胞蛋酵母及单细胞蛋 白生产、醋酸发酵、维生素白生产、醋酸发酵、维生素 等生产等生产 之自吸式发酵罐 自吸式发酵罐 优点：优点： (1)不必配备空气压缩机及其附属设备，节约设备不必配备空气压缩机及其附属设备，节约设备 投资，减少厂房

51、面积；投资，减少厂房面积； (2)溶氧速率高，溶氧效率高，能耗较低；溶氧速率高，溶氧效率高，能耗较低； (3)生产效率高、经济效率高生产效率高、经济效率高 (4)设备便于自动化、连续化。设备便于自动化、连续化。 缺点：缺点： 较易产生杂菌污染，需配备低阻力损失低高效空较易产生杂菌污染，需配备低阻力损失低高效空 气过滤系统，罐压较低，装料系数约为气过滤系统，罐压较低，装料系数约为40。 之自吸式发酵罐 机械搅拌自吸式发酵罐 自吸式发酵罐的结构 自吸式发酵罐的结构 之自吸式发 酵罐 机械搅拌自吸式发酵罐的工作原理 自吸式发酵罐的主要构件是自吸搅拌器自吸式发酵罐的主要构件是自吸搅拌器(转子转子)和导

52、轮和导轮(定子定子),空气管与转子相空气管与转子相 连接连接,在转子启动前在转子启动前,先用液体将转子浸没先用液体将转子浸没,然后启动马达使转子转动然后启动马达使转子转动,由于转子由于转子 高速旋转高速旋转,液体或空气在离心力的作用下液体或空气在离心力的作用下,被甩向叶轮外缘被甩向叶轮外缘,在这个过程中在这个过程中,流体流体 便获得能量便获得能量,若转子的转速愈快若转子的转速愈快,旋转的线速度也愈大旋转的线速度也愈大,则流体则流体(其中还含有气体其中还含有气体) 的动能也愈大的动能也愈大,流体离开转子时流体离开转子时,由动能转变为静压能也愈大由动能转变为静压能也愈大,在转子中心所造在转子中心所

53、造 成的负压也越大，因此空气不断地被吸入，甩向叶轮的外缘，通过定子而使成的负压也越大，因此空气不断地被吸入，甩向叶轮的外缘，通过定子而使 气液均匀分布甩出。气液均匀分布甩出。 由于转子的搅拌作用，气液在叶轮的外缘形成强烈的混合流（湍流），使刚由于转子的搅拌作用，气液在叶轮的外缘形成强烈的混合流（湍流），使刚 刚离开叶轮的空气立即在不断循环的发酵液中分裂成细微的气泡，并在湍流刚离开叶轮的空气立即在不断循环的发酵液中分裂成细微的气泡，并在湍流 状态下混合、翻腾、扩散到整个罐中，因此转子同时具有搅拌和充气两个作状态下混合、翻腾、扩散到整个罐中，因此转子同时具有搅拌和充气两个作 用。用。 之自吸式发酵

54、罐 文氏管自吸式发酵罐文氏管自吸式发酵罐： 利用文氏罐喷射吸气装置利用文氏罐喷射吸气装置 或溢流喷射吸气装置进行混或溢流喷射吸气装置进行混 合和溶氧传质。合和溶氧传质。 1 2 3 4 5 6 7 泵泵4将发酵液压入文氏管将发酵液压入文氏管6，由于文氏管的收缩段中，由于文氏管的收缩段中 液体的流速增加，形成负压将无菌空气吸入液体的流速增加，形成负压将无菌空气吸入,并被高并被高 速流动的液体打碎，与液体均匀混合速流动的液体打碎，与液体均匀混合, 同时由于上升同时由于上升 管中发酵液与气体混合后，比重较罐内发酵液轻，管中发酵液与气体混合后，比重较罐内发酵液轻， 再加上泵的提升作用，使发酵液在上升管

55、内上升。再加上泵的提升作用，使发酵液在上升管内上升。 当发酵液从上升管进入发酵罐后，微生物耗氧，发当发酵液从上升管进入发酵罐后，微生物耗氧，发 酵液的比重变大向发酵罐底部循环，发酵液又从发酵液的比重变大向发酵罐底部循环，发酵液又从发 酵罐底部被泵打入上升管，开始下一个循环酵罐底部被泵打入上升管，开始下一个循环 液体喷射吸气装置 1一高压料液管 2一吸气室 3一进风管 4一喷嘴 5一收缩段 6一导流尾管 7一扩散段 文氏吸气管结构 无 菌 风 管 之自吸式发酵罐 喷射自吸式发酵罐 喷射自吸式发酵罐 吸气原理是液体溢流吸气原理是液体溢流 时形成抛射流，由于时形成抛射流，由于 液体的表面层与其相液体

