安徽师范大学遗传学实验课考题

1、1. 什么是减数分裂？主要有哪些特征?减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂，仅在配子形成过程中发生。这一过程的特 点是：连续进行两次核分裂，而染色体只复制一次，结果形成四个核，每个核只 含单倍数的染色体，即染色体数减少一半，所以称作减数分裂。另一个特点是前 期特别长，而且变化复杂，包括同源染色体的配对、交换与分离等。2. 在哪些器官中可以观察到减数分裂？其中哪些是理想的实验材料？在适当的时期采集植物的花蕾或动物的精巢。蚕豆花蕾，短脚斑腿蝗精巢。3. 在减数分裂制片时，选择合适的时期尤为重要，以蚕豆花蕾为例说明选择过程。1）取已固定好的花序，按其花蕾大小，排列在小培养皿中 2 ）拨开花蕾，先 取中等

2、大小的花蕾，取出花药，放在载玻片上 3）加一滴醋酸洋红在花药上，用 镊子夹碎花药壁，散出花粉母细胞 4 ）加盖玻片，吸干周围染色液，用拇指适力 下压5）镜检4. 在植物体的哪些部分可以观察到有丝分裂？其中哪些是制片比较理想的实验 材料？高等植物体细胞的有丝分裂，主要发生在茎尖、根尖、形成层等分生组织。洋葱 根尖，蚕豆根尖。5. 什么是固定？我们所做的实验中，最常用的固定剂成分是什么？固定是利用化学或物理的方法， 使固定剂迅速透入组织和细胞， 将其杀死， 使蛋 白质等物质变性， 但在形态结构上尽量保持原来活着时的完整和真实状态， 如细 胞内染色体的分裂形态。 同时固定更易于染色， 可以较清楚的显

3、现细胞在生活时 不易看清的结构。卡诺固定液： 3份无水乙醇， 1份冰醋酸（现配现用） 。6. 植物根尖染色体制片中，预处理的方法有哪些？作用是什么？冰冻预处理，药物预处理。对标本进行预处理，固定染色体，使其停留在某一 时期便于观察。药剂处理：可以用作染色体预处理的化学药品，主要有生物碱、甙类、酸类及其 他物质；最常用的 化学药品有秋水仙素、 8羟基喹啉及对二氯苯。其作用是： 阻止或破坏纺垂体微管的形成， 由于没有纺垂体的作用， 细胞 有丝分裂过程， 被阻抑在细胞分裂中期阶段， 从而累计比较多的处于细胞分裂 中期的染 色体图象。 促进染色体浓缩变短， 减少染色体之间相互缠绕重叠， 有利染色体的高

4、度分散。 改变胞质粘度， 促进染色体清晰， 促进细胞质清洁。7. 植物根尖的解离主要有哪两种方法？简述其主要程序。 酸水解：一般采用盐酸解离。 用盐酸解离因材料不用而不同。 洋葱根尖用 0.1mol/L盐酸在60C下处理8min，蚕豆根尖用上述浓度温度时间延长15min。之后用70%酒精清洗几次，把残留的酸洗掉以免影响染色体着色酶处理：将固定的洋葱根尖用0.1mol/L的醋酸钠洗2次，然后放入酶液中（2% 果胶酶和1%纤维素酶等量混合），在25 C恒温箱中处理1.5-2.5h，此时根尖较 柔软，将根尖取出，用0.1mol/L醋酸钠洗2次，再放入60 C0.1mol/L盐酸溶液 中水解2min。

