致病菌检验程序及原始记录(考试)

1、血清凝集试验操作步骤及示意图1在玻片上分出2个区域区域1区域22在一个区域内滴加1滴血清，在另一个区域内滴加1滴生理盐水血清生理盐水3从三糖铁斜面上用灭菌的接种环挑取1环可疑菌落4先与盐水研成乳状液，接种环灭菌，再从TSI上挑取1环可疑菌落与血清研成乳状液5将玻片倾斜，摇动混合 1min ,出现如下现象：a菌+血清凝集，菌+生理盐水不凝集，为阳性反应 ；b菌+血清不凝集，菌+生理盐水不凝集，为阴性反应 ；c菌+血清不凝集，菌+生理盐水凝集，为自凝反应，粗糙型菌株，不能分型沙门氏菌检验程序(GB/T4789.4-2008)25g(mL)样品 +225mL36 C 1 C8h-18h吸取 1mL+

2、10mL SC吸取 1mL+10mL TTB36 C 1 C 18h-24h42 C1C 18h-24h划线B S划线显色平板划线B S划线显色平板36 C 1 C ,40h-48h36 C 1 C ,18h-24h36 C 1 C ,40h-48h36 C1 C ,18h-24h挑取可疑菌落TSI、尿素（pH7.2 ）、靛基质、赖氨酸*36 C 1 C 18h-24h（48h ）TSI :底层产酸（变黄）革兰氏染色-镜检斜面产碱（变红）沙门氏菌血清凝集试验2沙门氏菌检验原始记录选用设备、培养基和试剂选用设备、设备编号及计量状态选用培养基、试剂1.电子天干（感量 O.lg ） 设备编号: xx

3、xx1.BPW8.尿素琼脂有计量合格标识，并在检定有效期内2.TTB9.赖氨酸脱羧酶2.恒温培养相（36 C1 C）设备编号: xxxx3.SC10.靛基质试剂有计量合格标识，并在检定有效期内4.BS11.A-F多价血清3.恒温培养箱（42 C1 C ）设备编号：xxxx5.沙门氏菌显色平板12.革兰氏染色液有计量合格标识，并在检定有效期内6.TSI13.生理盐水4.显微镜设备编号：xxxx7.蛋白胨水实验记录单样品名称乳粉检验依据GB/T 4789.4-2008样品编号xxxx样品状况V固体口液体样品数量1 件（25g ）检验日期xxxx年xx月 xx日操作步骤样品处理中和试剂/pH调节前/

4、pH调节后/稀释度选择 1:1 1:10 1:100检验内容培养基、试剂培养条件（温度、时间）前增菌BPW36 C1C , 8h-18h增菌培养TTB42 C1C , 18h-24hSC36 C1C , 18h-24h分离培养BS36 C1C , 40h-48h显色平板36 C1C , 18h-24h生化试验TSI、赖氨酸、蛋白胨水、尿素（pH7.2）36 C1C , 18h-24h(48h )结果判定菌落特征BS菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色显色平板菌落为紫红色生化试验TSI :斜面（-）、底层（+ ）、H2S （ + ）、产气（+ ）；靛基质（-）、pH7

5、.2尿素（-）、赖氨酸脱羧酶（+）革兰氏染色阳性“阴性；形态特征：无芽孢杆菌血清学鉴定多价血清检杳：“凝集不凝集自凝不自凝结果报告25g样品中检出沙门氏菌属检验人准考证号xxxx志贺氏菌检验程序（GB/T4789.5-2003）25g(mL)样品 +225mL36 C1C 6h-8h划线H E_划线麦康凯36 C1 C18h-24h挑取可疑菌落TSI,葡萄糖半固体*36 C1 C 18h-24hTSI :底层产酸（变黄）斜面产碱（变红）革兰氏染色-镜检志贺氏菌血清凝集试验报告2志贺氏菌检验原始记录选用设备、培养基和试剂选用设备、设备编号及计量状态选用培养基、试剂1.电子天干（感量 O.lg ）