56、的表面层与其相 邻的气体的动量传递，邻的气体的动量传递， 使边界层的气体有一使边界层的气体有一 定的速率，从而带动定的速率，从而带动 气体的流动形成自吸气体的流动形成自吸 气作用。要使液体处气作用。要使液体处 于抛射非淹没溢流状于抛射非淹没溢流状 态，溢流尾管略高于态，溢流尾管略高于 液面，尾管高液面，尾管高12m 时，吸气速率较大。时，吸气速率较大。 （四）发酵罐的管路和死角的消除（四）发酵罐的管路和死角的消除 单罐单罐 多罐多罐 发酵罐的出口越少越好，发酵罐的出口越少越好， a. 出料口和进气管可以合并出料口和进气管可以合并 b. 接种管、消泡管、补料管可以合并接种管、消泡管、补料管可以合

57、并 c. 排气管不能合并，易引起交叉污染排气管不能合并，易引起交叉污染 a. 出料前后都要消毒，用活（流动）出料前后都要消毒，用活（流动） 蒸气消毒蒸气消毒 b. 出料管不能合并出料管不能合并 （四）发酵罐的管路和死角的消除（四）发酵罐的管路和死角的消除 a. 丝口连接处改用法兰连接丝口连接处改用法兰连接 b. 焊接部位：堆焊、电焊、氧焊、鱼鳞焊，选用鱼鳞焊焊接部位：堆焊、电焊、氧焊、鱼鳞焊，选用鱼鳞焊 c. 管道转弯有弧度管道转弯有弧度 d. 放料管、取料管的阀腔处装小阀放料管、取料管的阀腔处装小阀 （四）发酵罐的管路和死角的消除（四）发酵罐的管路和死角的消除 a.a.罐体穿孔罐体穿孔 不锈

58、钢不锈钢 b.b.冷却管产生裂缝冷却管产生裂缝 定期更换定期更换 c.c.垫圈（法兰连接）松脱垫圈（法兰连接）松脱 拧紧拧紧 d.d.轴封渗漏轴封渗漏 轴绝对垂直轴绝对垂直 e.e.焊缝渗漏焊缝渗漏 f.f.阀杆阀杆 （五）发酵罐的管道布置（五）发酵罐的管道布置 1. 保证蒸气在管道中畅通，有排气口（小阀），接种管、中保证蒸气在管道中畅通，有排气口（小阀），接种管、中 间补料管、放料管都要有排气口（小阀）间补料管、放料管都要有排气口（小阀） 2. 避免冷凝水排入已灭菌的罐体或空气，加止逆阀（单向阀）避免冷凝水排入已灭菌的罐体或空气，加止逆阀（单向阀） 3. 灭菌后的管道用无菌空气保压灭菌后的管

59、道用无菌空气保压 4. 单向阀位置正确单向阀位置正确 5. 蒸气总管道要有分气缸、排气阀、减压阀、安全阀蒸气总管道要有分气缸、排气阀、减压阀、安全阀 6. 相邻罐不联通相邻罐不联通 （六）发酵罐的一些操作（六）发酵罐的一些操作 接种的三种方法接种的三种方法：a. 火圈直接倒种火圈直接倒种 b. 注射器接种注射器接种 c. 压力差接种压力差接种 小罐小罐 接种口用火圈杀菌；接种口用火圈杀菌； 橡胶口在火圈上过一下，套入接种口；橡胶口在火圈上过一下，套入接种口； 进气阀打开，排气阀关闭，罐内和种子瓶同时升压至进气阀打开，排气阀关闭，罐内和种子瓶同时升压至1kg/cm1kg/cm2 2； 关闭发酵罐

60、和种子瓶之间的阀门，打开发酵罐排气阀，罐内压力下关闭发酵罐和种子瓶之间的阀门，打开发酵罐排气阀，罐内压力下 降至降至0.5kg/cm0.5kg/cm2 2，倒置种子瓶，打开发酵罐和种子瓶之间的阀门，瓶，倒置种子瓶，打开发酵罐和种子瓶之间的阀门，瓶 内种子液进入罐内；内种子液进入罐内； 一次没有接完再重复。一次没有接完再重复。 注意：注意： 接种瓶密封、耐高压；接种瓶密封、耐高压； 接种瓶口要旋紧、塞子塞紧，防止漏气染菌；接种瓶口要旋紧、塞子塞紧，防止漏气染菌； 进气口压力表一定不能超过进气口压力表一定不能超过1kg/cm21kg/cm2（否则接种瓶会爆炸）；（否则接种瓶会爆炸）； 一次接不完反