5、最后用45%醋酸钠清洗根尖。8. 植物根尖压片过程要注意哪些方面？取一染色的根尖置于载玻片中央，用吸水纸洗去多余的溶液，加1滴新鲜的染液， 盖上盖玻片后，在盖玻片上盖上一些吸水纸，应以左手的拇指和中指固定盖片的 位置，用铅笔或橡皮轻轻敲打，使细胞核染色体均匀分散。9. 植物根尖的解离有何目的？酸解离有何优点？目的是使分生组织细胞之间的果胶质层水解掉，并使细胞壁软化，便于压片.酸解离优点是较酶水解速度快，强度大，但用酸处理后，必须要用70%酒精清洗，把残留的酸洗掉，以免影响染色体着色。10. 低渗处理的作用是什么？试说明这种处理的关键步骤。使红细胞解体，白细胞膨胀，染色体分散。取5ML 37 C

6、低温的0.075M KCl溶液加入离心管中，用滴管轻轻冲打成细胞悬液，放入37 C温箱中静置20min11. 果蝇唾腺染色体有哪些形态特征？ 果蝇唾腺染色体比果蝇的其他体细胞染色体要长 100-200 倍，体积大上千倍， 故有称巨大染色体。 所有染色体的着丝点聚集在一起形成染色中心， 因此唾腺染 色体不但能进行配对， 且所有染色体的着丝点聚集在一起形成染色中心， 因此唾 腺细胞染色体形态不是 8 条个别染色体，而是由染色中心向空间伸展的 5 条长 臂和 1 条短臂构成。 还表现出有明显的横纹， 数目和空间排列是恒定的， 代表着 一些基因的位置，具有种的特异性。12. 果蝇杂交试验中，亲本为何要

7、用处女蝇？如何收集？ 只有亲本是处女蝇才能保证雌蝇的生殖器里无精子， 若非处女蝇则可能使果蝇后 代不是所用雄蝇交配得来的。一般来说，刚羽化出来的果蝇在 12 小时之内是不进行交配的，所以这段时间内 选出的雌蝇即为处女蝇。 为保险起见， 可在羽化后 10h 内挑选。13. 秋水仙素处理为何可以诱发多倍体的形成？ 秋水仙素的诱导作用在于阻止有丝分裂细胞纺锤丝的形成， 但对染色体的结构和 复制无显著影响。若浓度适合，药剂在细胞中扩散后，不致发生严重的毒害，这 样纵裂为二的染色体不能向两极分开， 因而便产生了染色体加倍的核。 当药剂作 用消除后， 由于多倍体细胞继续分裂， 便得到多倍体组织， 以后则产

8、生新的多倍 体植株。14. 扼要叙述空气干燥法制片的步骤 滴片后，不加热或任何处理，使载片在室温下自然干燥的方法。 收集细胞一细胞 经秋水仙素处理一低渗处理一离心一充分固定一滴片。 （用吸管吸取细胞悬液自 1m高处滴在冰冻的载玻片上，一片1-3滴，晾干，收存）15. 可用于常规核型分析的中期分裂相要具备哪些因素？染色体清晰，数目为46条，大小合适，分散度合适，背景干净16. 人体外周血淋巴细胞培养中，植物血球凝集素（PHA ）、秋水仙素、肝素钠和 双抗分别有何作用？外周血淋巴细胞是不能增殖的分化细胞群， 在体外无菌培养条件下，若于培养基 中植物凝集素（PHA）则可刺激处G。期的淋巴细胞转化为淋

9、巴母细胞，重新有丝 分裂的能力，经一段时间的培养即可获得大量分裂期细胞以供染色体分析。秋水仙素（或秋水酰胺）可通过干扰微管组装而抑制纺锤丝形成，使细胞分裂顺利 进入后期而停滞于中期，从而可在短期内积累大量最适于进行染色体分裂中期分 裂相。此外，秋水仙素还能使染色单体缩短、分开，使染色体呈现明显形而利于 辨认。肝素，主要起抗凝血作用双抗，为防止培养时期细菌的污染17 果蝇雌雄（成虫期）鉴别最主要或最准确的方法是什么？最准确的是看性梳，性梳是雄果蝇的第二性征，雄果蝇的第一对前足的第一个跗 节上，因形状与梳头的梳子非常相似，又与性别有关而得名。雌果蝇没有这个结 构。但是性梳这一性状需要借助显微镜观察