6、 设备编号: xxxx1.GN6.革兰氏染色液有计量合格标识，并在检定有效期内2.HE7.生理盐水2.恒温培养相（36 C1 C） 设备编号: xxxx3.麦康凯琼脂8.志贺氏菌多价血清有计量合格标识，并在检定有效期内4.TSI3.显微镜设备编号：xxxx5.葡萄糖半固体实验记录单样品名称乳粉检验依据GB/T 4789.5-2003样品编号XXXX样品状况p固体液体样品数量1 件(25g )检验日期XXXX年XX月 XX 日操作步骤样品处理中和试剂/pH调节前/pH调节后/稀释度选择 1:1p/1:10口:100检验内容培养基、试剂培养条件（温度、时间）增菌培养GN增菌液36 C1C , 6h

7、-8h分离培养HE琼脂、麦康凯琼脂36 C 1 C , 18h-24h生化试验TSI、葡萄糖半固体36 C 1 C , 18h-24h结果判定菌落特征HE无色透明，不发酵乳糖麦康凯无色透明，不发酵乳糖生化试验TSI底层 丁产酸 产碱；斜面 产酸产碱；硫化氢 阳性阴性葡萄糖半固体葡萄糖 口产酸不产酸表面生长；有动力无动力；产气 p不产气血清学试验4种志贺氏菌多价血清检查：一|凝集不凝集自凝 J不自凝革兰氏染色阳性 R阴性；形态特征：短杆菌、无芽孢、无荚膜结果报告25g样品中检出志贺氏菌检验人准考证号XXXX金黄色葡萄球菌检验程序(GB/T4789.10-2008)25g(ml) 样品+225ml

8、 灭菌生理吸取 5ml+50ml 7 5% Nacl 肉汤36 C 1 C 18h-24h1 r1 r划线血平板36 C1 C 18h-24h戈U线 Baird-Parker 平板36 C1 C 18h-24h 或 45h-48h观察溶血并挑取可疑菌落革兰氏染色-镜检洗入5mL BHI肉汤18h-24h血浆凝固酶试验吸 0.2mL BHI+0.5mL 兔血血浆凝固酶试验(对照)吸表皮 BHI0.2mL+0.5mL 兔浆，摇匀，置36 C1 C水浴血浆，摇匀置36 C1 C水浴报2金黄色葡萄球菌检验原始记录选用设备、培养基和试剂选用设备、设备编号及计量状态选用培养基、试剂1.恒温培养相(36 C

9、 1 C) 设备编号: xxxx有计量合格标识，并在检定有效期内1.7.5%氯化钠肉汤5兔血浆2.Baird-Parker琼脂平板6.革兰氏染色液2.显微镜设备编号.XXXX3.BHI肉汤7.火菌牛理盐水4血琼脂平板8.1mol/L NaOH实验记录单样品名称饮料检验依据GB/T 4789.10-2008样品编号XXXX样品状况固体甘液体样品数量1 件(25mL )检验日期XXXX年XX月 XX 日操作步骤样品处理中和试剂1mol/LNaOHpH调节前4.6pH调节后7.0稀释度选择 1:1V 1:10 1:100检验内容培养基、试剂培养条件（温度、时间）增菌培养7.5%氯化钠肉汤36 C1C

10、, 18h-24h分离培养Baird-Parker 琼脂平板血琼脂平板36 C1 C, 18h-24h 或 45h-48h ;36 C1 C, 18h-24h生化试验BHI肉汤血浆凝固酶试验36 C1 C, 18h-24h36 C1 C，每半小时观察一次，观察6h结果判定菌落特征Baird-Parker琼脂平板圆形、光滑凸起，湿润，颜色呈灰色到黑色，边缘淡色，周围为一混浊 带，在其外层有一透明圈血琼脂平板金黄色（白色），大而凸起、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈生化试验血浆凝固酶试验凝固不凝固阴性对照：凝固不凝固革兰氏染色v阳性 阴性；形态特征：葡萄球状，无芽孢，无荚膜结果报告25 mL样

