提高移植物抗白血病效应的研究进展

1、DOC 格式论文，方便您的复制修改删减提高移植物抗白血病效应的研究进展(作者：单位：邮编：)【关键词】 干细胞移植；移植物抗白血病；宿主抗移植物反应移植物抗白血病(graft versus leukemia，GVL效应指对恶性 血液疾病进行异基因干细胞移植(allo-HSCT)后所产生的一种重要 的免疫介导现象1。这种反应能有效清除微小残留病灶，减少肿瘤 的复发率，使患者得以持续缓解甚至完全治愈。allo-HSCT是治疗恶 性血液系统疾病的有效手段，但移植后肿瘤复发和移植物抗宿主病(GVHD是病人存活率的主要障碍。人们发现allo-HSCT后发生GVHD 的病人肿瘤复发率低，而自体或同基因干细

2、胞移植可不发生GVHD但移植后肿瘤复发率高，长期无病生存不到50%从而认为allo-HSCT 中存在着GVL效应2。GVL是指 allo-HSCT后供者T细胞通过与肿 瘤表面抗原发生免疫应答而清除白血病细胞的效应。GVHD中有GVL效应，而GVL可不依赖于GVH3。如何提高移植后 GVL效应，同 时避免GVHD当今研究的热点问题，现综述如下。1用细胞因子特异性诱导GVL效应细胞因子在免疫反应的激活和调节中起关键作用，研究表明:37,某些细胞因子能抑制和杀伤肿瘤细胞，且对正常的造血干 细胞(HSC不但毫无影响，甚至还可以促进其增殖，据此可研究出 诱导GVL效应的方法。在GVL中应用最早的细胞因子

3、是细胞白介素-2(IL-2 )，它能活化T细胞、NK细胞，促进和增强其杀伤溶解白血病 细胞的能力，诱导肿瘤坏死因子(TNF、干扰素(IFN)、粒单系集落 刺激因子(M-CSF的释放，并与这些细胞因子相互作用发挥GVL效应。这可能是形成GVL效应的基础。Leshem等3用鼠AML模型探讨在allo-HSCT受体内GVL 效应的诱导机制，研究重组白细胞介素-2 (rIL-2 )增强GVL效应和 细胞毒性T淋巴前体(CTLp细胞增长频率的关系。将 AML鼠负荷 SJL/J (H-2s)并经致死量照射后，植入骨髓细胞(BMC和脾细胞(SC) 的混合物(取自正常的同基因或异基因鼠)，为增强GVL效应，移

4、植 当天开始腹腔内注射rIL-2 (1.2 xiO5IU/ml )，连续3天。从负荷 SJL/JAML鼠提取SC输注给第二受体鼠，用次要组织相容性抗原(mHAgS不同的同基因/异基因BMC联合SC解救，结果这些受鼠全 部死于白血病；而用rIL-2体内激活的BMC联合SC解救的受鼠却没 有并发白血病。与体内实验相一致，体外用 rIL-2 (6X 103IU/ml ) 培养SC4天，发现CTLp细胞出现频率增长了 520倍，且杀伤力增 强26倍。从而认为rIL-2诱导GVL效应可能主要通过CTLp活化， 也可能通过激活异基因的 NK细胞和非MHC艮制的杀伤细胞的途径， 显示了 rlL-2在诱导GV

5、L效应中的重要作用。IL-12是一个多效性细 胞因子，能刺激NK细胞增殖，诱导CTL活化及T细胞、NK细胞分泌 INF。其抗肿瘤活性依赖于CD+T细胞而不依赖NK细胞，能保留CD+T 细胞介导的GVL效应，同时抑制GVHDLin等4用IL-12和IL-15 单独或联合作用于脐血（CB、成人外周血（APB的单个核细胞（MNC 和CD56淋巴细胞亚群，发现IL-15对CB和APB的MNC勺扩增效应 优于IL-12，且IL-12联合IL-15促进3种细胞株的增殖效果强于两 者单用这些发现为 CB移植的患者进行细胞因子治疗提供了理论依 据。Sun等5用IL-2、IL-12单独或联合作用于用粒系集落 刺

6、激因子（G-CSF动员的外周血单个核细胞（PBMC的抗肿瘤活性， 发现动员后的细胞毒活性在IL-2或IL-12作用前较低，用IL-2活化 2448h后，其细胞毒活性逐渐增加，经72h后CD3和CD8+T细胞比 例增加；而且联合应用IL-2和IL-12培养，其抗肿瘤作用显著增强， 因而认为IL-2联合IL-12体外培养可增强G-CSF动员的PBM诱导的 GVL效应。近来研究表明IL-11、人类重组角化细胞生长因子（KGF :6及某些金属蛋白酶抑制剂 KR-7785 :7抑制GVHD勺同时能有 效保留GVL效应，另一方面INF-a、G-CSF等刺激因子不仅可激活免 疫效应细胞，也直接影响白血病细胞