10、。除了性梳之外，还有一些其它性状都可以用肉眼直接观察。具体如下: 雄蝇，个体较小，腹部条纹3 （腹片4片），腹部末端圆钝，颜色深。 雌蝇，个体较大，腹部条纹5 （腹片6片），腹部末端尖，颜色浅。18. 本学期我们做了哪些遗传学实验？通过这些实验你了解和掌握了哪些生物学 基本实验技能？本学期一共做了六次遗传学实验分别是：1. 植物细胞有丝分裂及染色体行为观察： 通过本次试验掌握制作植物根尖有丝分 裂装片的技术。2. 减数分裂制片及染色体行为观察：掌握减数分裂制片方法。3. 果蝇生活史及性状观察：掌握试验果蝇的饲养管理技术。4. 果蝇的唾液腺染色体制片及观察：掌握解剖果蝇幼虫、分离唾腺的方法，掌握

11、 唾腺染色体的制片技术。5. 植物多倍体激发、制片及观察：掌握了植物多倍体人工诱发技术及多倍体鉴定 方法。6. 人体外周血淋巴细胞培养及制片：掌握了人体外周血淋巴细胞的悬浮培养法与 人体细胞染色体标本的制备和核型分析的方法，学会了人体细胞遗传学实验的基 本操作技术。19. 植物染色体制片时，我们使用的是什么染色液？人类染色体染色时我们使用 的是何种染色液，如何配制？植物染色体制片时使用的是改良苯酚品红染色液人类染色体染色时我们使用的是吉姆萨染液（Giemsa ）,配置：称Giemsa粉剂 1g置研钵中，加少量甘油研磨至无颗粒为止，再加入甘油共50ml，放在56C60 C的温箱或水浴内12h，促

12、使溶化。冷却后加入甲醇 50ml，室温放置23d 后，过滤使用。同时将 Giemsa原液1份加片pH7.4的磷酸缓冲液9份稀释， 或在10ml磷酸缓冲液（pH7.4 ）中加入1015滴Giemsa原液，应随用随配。20. 核型分析有何作用？是细胞遗传学分析的基本方法：研究染色体形态、结构、功能的相互关系，可根据染色体数目变异判断病因。核型分析对于人类医学遗传研究及临床应用都有重大意义。如肿瘤细胞的核型分 析已被应用于肿瘤的临床诊断、愈后极药物疗效的观察；通过培养后的淋巴细胞 或皮肤成纤维细胞的核型分析，可以对人的染色体疾病进行诊断，而对培养后的 羊水中胎儿脱屑细胞或胎盘绒毛膜细胞的核型分析则可

13、用于胎儿性别及是否患 有染色体病的产前诊断。21. 微核检测有何作用？微核试验在对外来化合物（如药品、食品添加剂、农药、化妆品、环境污染物等 ） 遗传毒性和职业暴露人群遗传损害监测和现场生态环境检测方面，在诊断和预防肝癌、食管癌、肺癌等恶性肿瘤方面得到了大量的应用。微核试验最大的优点是 经济、简单、快速，而国内外大量的对试验研究，比较一致的看法是该方法在敏 感性、特异性和准确性方面，与经典的染色体畸变分析方法基本相当川。因而, 特别适合作为大量化合物和现场人群初筛的实验方法。22. 当你进行果蝇性别鉴定时，果蝇苏醒了，你如何处理？应迅速将果蝇放入麻醉瓶中继续麻醉23. 如何获得果蝇唾腺？过程中应注意哪些细节？把载玻片放在双筒解剖镜下，其上滴上一滴生理盐水。取幼虫置于生理盐水中，两手各握一枚解剖针，以左手的针压在幼虫末端1/3处，固定幼虫，右手的针尖压住幼虫头