11、品中检出金黄色葡萄球菌检验人准考证号XXXX溶血性链球菌检验程序(GB/T4789.11-2003)25g(ml) 样品+225ml 灭菌生理吸取 5ml+50 m葡萄糖肉浸液肉36 C 1 C 24h划线血平板36 C 1 C 24h划线血平板(分纯培养)36 C 1 C 24h观察溶血并挑取可疑菌落杆菌肽敏感试验革兰氏染色-镜检涂布血平板，36 C1 C 18h-24h有抑菌带+，无抑菌带2溶血性链球菌检验原始记录选用设备、培养基和试剂选用设备、设备编号及计量状态选用培养基、试剂1.电子天干（感量 O.lg ） 设备编号: xxxx1.葡萄糖肉浸液肉汤有计量合格标识，并在检定有效期内2.血

12、琼脂平板2.恒温培养相（36 C1 C） 设备编号: xxxx3.火菌牛理盐水有计量合格标识，并在检定有效期内4.杆菌肽纸片（0.04单位）3.显微镜设备编号：xxxx5.革兰氏染色液实验记录单样品名称奶粉检验依据GB/T 4789.11-2003样品编号XXXX样品状况V固体液体样品数量1 件（25g ）检验日期XXXX年XX月 XX 日操作步骤样品处理中和试剂/pH调节前/pH调节后/稀释度选择1:1V/ 1:10口:100检验内容培养基、试剂培养条件(温度、时间)增菌培养葡萄糖肉浸液肉汤36 C1C, 24h分离培养血琼脂平板36 C1C, 24h生化试验杆菌肽敏感试验36 C1C, 1

13、8h-24h结果判定菌落特征血琼脂平板：灰白色，半透明或不透明，表面光滑生化试验杆菌肽敏感试验：出现抑菌带不出现抑菌带革兰氏染色V阳性 阴性；形态特征：链球状，无芽孢结果报告25g样品中检出溶血性链球菌检验人准考证号XXXX副溶血性弧菌检验程序25g(mL)样品+225mL 3%氯化钠碱性蛋白36 C1C 8h-18h划线TCBS平板_划线显色平板36 C1C 18h-24h挑取可疑菌落,36 C1C 18h-24h氧化酶试验，革兰氏染色3%氯化钠TSI琼脂，嗜盐性试验36 C1C 24h生化试验2副溶血性弧菌检验原始记录选用设备、培养基和试剂选用设备、设备编号及计量状态选用培养基、试剂1.电

14、子天干（感量 O.lg ） 设备编号: xxxx1.APW6.生化一套有计量合格标识，并在检定有效期内2.TCBS7.革兰氏染色液2. 恒温培养相（36 C1 C） 设备编号: XXXX 有计量合格标识，并在检定有效期内3. 显微镜设备编号：xxxx3氧化酶试剂8.生理盐水4.3%氯化钠TSA5.3%氯化钠TSI实验记录单样品名称海产品检验依据GB/T 4789.7-2008样品编号XXXX样品状况V固体液体样品数量1 件(25g )检验日期XXXX年XX月 XX 日操作步骤样品处理中和试剂/pH调节前/pH调节后/稀释度选择1:1Vz 1:10口:100检验内容培养基、试剂培养条件（温度、时间）增菌培养APW36 C1 C, 8h-18h分离培养TCBS、显色平板36 C 1 C, 18h-24h生化试验3%氯化钠TSA、氧化酶3%氯化钠TSI、嗜盐试验36 C1 C, 18h-24h36 C1 C, 24h生化一套36 C 1 C, 24h-48h结果判定菌落特征TCBS平板：圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落初步 鉴 疋3