7、的生长、 分化和白血病克隆干细 胞的增殖，它们将在诱导分离两者中起重要作用。 细胞因子在GVL效 应中的作用日益受人瞩目，人们认为多种细胞因子诱导 GVL效应的作 用优于单一细胞因子，研究最佳的多细胞因子共同作用方案来诱导 GVL效应是白血病原体细胞免疫治疗中的关键。2寻找特异性抗原分离GVL和 GVHD人们希望发现仅表达于白血病细胞表面的抗原。 利用这种抗 原刺激供者T细胞使之成为针对特定抗原的细胞毒性T淋巴细胞（CT）通过特异性免疫应答杀伤白血病细胞，发挥 GVL效应，对宿 主的正常组织不产生损害，从而避免了 GVH啲发生。2.1肿瘤特异性抗原（TSA TSA特异性表达于肿瘤细胞表面， 如

8、p21、ras和bcr/abl，作为GVL靶抗原似乎很有可能。但针对这 些抗原的活化T细胞在allo-HSCT后是否能发挥GVL作用尚缺乏足够 证据8。有些学者认为9 TSA作为同质反应的靶抗原，可能是 肿瘤细胞生存非必需的，在肿瘤生长、迁移过程中，会发生抗原丢失， 从而逃避机体免疫系统的识别，引起白血病复发。但有的学者认为:10 bcr/abl融合蛋白b2a2和b3a3是GVL重要的靶抗原，它们 能在慢性粒细胞白血病（CML病人进行allo-HSCT后引发有效的GVL 效应。因此TSA在分离GVL和 GVH中的作用有待进一步研究。2.2肿瘤相关性抗原（TAA TAA可表达在正常组织器官，但在

9、 白血病细胞表面过表达，它和 TSA均非同种抗原，因此在不能进行 allo-HSCT时，可作为靶抗原用于免疫治疗11如PR3和WT-1均 在白血病细胞表面高表达，由它们诱导产生的CD8+CT可在体外抑制白血病细胞克隆，但不影响正常克隆细胞生长12。但TAA用于免 疫治疗存在一些问题有待克服，因为TAA对病人免疫系统来说是新的 自身抗原，它们通常表达在非专职抗原提呈细胞表面，这些抗原通常被T细胞忽视，更不利的是，它能使对 TAA反应的T细胞耐受。所以 TAA作为分离GVL和GVHD勺靶抗原也存在未解决的问题。2.3 mHAgs实验研究13和临床资料14均证明，即使主要 组织相容性复合体（MHC完

10、全配合，移植后仍然发生排斥反应，但 其强度轻、速度慢，从而提示存在其它可能诱导排斥反应的抗原，此 种抗原称mHAgs它们表达于机体组织细胞表面，被降解成肽链片段 后，具同种异型抗原决定簇，可被 MHC分子所提呈15。既可引起 GVHD也可引起GVL限制性表达于HSC或白血病细胞表面的 mHags 是诱发GVL效应理想的靶抗原16。因此应用mHAg分离GVL和GVHD 具有重要意义。目前发现的有 HA-1、HA-2和UTY等。HA-1是具有单 个氨基酸多态性的复等位基因，其肽链为九肽结构，由KIAA0223等位基因编码。有两种HA-1即HA-1H和HA-1R（相差1个氨基酸）17。 HA-1位点

11、组成除已知HILA-A2/HA-1HT细胞决 定簇，还有 HLA-B60/HA-1H决定簇。移植前选那些与受者 HLA-A2或HLA-B60相 同，HA-1不同的供者，针对HA-1特异性CTL输注给移植后复发的白 血病患者，可根除白血病细胞13。但HA-1在GVH冲也起重要作 用。研究认为15，HA-1像小鼠B6doml,是一种免疫优势抗原，在 树突状细胞（DQ表面高表达，可引发决定簇扩展即 T细胞对表达于 其它组织细胞表面的 mHAgS发生反应，弓I起GVHD此外，HA-1特异 性的CTL起作用时分泌炎症因子也可造成器官损伤，但这样引起的 GVHD-般较轻。所以HA-1是理想的靶抗原。HA-

12、2是由位于7号染色 体短臂的MY01G(肌球蛋白相关基因)编码，有两种 HA-2即HA-2V(YIGEVLVSV HA-2M ( YIGEVLVSVM : 18 。HA-2 的识别也受HLA-A*0201限制。由于它也是仅表达于白血病细胞及 HSC表面的， 故针对它的特异CTL可发生GVL而不发生GVHDUTY是由Y染色体编 码的肽链片段，由HLA-B8提呈，它高表达在HSC表面，而在其它组 织细胞低表达。男性HSC表面UTY呈阳性表达，而女性的均呈阴性表 达。因此UTY可广泛用于男性受者接受女性供者移植后的免疫治疗:9。mHAgs也是肿瘤细胞表面蛋白，是维持肿瘤生存所必需的，在 肿瘤生长和迁

13、移过程中不丢失，从而不能逃避机体免疫系统识别。 Allo-HSCT后免疫耐受形成，并不导致所有同种反应T细胞克隆丢失， 宿主还保留针对一些mHAg啲潜在同种反应，尤其针对那些组织限制 性的9。实验观察发现复发后的白血病细胞对移植前供者的T细胞还是敏感的。这更提高了 mHAg在分离GVL和GVH呼的地位17。上述工作虽刚起步，但成绩可喜。相信随着GVH取GVL效应发生机制研究的不断深入，不远的将来一定会在allo-HSCT治疗中 诱导GVL效应和分离 GVL与GVHD方面取得重大突破，使临床 allo-HSCT治疗发挥更加重要的作用。【参考文献】1 Barnes DVyLoutit JF, Ne

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